肿瘤内菌群在消化系统肿瘤中的研究进展

肿瘤内菌群是指存在于肿瘤中并构成肿瘤微环境的一类细菌群落.作为肿瘤微环境的重要组成部分,肿瘤内菌群通过多种机制影响肿瘤的发生和发展,并改变肿瘤对化疗和免疫治疗的反应.此文主要概述肿瘤内细菌的来源和作用机制,重点关注消化系统肿瘤内细菌的组成和功能,并探讨其在抗肿瘤治疗中的应用前景,以期为其临床应用提供参考.

piRNA通路中调控蛋白质研究进展

piRNA是一类与Argonaute蛋白家族的PIWI亚家族蛋白结合的非编码小RNA,其在沉默转座子、维持基因组的稳定性和保证生物体生殖细胞的正常发育中起着重要作用。piRNA通路包括piRNA的生成、piRISC的形成,以及由piRISC介导的转座子沉默。现总结了目前发现的参与调控果蝇和小鼠中piRNA通路的蛋白质因子。

G蛋白偶联受体的结构与功能——2012年诺贝尔化学奖相关研究成果简介

2012年的诺贝尔化学奖授予了美国科学家Robert J.Lefkowitz以及Brian K.Kobilka,以表彰他们在"G蛋白偶联受体"研究中作出的突出贡献。G蛋白偶联受体是人体中分布最广、地位最重要的膜蛋白受体,其著名的7次跨膜结构使得人人了解了其复杂性,同时,它所介导的各种信号通路也使得其有着重大的研究和临床价值。通过简单介绍G蛋白偶联受体的结构和功能方面的一些概况,来对其进行一些讨论。

神经纤维瘤蛋白1在胆囊癌中的机制研究

目的探讨神经纤维瘤蛋白1(NF1)在胆囊癌中的机制。方法采用实验研究方法。培养人胆囊癌细胞系GBC‑SD、NOZ、SGC996、EH‑GB1、ZJU0428,人胚肾细胞系293T,人宫颈癌细胞系HELA;构建免疫共沉淀实验所需的重组质粒mRFP‑YAP1^(FL)‑FLAG和eGFP‑MYC‑NF1^(2650~2750)‑HA,体外纯化Yes相关蛋白1(YAP1)截断体蛋白和NF1融合蛋白。分别采用等温滴定量热实验、GST pull‑down实验、免疫共沉淀实验、免疫荧光和激光共聚焦检测NF1与YAP1的体内外相互作用,采用蛋白质免疫印迹法检测不同胆囊癌细胞系中NF1蛋白的表达水平。观察指标:(1)NF1与YAP1的体外相互作用。(2)NF1与YAP1的细胞内相互作用。(3)不同人胆囊癌细胞系中NF1蛋白的表达水平。结合解离常数由ITC200等温滴定量热仪自带软件输出,以x±s表示。计数资料以绝对值表示。结果(1)NF1与YAP1的体外相互作用。①等温滴定量热实验结果显示:PPQY肽段滴定体外纯化YAP1的第1个WW1结构域蛋白存在相互作用,结合解离常数为(0.42±0.06)mmol/L;PPQY肽段滴定体外纯化YAP1的162~275蛋白区段存在相互作用,结合解离常数为(0.69±0.14)mmol/L。②GST pull‑down实验结果显示:相对于GST蛋白和His‑Sumo‑YAP1 WW1反应体系,在GST‑PPQY融合蛋白与His‑Sumo‑YAP1^(WW1)反应体系的蛋白泳道中可以观察到目的蛋白His‑Sumo‑YAP1^(WW1);相对于GST蛋白和His‑Sumo‑YAP1^(WW2)反应体系,在GST‑PPQY融合蛋白与His‑Sumo‑YAP1^(WW2)反应体系的蛋白泳道中可以观察到目的蛋白His‑Sumo‑YAP1^(WW2)。(2)NF1与YAP1的细胞内相互作用。①免疫共沉淀实验结果显示:在使用FLAG凝胶珠孵育共转染mRFP‑YAP1 FL‑FLAG和eGFP‑MYC‑NF12650~2750‑HA的细胞裂解液中,观察到NF1蛋白的免疫印迹。②免疫荧光和激光共聚焦检测结果显示:在人胆囊癌细胞系NOZ的原位荧光中,YAP1和NF1荧光明显,主要定位于细胞质中。在人胆囊癌细胞系SGC996的原位荧光中,YAP1荧光明显,主要定位于细胞核中,NF1荧光不明显。(3)不同人胆囊癌细胞系中NF1蛋白的表达水平。蛋白印迹实验结果显示:以人宫颈癌细胞系HELA中NF1蛋白的表达量为标准,在人胆囊癌细胞系EH‑GB1、GBC‑SD、NOZ、SGC996、ZJU0428中,NF1蛋白的相对表达量分别为1.28、0、1.01、0、0。结论NF1可能通过直接作用于YAP1蛋白影响胆囊癌。