远志总皂苷对神经干细胞向神经元分化的影响

目的:观察远志总皂苷对神经干细胞(NSCs)向神经元分化的影响。方法:分离、培养并鉴定新生大鼠海马区NSCs,分别添加终浓度5μg/mL、20μg/mL及100μg/mL的远志总皂苷进行诱导1 d或3 d。免疫细胞化学法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)阳性细胞。结果:原代与传代培养的细胞均可持续分裂增殖形成悬浮生长的神经球,经远志总皂苷诱导后1 d、3 d,NSE阳性神经元数量较未接受诱导的细胞明显升高(P<0.01)。结论:远志总皂苷对海马NSCs向神经元分化有一定的促进作用。

高压氧治疗脑梗塞早期疗效分析

高压氧治疗脑梗塞早期疗效分析黄昕艳张晓梅曲淑萍吴彦忠牛福忠卓春华由于急性脑缺血致神经系统功能严重障碍，甚至威胁生命，通常恢复较差。自６０年代应用高压氧治疗取得较好疗效以来，逐渐引起人们的关注，以下就我院高压氧加药物治疗脑梗塞３９例及单纯药物治疗６０例...

Aβ_(25-35)寡聚体对大鼠海马神经细胞的活性影响及形态学观察

目的研究以β淀粉样蛋白(Aβ25-35)损伤原代培养海马神经元建立Alzheimer病(AD)细胞模型的方法。方法运用细胞原代培养的方法培养大鼠海马神经元并进行鉴定,以不同浓度Aβ25-35寡聚体建立海马神经元损伤模型,将培养的细胞分为Aβ25-35寡聚体致伤高、中、低剂量组,同时设立正常对照组,倒置显微镜观察细胞形态学变化及通过四唑盐(MTT)比色实验检测细胞存活率。结果当Aβ25-35寡聚体终浓度为5.0μmol/L、10.0μmol/L、20.0μmol/L时,作用于细胞24h,可使神经细胞的形态发生改变和活力显著下降,在显微镜下可见神经元形态有明显的变化,失去贴壁能力或易脱落、突起变短、细胞存活率明显下降,与对照组相比较差异有显著性(P<0.01)。结论 Aβ25-35寡聚体可导致原代培养海马神经元变性、死亡,且有剂量依赖关系,可用于构建AD的细胞模型;并筛选出5.0μmol/L Aβ25-35寡聚体为AD模型的适宜致伤浓度。

纳洛酮对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的脑保护作用

目的:探讨纳洛酮对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:24只Wister大鼠随机分为3组,采用腔内线栓法制备动物模型,检测纳洛酮治疗组及对照组髓过氧化物酶(MPO)含量。结果:大鼠脑缺血再灌注后脑组织MPO含量明显增加(P<0.05),应用纳洛酮后缺血侧脑组织MPO含量显著下降(P<0.05)。结论:纳洛酮可以减轻脑缺血再灌注损伤,纳洛酮具有神经保护作用。

尿激酶治疗短时间反复发作TIA临床分析

目的:探讨短时间频繁发作的TIA患者治疗方式。方法:选取我科2005/2007年TIA患者各20例,治疗组在治疗基础上加尿激酶治疗与对照组比较。结果:两组疗效比较差异有显著性(P<0.01)。结论:常规治疗加一定量尿激酶能有效控制TIA的频繁发作,对防止脑梗死的发生有良好疗效。

脑循环功能治疗仪对急性脑梗死患者神经功能恢复的影响

目的:观察脑循环功能治疗仪对急性脑梗死患者神经功能恢复的影响。方法:在常规用药基础上应用脑循环功能治疗仪对19例急性脑梗死患者进行治疗,于治疗第6天进行欧洲卒中量表评分并与对照组进行比较。结果:治疗组神经功能缺损明显改善,评分增高,与对照组比较差异具有显著的统计学意义。结论:脑梗死急性期短期应用脑循环功能治疗仪可显著改善急性脑梗死患者神经功能缺损症状,促进神经功能恢复。

Chk1/chk2在Aβ致伤海马神经元中的表达及意义

目的:探讨Chk1/chk2在Aβ致伤海马神经元中的表达及意义。方法:应用新生(3d以内)SD大鼠采用急性分离、胰酶消化的方法培养海马神经细胞,分别于Aβ25-35致伤0h、8h、16h、24h,并采用免疫细胞染色观察各时间点Chk1/chk2表达情况。结果:体外培养的神经细胞生长状态良好,免疫细胞染色鉴定结果表明Chk1、chk2蛋白在Aβ致伤神经元后,随致伤时间延长均有表达,且以chk1表达显著,在致伤16h有差异明显(P<0.05)。结论:Chk1/chk2共同参与了在Aβ致伤海马神经元中的DNA损伤修复,以chk1表达更显著,提示可望为AD中神经元的DNA损伤修复提供新的干预点。

新生大鼠原代皮质神经元细胞差数贴壁培养法的优化

神经元的培养是神经细胞生物学、神经药理、毒理学及神经电生理研究的重要手段,但要获得纯度较高,生长状态较好的神经元并非易事。神经元属于终末分化细胞,给培养带来一定难度,传统的方法多用胎鼠进行神经元的原代培养,因其细胞分化程度低利于存活,但胎鼠取材需处死孕鼠,费用较高且操作繁琐，本实验利用细胞的贴壁时间不同，筛选了一种简便、经济、可行的大鼠原代神经元差数贴壁培养方法。1材料与方法1．

低分子肝素在静脉溶栓治疗中的临床研究

目的:评价低分子肝素在脑梗死急性治疗中的作用。方法:将符合标准的80例患者随机分为治疗组(40例),对照组(40例),治疗组溶栓后再给以低分子肝素抗凝治疗,对照组给予常规溶栓治疗,于治疗前、治疗第3天、第7天、第15天时神经功能缺损评分比较,在第15天时两组疗效比较。结果:两组比较差异无统计学意义。结论:静脉溶栓后使用低分子肝素与对照组在痊愈率、显效率、有效率、病死率上无显著差异,在急性脑梗死的溶栓治疗中,低分子肝素的应用价值有待进一步研究。

Trizol法提取新生小鼠脑组织总RNA优化比较

目的对Trizol法中不同组织研磨方法进行比较,优化新生鼠脑总RNA提取方法。方法取新生24h小鼠脑组织,分别采用常规玻璃组织研磨器(常规研磨法)、剪刀剪碎法、液氮研钵研磨(液氮研磨法)3种方法对组织匀浆进行分离,采用Trizol试剂提取总RNA,紫外分光法测定浓度和纯度,凝胶电泳验证完整性。结果 3种方法均可以提取出总RNA,但相对剪碎法和常规研磨法,液氮研磨法提取的总RNA浓度、纯度及完整性更佳(P<0.05)。结论液氮研磨法虽然对实验条件有一定要求,但仍然是目前最为可靠的脑组织总RNA提取方法,可以完全满足后续实验需要。

神经生长因子诱导神经干细胞向胆碱能神经元分化过程中相关基因表达的研究

目的 通过检测神经生长因子（NGF）定向诱导神经干细胞（NSC）分化为胆碱能神经元过程中Neurod、Hes1基因的表达变化,探讨NSC的定向诱导分化机制.方法 Wistar大鼠海马形成原代克隆球后传代第3代检测.应用不同浓度（5,10,50,100 μg/L）的NGF对NSC进行诱导分化.免疫荧光检测胆碱乙酰转移酶（ChAT）的表达.实时定量聚合酶链反应（PCR）分析NSC诱导分化1周时Neurod、Hes1基因的表达变化.结果 培养获稳定状态的NSC,并具有多向分化能力.NSC经不同浓度的NGF诱导1周后,免疫荧光检测ChAT阳性率最高25％,50 μg/L NGF具最显著的诱导作用.实时定量PCR技术检测50 μg/L组NeuroD mRNA的达量最高[（1.010±0.024）]；高于其他各低浓度组[5μg/L（0.130 ±0.013）,10 μg/L（0.510±0.016）],差异有统计学意义（P＜0.01）；Hes1 mRNA的表达量在50 μg/L组最低[（0.080±0.010）],低于各低浓度组[5 μg/L（0.220 ±0.014）,10μg/L（0.130±0.012）],差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 ①在体外环境下 NGF具有较强的诱导NSC向胆碱能神经元分化的作用.②Neurod和Hes1基因的表达变化与NGF诱导NSC向胆碱能神经元的分化过程密切相关,改变bHLH正负调控基因的表达的平衡点可能对NSC分化为胆碱能神经元有重要调控作用.

神经生长因子对阿尔茨海默病治疗的研究进展

神经生长因子（nervegrowthfactor，NGF）是一类影响神经元生存和发育、诱导神经元分化的生物活性物质。从现有流行病学资料来看，阿尔茨海默病（AlzheimerDisease，AD）可能是一组异质性疾病，在多种因素的作用下发病。从目前研究来看，AD的可能致病因素和假说多达30余种，如家族史、女性、头部外伤、低教育水平、甲状腺病、母育龄过高或过低、病毒感染等。AD临床表现为记忆衰退，认知障碍，智能低下，语言模糊、

蒙特利尔认知量表和MMSE量表在阿尔茨海默病筛查中的比较与应用

阿尔茨海默病（Alzheimer’sdisease，AD）又称老年性痴呆，是一种神经系统退行性疾病，尚无特异的早期诊断标志。神经心理学量表主要应用在老年痴呆筛查工作中，是高级神经功能受损诊断、评估和康复的重要依据。蒙特利尔认知评估（MontrealCognitiveAssessment，MoCA）是根据临床经验并参考简明智能量表（minimentalstateexamination，MMSE）制定，

比较四种消化方法对神经干细胞传代增殖及活性的影响

目的:观察4种消化方法对体外培养的神经干细胞(N SC s)增殖及活性的影响。方法:原代培养新生大鼠海马N SC s,采用机械消化、0.25%单纯胰酶、0.25%胰酶+0.02%EDTA和0.02%EDTA 4种不同消化方法对N SC s球进行传代培养,经四唑盐比色法(M TT法)法检测不同方法对N SC s活性及增殖能力的变化。结果:与机械消化相比,0.25%单纯胰酶组,0.25%胰酶+EDTA组消化后的大鼠海马N SC s球长时间不聚集,细胞增殖停顿,而单纯EDTA组则明显提高了N SC s的增殖及活性,其余各组差异无统计学意义。结论:随培养时间延长,单纯0.02%EDTA组能够显著提高体外培养的大鼠海马N SC s的增殖水平及活力,且对细胞的后续损伤相对较小。

电刺激小脑顶核对脑血管病患者脑循环动力学、体感诱发电位的影响

目的：研究电刺激小脑顶核(FN)后脑循环动力学参数及体感诱发电位的变化。方法：选择急性期脑梗塞患者40名，应用脑循环治疗仪(CVFT-010M)电刺激小脑顶核，于治疗前后进行脑血管功能(CVA)平均血流量(Qmean)、最小血流量(Qmin)、平均血流速度(Vmean)、最小血流速度(Vmin)、脑循环阻力(R)等参数及体感诱发电位中枢传导时间(CCT)检测。结果：治疗后患侧脑循环动力学参数Qmean、Qmin、Vmin明显增加(P<0.05)，Vmean显著增加、R显著减小(P<0.01)，治疗后患侧CCT明显缩短，与治疗前存在显著差异(P<0.01)。结论：电刺激小脑顶核是治疗脑血管疾病的有效方法。

血浆同型半胱氨酸水平与脑梗死并发2型糖尿病的相关研究

目的:探讨血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平与动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞合并2型糖尿病的关系。方法:选择动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞合并2型糖尿病患者60例(A组)为患者组,动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞无2型糖尿病病史患者60例(B组),2型糖尿病无动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞60例(C组),健康人组60例(D组)B组、C组、D组均为对照组,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平,用全自动生化分析仪检测总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、甘油三酯(TG),并进行统计分析。结果:A组Hcy高于B组、C组、D组,有显著性差异(P<0.05),B组Hcy值高于C组、D组,有显著性差异(P<0.05),C组高于D组(P<0.05),有显著性差异。结论:Hcy在动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞合并2型糖尿病过程中起着协同作用,是动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞合并2型糖尿病的重要危险因素。血浆Hcy的升高可能与动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞合并2型糖尿病有相关性。

NGF对神经干细胞内Mash1表达的影响

目的:以Mash1为切入点,深入研究NGF反应性NSCs向胆碱能神经元分化过程中的机制。方法:取体外培养传至第三代的神经干细胞,在含不同浓度NGF的神经干细胞分化培养基中进行分化诱导,采用RT-PCR法测定诱导后Mash1的mRNA相对表达水平。结果:各实验组均有Mash1的表达,其中空白对照组表达最少,以NGF100mg/L组表达量最高。结论:NGF能够促进NSCs内Mash1的表达。