山区“稻+鱼+鸭”生态养殖技术

通过稻田的选择、稻田的改造、水稻的种植、稻田养鱼、养鸭形成综合种养模式,该种养模式通过多年的实践形成山区“稻+鱼+鸭”生态养殖技术,该技术能多途径开发食物资源,从而更好地保障国家的食物安全,提供更加丰富多样、营养健康的食物供应,有效提高山区稻田的综合效益。

^(18)F-FDG PET/CT代谢参数联合临床病理特征对晚期结直肠癌患者KRAS基因突变的评估价值

目的探讨^(18)F-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)PET/CT代谢参数联合临床病理特征对晚期结直肠癌患者鼠类肉瘤病毒癌基因(KRAS)基因突变的评估价值。方法回顾性分析64例晚期结直肠癌患者的临床资料。所有患者在治疗前均接受^(18)F-FDG PET/CT检查。分析最大标准化摄取值(SUV_(max))、不同阈值下的代谢肿瘤体积(MTV)和病变总糖酵解(TLG)、临床病理特征与患者KRAS基因突变状态之间的关系。通过多因素Logistic回归模型分析与患者KRAS基因突变相关的因素。采用受试者工作特征曲线分析^(18)F-FDG PET/CT代谢参数、临床病理特征及二者联合评估患者KRAS基因突变的效能。基于^(18)F-FDG PET/CT代谢参数和临床病理特征构建列线图模型。结果单因素和多因素Logistic回归分析结果显示,SUV_(max)≥19.55、MTV50%≥7.95、肿瘤组织中/高分化与患者KRAS基因突变有关。SUV_(max)、MTV50%和肿瘤组织分化程度评估患者KRAS基因突变的曲线下面积(AUC)分别为0.653、0.625和0.621,三者联合评估的AUC为0.800,均高于单个指标的AUC(P<0.05)。基于SUV_(max)、MTV50%和肿瘤组织分化程度构建的列线图模型的一致性指数为0.800,校准曲线与参考线基本拟合。结论^(18)F-FDG PET/CT的代谢参数SUV_(max)、MTV50%与晚期结直肠癌患者KRAS基因突变密切相关,联合肿瘤组织分化程度所构建的列线图模型对患者KRAS基因突变具有较高的评估价值。

IP3R1基因沉默对鸭子宫上皮细胞Ca^(2+)转运的调控效应研究

本研究旨在探究IP3R1基因沉默后对鸭子宫上皮细胞增殖、胞内Ca^(2+)浓度和离子转运相关基因的影响。构建IP3R1基因shRNA干扰载体,利用Fluo-3/AM钙离子荧光标记法检测鸭子宫上皮细胞内Ca^(2+)浓度,CCK-8法检测鸭子宫上皮细胞的增殖情况,利用RT-qPCR法检测10个离子转运相关基因和4个细胞增殖相关基因的表达量。结果显示:IP3R1基因沉默后,细胞内Ca^(2+)浓度极显著升高,10个离子转运相关基因的表达发生变化,细胞也呈现增殖状态,进而影响了细胞增殖相关基因的表达。本研究结果揭示鸭子宫上皮细胞内IP3R1基因表达下调会影响细胞内Ca^(2+)稳态,改变钙转运相关基因mRNA的表达水平,并促进细胞增殖。

乌蒙凤鸡体重和胫长生长曲线拟合及相关性研究

为了解乌蒙凤鸡的生长发育规律,本研究以Logistic和Gompertz 2种非线性生长模型对乌蒙凤鸡体重及胫长进行拟合分析。结果表明:Gompertz模型在估计乌蒙凤鸡母鸡体重生长规律上效果更优,该模型拐点周龄为3.49周,拐点体重为753.84 g;Logistic模型在拟合乌蒙凤鸡胫长方面效果更优,拐点周龄为2.32周,拐点胫长为4.26 cm。这说明即使对同一品种的不同性状,其适用的最优模型也存在差别。

调控牛CEBPA基因表达的miRNA筛选及对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响

旨在筛选并验证调控牛增强子结合蛋白A(CCAAT/enhancer binding protein alpha,CEBPA)表达的miRNA及其对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响。本研究综合运用多个在线软件筛选与CEBPA基因具有潜在调控关系的miRNA,运用qRT-PCR技术检测CEBPA基因在关岭牛各类组织中的表达水平;构建CEBPA-3′UTR-WT和CEBPA-3′UTR-MUT双荧光素酶报告载体,通过双荧光素酶报告系统验证候选miRNA与CEBPA基因的结合关系;分离培养关岭牛肌内前体脂肪细胞,利用qRT-PCR、Western blot、油红O染色和CCK-8探究调控CEBPA的miRNA对牛肌内前体脂肪细胞分化与增殖的影响。生物信息学分析发现,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a、bta-miR-181b、bta-miR-181c、bta-miR-181d与CEBPA基因具有潜在结合关系;qRT-PCR结果表明,CEBPA基因在关岭牛内脏组织、肌肉组织、脂肪、下丘脑以及部分生殖器官中均有表达,在2岁牛背最长肌的表达量极显著高于1日龄犊牛(P<0.01);双荧光素酶报告系统结果表明,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能直接结合牛CEBPA基因3′UTR;细胞试验结果表明,CEBPA基因在牛肌内前体脂肪细胞分化中的表达水平随时间逐渐升高,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a在分化0 d表达水平极显著高于其他时期(P<0.01),整个分化时期bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a与CEBPA基因表达趋势相反;过表达miR-23a、miR-23b-3p、miR-181a均能极显著降低CEBPA基因mRNA和蛋白表达量(P<0.01),并降低牛肌内前体脂肪细胞中脂滴含量;bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能阶段性促进细胞增殖。结果表明,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能阶段性的促进牛肌内前体脂肪细胞增殖,并通过直接负调控CEBPA的表达来间接影响该细胞分化。

CEBPA基因的生物学效应及其在畜禽生产中的研究进展

增强子结合蛋白α(CEBPA)是CCAAT/增强子结合蛋白家族中的一员,CEBPA基因对脂肪细胞分化、发育和脂肪沉积有重要作用。在人类中,CEBPA基因异常表达可能导致肥胖、糖尿病以及白血病等疾病;在畜牧生产上,CEBPA基因的表达对牛、羊、猪和禽类的生长与脂肪沉积有重要影响。本文对CEBPA基因的分布、结构和功能进行总结,并对近几年CEBPA基因在疾病和畜禽生产方面的研究进展进行综述。

牛SLC13家族基因编码蛋白的生物信息学分析

为研究牛溶质载体13(SLC13)基因编码蛋白的结构和功能,运用生物信息学软件对牛SLC13蛋白的理化性质、疏水性、二级结构及三级结构、序列保守基序、亚细胞定位、跨膜区进行分析,预测其蛋白质互作网络并构建不同物种SLC13基因家族编码蛋白的系统发育树.结果表明,牛SLC13蛋白的氨基酸数介于520~626个,亮氨酸含量最高,组氨酸含量最低,分子质量介于57.80~68.96 ku,其编码蛋白均为疏水性蛋白,除SLC13A2蛋白外的4个编码蛋白均为稳定蛋白.牛SLC13蛋白的二级结构主要由α-螺旋、β-转角以及无规卷曲组成,外显子数目介于11~16,除SLC13A3基因编码蛋白无Motif 10、SLC13A5基因编码蛋白无Motif 8外,其他编码蛋白序列均存在Motif 1—10,SLC13蛋白亚细胞定位于质膜、内质网和线粒体,SLC13A3蛋白在高尔基体中有少量分布.牛SLC13蛋白均为多次跨膜螺旋的内在膜蛋白,其以不同形式在生物学层面和分子功能层面发挥功能.系统进化分析发现,14个物种的SLC13A1、SLC13A4蛋白处于同一个较大分支,SLC13A2、SLC13A3和SLC13A5处于另一个较大分支,普通牛均与瘤牛、水牛、牦牛亲缘关系最近.

乌蒙凤鸡肉用专门化品系选育初探

本研究旨在对不同类型乌蒙凤鸡的生长性能进行测定分析,为乌蒙凤鸡肉用专门化品系的选育奠定基础。实验测定了乌蒙凤鸡不同羽色(黄羽、麻羽)、肤色(乌骨、普通)及不同羽色与肤色的组合(黄羽普通、黄羽乌骨、麻羽普通、麻羽乌骨)4个类型鸡群4~24周龄的生长性能。结果表明:按羽色或肤色的单一性状进行划分,乌蒙凤鸡黄羽和麻羽、普通和乌骨之间生长性能差异不显著;黄羽公鸡4~16周龄生长性能显著高于麻羽公鸡;不同羽色和肤色的公鸡生长性能均高于母鸡(P<0.01);黄羽普通鸡群体生长性能高于其他类型鸡群。根据分析测定结果,建议将黄羽普通鸡作为乌蒙凤鸡肉用专门化品系选育的候选类型。

猪脂肪沉积相关酶基因表达与胴体及肉质性状的相关性研究

为系统筛选对贵州地方猪脂肪沉积具有影响的相关酶基因,本实验以雄性野猪和雌性柯乐猪的F_(1)代杂交猪作为研究对象,采用qRT-PCR方法检测猪背最长肌和皮下脂肪组织PPARγ、LPL、ACC、ATGL基因的mRNA表达水平,并通过Pearson方法分析背最长肌和皮下脂肪组织4个基因mRNA表达水平与胴体及肉质性状间的相关性。结果表明:在背最长肌和皮下脂肪组织中相对表达量最高的为ACC和PPARγ基因。关联分析得出,背最长肌组织中LPL与PPARγ、ACC基因表达量呈显著正相关,皮下脂肪组织中PPARγ与ACC基因间呈显著正相关;在野柯F_(1)代猪背最长肌组织中PPARγ、LPL基因表达量均与肌肉水分呈显著负相关;在皮下脂肪组织中LPL基因表达量与皮厚间呈显著负相关。本研究结果可进一步印证脂肪沉积相关酶基因LPL在柯乐猪×野猪F_(1)代脂肪沉积过程中发挥着重要作用。

乌蒙凤鸡生长激素基因多态性及生物信息分析

试验旨在对乌蒙凤鸡生长激素(growth hormone,GH)基因多态性进行研究,并开展生物信息学分析。以乌蒙凤鸡为研究对象,构建DNA池,PCR扩增GH基因所有外显子和部分内含子,采用直接测序法检测GH基因多态性,利用生物信息学软件对GH蛋白二级结构、三级结构及基本性质(理化性质、疏水性、信号肽、跨膜区、卷曲螺旋区及保守结构域)进行分析。结果显示,乌蒙凤鸡GH基因存在8个SNPs,分别是T1453C、A1489G、A1512G、G2152A、G3206A、G3347A、C3452A和C3453G,其中G2152A、C3452A和C3453G只发生在无凤头乌蒙凤鸡中;C3452A、C3453G位于非编码区,T1453C、A1489G、A1512G、G2152A和G3206A位于内含子上,G3347A位于外显子5。突变后GH基因mRNA结构发生变化,自由能提高,稳定性降低。生物信息学分析表明,GH蛋白为分泌蛋白,含有信号肽序列,有1个典型的卷曲螺旋结构和疏水区,保守结构域在10～214位氨基酸之间,为非跨膜蛋白,且不稳定。结果表明,乌蒙凤鸡GH基因具有较高的遗传多样性,可为乌蒙凤鸡的保种选育提供参考。

PET/CT代谢参数不同测量方式及计算方法对食管癌患者总生存期的预测价值

目的探究18F-FDG PET/CT代谢参数不同测量方式及计算方法在食管癌(EC)患者总生存期(OS)预测中的应用价值。方法回顾性分析接受PET/CT检查的34例Ⅰ~Ⅳ期EC患者的相关资料,采用Mann-Whitney U非参数检验比较各组代谢参数的差异。通过勾画的感兴趣区域系统计算出不同阈值的最大标准摄取值(SUVmax)、肿瘤代谢体积(MTV)、病变总糖酵解(TLG)、全身肿瘤代谢体积(MTVwb)、全身总病灶糖酵解(TLGwb),按最佳截断值分成高、低值两组后绘制Kaplan-Meier生存曲线,用log-rank法检验曲线差异。分析治疗前原发灶SUVmax、MTV30、MTV40、MTV50、TLG30、TLG40、TLG50、MTVwb、TLGwb及病灶厚度、年龄、体重指数(BMI)、TNM分期、临床分期、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、碱性磷酸酶(ALP)对患者OS的预测价值。结果至随访末期,共死亡17例(50.0%),中位生存期为16.5个月,半年生存率为81.97%,1年生存率为66.5%。以中位生存时间16.5个月为界限进行分组,中位生存时间≤16.5个月和中位生存时间>16.5个月患者的SUVmax、MTVwb、TLGwb及MTV、TLG差异均有统计学意义(均P<0.05)。不同MTV30、MTV40、MTV50、TLG40、TLG50、SUVmax、年龄、BMI、病灶厚度、cT分期、cN分期、cM分期、临床分期患者的生存曲线比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);TLG30、TLGwb、NLR、ALP低值组生存率高于TLG30、TLGwb、NLR、ALP高值组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论治疗前TLG30、TLGwb对于EC患者的预后有一定预测价值,可为临床筛选预后不良的患者提供参考依据,从而制订精准化、个体化的治疗方案。

PiggyBac转座子介导关岭牛UCP3基因启动子重组质粒的构建与鉴定

为了构建以PiggyBac(PB)转座子为载体元件,绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,含UCP3基因启动子的PiggyBac转座子二元系统PB-513B-UCP3,并验证其转座活性,试验采用PCR技术扩增获得UCP3基因启动子,分别通过T4DNA连接酶与质粒PB-513B-1和pEGFP-N3连接,构建重组质粒PB-513B-1-UCP3和pEGFP-N3-UCP3-pro;用脂质体法将质粒pEGFP-N3、重组质粒pEGFP-N3-UCP3-pro和PB-513B-1-UCP3以及PiggyBac转座子二元系统分别转染至小鼠成肌细胞C2C12中,检测其在小鼠成肌细胞C2C12中的表达情况。结果表明:PCR扩增得到大小为1080bp的单一目的条带;经酶切和测序鉴定,成功构建重组质粒PB-513B-1-UCP3和pEGFP-N3-UCP3-pro,PiggyBac转座子二元系统的阳性克隆数明显多于重组质粒PB-513B-1-UCP3和pEGFP-N3-UCP3-pro的克隆数。说明试验成功构建了PiggyBac转座子介导的重组质粒PB-513B-1-UCP3及pEGFP-N3-UCP3-pro,且证实PiggyBac转座子介导的牛UCP3基因启动子在小鼠成肌细胞C2C12中具有较高的转座活性。

不同日龄乌蒙凤鸡体尺与屠宰性能相关性与主成分分析

为研究乌蒙凤鸡的生长发育和生产性能,实验选择210、240、270、300日龄乌蒙凤鸡各60只(公母各半)进行体尺与屠宰测定,同时对其体尺与屠宰性能进行相关性与主成分分析。结果表明:不同日龄公鸡的龙骨长、胸宽、胸深和骨盆宽存在极显著差异,不同日龄母鸡的胸宽、胸深和骨盆宽存在极显著差异。心脏重在210日龄与300日龄乌蒙凤鸡母鸡中差异显著,胸肌重在240日龄与270日龄乌蒙凤鸡公鸡中差异极显著。210、240、270、300日龄乌蒙凤鸡公母鸡的体斜长与活体重、屠体重、半净膛重、全净膛重、胸肌重呈极显著正相关。从主成分的特征根和贡献率来看,主成分Ⅰ主要反映乌蒙凤鸡的屠体性能,视为屠体因子,主成分Ⅱ主要反映体躯发育状况,视为体躯因子,以210、240、270、300日龄阶段的乌蒙凤鸡作为肉用鸡,能保证较好的肉用性能,而体斜长、龙骨长可作为重要参考指标。乌蒙凤鸡的体尺和大部分屠宰性状有显著相关关系,由此可见相关性和主成分分析指标对乌蒙凤鸡的选种选育具有重要意义。

函数背景下的不等式证明

在数学中,函数和不等式之间有密切的联系,它们之间在解决问题时相互转化,不等式的问题常常通过函数的思想方法去解决。弄清楚函数和不等式之间的内在联系,并形成知识结构和网络,使人们在解题时能从不同角度去分析解决,从而达到对知识融会贯通、运用自如的目的。

牛UCP3和MYH1基因启动子在C2C12和3T3-L1细胞中的启动活性分析

为阐明牛解偶联蛋白3(uncoupling protein 3,UCP3)和肌球蛋白重链1(myosin heavy chain 1,MYH1)基因启动子的核心区及其在小鼠C2C12和3T3-L1两种细胞株中的启动活性,本研究利用PCR、双荧光素酶和脂质体转染等方法进行关岭牛UCP3和MYH1基因启动子的扩增、重组载体构建和启动子活性分析。结果显示,试验成功构建了pGL3-Basic-UCP3-pro和pGL3-Basic-MYH1-pro重组真核表达载体,分别转染至小鼠C2C12和3T3-L1细胞后发现,UCP3、MYH1基因启动子的核心区分别为UCP3-P6(-385^+3 bp)和MYH1-P5(-255^+15 bp)区域;pGL3-Basic-MYH1-P2~pGL3-Basic-MYH1-P5在C2C12细胞中启动子活性均高于3T3-L1细胞,表明MYH1基因启动子活性在成肌细胞C2C12中较高。本研究阐明了UCP3和MYH1基因启动子的核心区及其启动子活性,为进一步研究UCP3和MYH1基因的转录调控机理提供了科学依据。

贵州地方黄牛GH基因多态性及生物信息学分析

为分析贵州地方黄牛GH基因多态性,筛选出对本地黄牛生长性状有显著影响的SNPs位点,本研究以贵州4个地方牛种(关岭牛、思南牛、威宁牛、黎平牛)为研究对象,采用直接测序法检测贵州地方黄牛GH基因多态性,利用生物信息学软件对贵州黄牛GH基因进行分析。结果显示:4个地方牛种中共发现2个SNPs,分别为Exon5-G1570C和Exon5-A1720C,Exon5-G1570C为错义突变,Exon5-A1720C为同义突变;其中黎平牛仅存在1个SNPs位点(Exon5-A1720C),其余3个品种均有2个SNPs位点;生物信息学分析表明,牛GH蛋白相对分子质量为27 385.45,理论等电点为6.90,疏水值最大为3.133,亲水值最小为-2.767,属于跨膜蛋白,稳定性较高;突变前后GH基因mRNA二级结构发生改变,Exon5-G1570C位点mRNA自由能升高,稳定性降低;Exon5-A1720C位点mRNA自由能降低,稳定性升高。本实验成功筛选出贵州地方黄牛GH基因的多态位点,可为筛选贵州地方黄牛与生长相关的分子遗传标记奠定理论基础。

QDPR基因克隆及其在乌蒙凤鸡不同生长阶段组织表达研究

旨在克隆乌蒙凤鸡醌型二氢生物喋呤还原酶(quinoid dihydropteridine reductase,QDPR)基因,并检测其在不同性别乌蒙凤鸡不同生长阶段各组织中的表达差异,以研究QDPR基因在乌蒙凤鸡生长发育过程中的调控作用。本试验对乌蒙凤鸡QDPR基因CDS区进行PCR扩增和克隆,并对得到的序列进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR检测QDPR基因在4、12、20和28周龄乌蒙凤鸡公鸡及母鸡的心、肝、脾、肺、肾、胸肌和腿肌组织中的相对表达量。结果表明,QDPR基因开放阅读框长度为417 bp,共编码139个氨基酸,编码蛋白为酸性不稳定蛋白,乌蒙凤鸡的QDPR基因序列与原鸡、日本鹌鹑和珠鸡的QDPR基因同源性较高;QDPR基因在不同性别乌蒙凤鸡不同生长阶段各组织中均有表达,其中,公鸡4、12和20周龄肺组织中QDPR基因表达量最高,极显著高于同一周龄其他组织(P<0.01),母鸡4周龄肝、脾、肺中QDPR基因相对表达量为所有时期最高,极显著高于12、20周龄(P<0.01),公鸡大多数组织中QDPR基因表达量随时间增长总体呈现出先升后降的趋势,母鸡为先降后升。结果显示,QDPR基因在乌蒙凤鸡内脏组织中的表达均高于肌肉组织,且公母鸡不同时期表达情况有所差异,试验结果可为进一步研究QDPR基因在鸡生长发育中的调控作用提供参考。

18F-FDG PET/CT预测Ⅰ~Ⅲ期非小细胞肺癌淋巴结转移的价值

目的 探讨18F-FDG PET/CT相关代谢参数预测Ⅰ~Ⅲ期非小细胞肺癌淋巴结转移的价值。方法 回顾性分析2017年12月至2020年6月于广西医科大学附属肿瘤医院接受18F-FDG PET/CT检查和经病理检查确诊的92例Ⅰ~Ⅲ期非小细胞肺癌患者的临床资料,根据有无淋巴结转移分为淋巴结转移组(n=57)和非淋巴结转移组(n=35),分析18F-FDG PET/CT代谢参数最大标准摄取值(SUVmax)、肿瘤代谢体积(MTV)和病灶糖酵解总量(TLG)与临床特征的关系,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析各个代谢参数预测Ⅰ~Ⅲ期非小细胞肺癌淋巴结转移的价值。结果 淋巴结转移组的MTV、TLG中位数均高于非淋巴结转移组,差异有统计学意义(P <0.05)。淋巴结转移组和非淋巴结转移组的SUVmax比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。各N分期间SUVmax比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。ROC曲线分析显示,MTV和TLG的最佳截断值分别为7.65 cm3、28.44 g。MTV与TLG联合模型的曲线下面积(AUC)为0.75(95%CI:0.65~0.85),高于MTV(AUC:0.73,95%CI:0.63~0.83)、TLG(AUC:0.73,95%CI:0.63~0.83)单一诊断的AUC。MTV与TLG联合的灵敏度高于MTV、TLG(68.40%vs. 57.90%、63.20%),MTV的特异度在三者中最高(85.70%vs. 77.10%、77.10%)(P <0.05)。综合评估,MTV联合TLG诊断模型优于其他诊断模型。结论18F-FDG PET/CT代谢参数MTV、TLG对Ⅰ~Ⅲ期非小细胞肺癌淋巴结转移具有一定的预测价值,MTV和TLG联合有更高的预测价值。

不同羽色及性别乌蒙凤鸡育成期生长曲线拟合研究

为探究不同羽色及性别乌蒙凤鸡育成期的生长发育规律,本研究用Logistic、Gompertz和von Bertalanffy 3种生长曲线模型拟合分析不同羽色及性别乌蒙凤鸡育成期体重和胫长发育特征。结果表明:Logistic模型对不同羽色和不同性别乌蒙凤鸡体重和胫长生长规律的拟合效果最优,且公鸡拟合效果比母鸡好。在Logistic模型中,黄羽公鸡体重拐点周龄为10.839周,拐点体重为823.531 g,胫长拐点周龄为6.82周,拐点胫长为5.62 cm;麻羽公鸡体重拐点周龄为10.695周,拐点体重为802.678 g,胫长拐点周龄为6.31周,拐点胫长为5.61 cm;黄羽母鸡体重拐点周龄为10.134周,拐点体重为590.079 g,胫长拐点周龄为4.73周,拐点胫长为4.05 cm;麻羽母鸡拐点周龄为9.786周,拐点体重为570.913 g,胫长拐点周龄为4.53周,拐点胫长为4.26 cm。

中国古代文化史复习教学改革探微

中国古代文化源远流长，灿烂辉煌，在世界文明史中占有举足轻重的地位。为了弘扬中华民族的优秀传统文化，在复习教学中，我们不仅要注重对文化史基础知识的复习，而且要培养学生分析问题和解决问题的能力。归纳史实，理清线索，形成知识网络。我国从奴隶社会到封建社会，...