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吉非替尼耐药的低分化肺癌细胞系的建立及其生物学特征分析 被引量:1
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作者 黄旻然 金娇悦 +4 位作者 吴映雪 徐晨阳 王金超 应莉莎 苏丹 《实用肿瘤杂志》 CAS 2020年第2期127-133,共7页
目的从1例中国女性肺癌患者的胸腔积液中分离建立原代低分化肺癌细胞系,并进行生物学特征分析。方法收集1例肺癌患者胸腔积液,取沉淀物,在含有10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素溶液和1%非必需氨基酸的DMEM/F12培养液中培养。待细胞长满后,... 目的从1例中国女性肺癌患者的胸腔积液中分离建立原代低分化肺癌细胞系,并进行生物学特征分析。方法收集1例肺癌患者胸腔积液,取沉淀物,在含有10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素溶液和1%非必需氨基酸的DMEM/F12培养液中培养。待细胞长满后,使用胰蛋白酶梯度消化法传代使肿瘤纯度达>95%。进一步分析已建立细胞系(命名为ZLC-001)的核型、短串联重复序列(short tandem repeats,STR)、细胞增殖、肿瘤标志物检测和成瘤性等生物学特征。肿瘤原代细胞三维立体培养法药敏检测技术(collagen gel droplet-embedded culture drug sensitivity test,CD-DST)用于评估ZLC-001对吉非替尼、舒尼替尼、索拉非尼、拉帕替尼和伊马替尼的药物敏感性。结果成功建立来自低分化肺癌患者(女性,44岁,pStageⅣ)的原代细胞系ZLC-001。ZLC-001细胞可贴壁生长,并可稳定传代>30代。生物学特征分析中核型分析表明染色体数目主要分布在60~69。免疫组织化学结果显示,细胞角蛋白(cytokeratin,CK)和乳腺癌相关蛋白1(breast cancer associated protein 1,BRAP1)为阳性,波形蛋白、Wnt-1和钙结合蛋白(calretinin,CR)个别阳性,Napsin A、MOC-31、甲状腺转录因子1(thyroid transcription factor 1,TTF1)和D2-40均为阴性。ZLC-001细胞在裸鼠中成瘤能力强。ZLC-001对吉非替尼、舒尼替尼、索拉非尼和伊马替尼耐药,但对拉帕替尼中度敏感。结论成功建立来自中国患者的新型低分化肺癌细胞系。这种功能齐全的细胞系为开展肺癌生物学和药物反应研究提供理想的模型与工具。 展开更多
关键词 肺肿瘤 原代细胞系 吉非替尼耐药
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生物样本库保存肺组织制作冷冻切片的体会 被引量:4
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作者 王灿铭 苏丹 +3 位作者 应莉莎 黄旻然 吴映雪 胡锦林 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期488-489,共2页
随着生物样本库的建立和科研需求,生物样本库中保存的肺组织不仅需要进行核酸的提取,还需行HE染片。现将从生物样本库中保存的肺组织冷冻切片与常规术中肺组织冷冻切片的制作不同注意事项汇报如下。1材料与方法1.1临床资料收集浙江省肿... 随着生物样本库的建立和科研需求,生物样本库中保存的肺组织不仅需要进行核酸的提取,还需行HE染片。现将从生物样本库中保存的肺组织冷冻切片与常规术中肺组织冷冻切片的制作不同注意事项汇报如下。1材料与方法1.1临床资料收集浙江省肿瘤医院生物样本库肺癌标本90例,每例包括正常肺组织4块,癌旁组织4块,癌组织4块。1.2材料英国产Thermo FSE型冷冻切片机。DEPC原液、甲醇、Gill改良苏木精染液、醇溶性伊红、梯度乙醇和二甲苯等。 展开更多
关键词 肺组织 冷冻切片 生物样本库
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PDX模型在肿瘤研究中的应用现状与展望 被引量:1
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作者 金娇悦 张繁荣 +1 位作者 黄旻然 苏丹 《现代实用医学》 2019年第9期1278-1280,共3页
在我国,癌症的发病率呈现继续上升的趋势[1]。尽管过去几十年中,抗肿瘤药物的开发取得了爆炸式的发展,但大多数新疗法都不能顺利通过III期临床试验[2]。究其根源,缺乏合适的体内模型是主要障碍。患者来源的异种移植瘤(PDX)模型是指患者... 在我国,癌症的发病率呈现继续上升的趋势[1]。尽管过去几十年中,抗肿瘤药物的开发取得了爆炸式的发展,但大多数新疗法都不能顺利通过III期临床试验[2]。究其根源,缺乏合适的体内模型是主要障碍。患者来源的异种移植瘤(PDX)模型是指患者肿瘤组织或者细胞植入的免疫缺陷小鼠,被认为和原始肿瘤有很高的相似度,目前广泛应用于各类肿瘤的研究中。 展开更多
关键词 肿瘤研究 患者来源 抗肿瘤药物 异种移植瘤 免疫缺陷小鼠 体内模型 相似度 肿瘤组织
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冰冻组织样本病理质控在转化研究中的应用价值
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作者 王灿铭 张慧萍 +5 位作者 黄旻然 吴映雪 泮晓丹 胡锦林 应莉莎 苏丹 《现代实用医学》 2021年第1期56-58,共3页
目的探讨冰冻保存组织样本病理质控在转化研究中的应用价值。方法选取93例生物样本库中长期保存的非小细胞肺癌患者的肿瘤、癌旁和远端正常肺组织,共848份通过冷冻切片染色进行病理诊断复核和肿瘤细胞含量评估;取其中172份样本进行RNA... 目的探讨冰冻保存组织样本病理质控在转化研究中的应用价值。方法选取93例生物样本库中长期保存的非小细胞肺癌患者的肿瘤、癌旁和远端正常肺组织,共848份通过冷冻切片染色进行病理诊断复核和肿瘤细胞含量评估;取其中172份样本进行RNA纯度和完整性检测,165份样本进行DNA浓度和质量检测。结果 93例非小细胞肺癌样本有6例与原病理诊断不符,总样本的病理诊断合格率为93.55%(87/93),癌组织为77.8%(245/315),癌旁组织为99.02%(202/204),正常组织为97.57%(321/329)。RNA纯度OD260/280为2.037±0.57RNA分子RIN为7.47±1.69,DNA最大浓度为200.69 ng/μl最小浓度为11.60 ng/μl,平均131.29 ng/μl。结论加强研究用样本使用前的病理诊断和肿瘤细胞含量质控是确保下游分子实验的重要保障。 展开更多
关键词 生物样本 病理质控 DNA质量 RNA质量
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