基于XML的Web信息数据库的建立

为了有效地从Web页面上提取数据信息,本文建立一种基于XML的Web信息收集数据库。利用开源工具JTidy将Web页面加以整理,利用XML良好的结构特性,使用Dom4j工具包解析XML文件;按照XML中的标签层次特点作为对数据进行储存的依据;最后使用Hibernate将数据持久化地储存于数据库中,方便数据的储存与查询。

白蚁纤维素酶结构域重组研究

对来源于白蚁Nasutitermes takasagoensis的纤维素酶NtEG和来源于Thermomonospora fusca的耐热性纤维素酶E4进行同源建模和序列比较,利用重组PCR技术将E4的结合域与NtEG的催化域进行结构域重组,形成重组纤维素酶。并将得到的重组体置于毕氏酵母X33中表达并检测其催化效率。结果表明:重组纤维素酶的相对分子质量约为59 ku;用羧甲基纤维素法、滤纸法、微晶纤维素测得重组纤维素酶的活性分别为17.1、5.4、4.6 U/mL;重组纤维素酶可在毕赤酵母中成功表达。

改良LAMP法检测转基因作物

目的建立简易的可视化环介导等温扩增(LAMP)检测转基因作物的方法。方法通过一对特异的能识别一段正义链和一段反义链的内引物和一对链置换引物,在Bst DNA聚合酶作用下,以等温条件实现对外源转基因成分的扩增,反应液和高浓度的显色液SYBR GREENⅠ同时置于特殊设计的反应管中,反应后可实现闭管可视化检测。结果对转基因作物中常见的外源基因元件胭脂碱合成酶终止子(T-NOS)和烟草花叶病毒35S启动子(P-CaMV35S)进行了LAMP检测。T-NOS LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,P-CaMV35S LAMP对大米品系BT63,玉米品系BT11,MON810,MON863,大豆品系GTS40-3-2的检测结果呈阳性,二者对非转基因大米,玉米,大豆的检测结果均呈阴性。上述结果表明,本文中建立的T-NOS和P-CaMV35S LAMP检测方法特异性高。另外,通过对大豆品系GTS40-3-2模拟样品的检测,证明T-NOS LAMP能检出转基因成分含量为0.5%的样品,P-CaMV35S LAMP能检出转基因成分含量为0.1%的样品,检测灵敏度较高。结论改良LAMP法灵敏度高,特异性好,能用于快速初筛转基因作物。

RNA干扰对MDA-MB-231细胞中CaSR基因表达的影响

目的:运用RNA干扰技术,观察siRNA表达载体在乳腺癌细胞MDA-MB-231中对CaSR基因表达的影响。方法:构建靶向CaSR基因的RNA干扰表达载体,用脂质体转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231,运用Real-Time荧光定量PCR,Westernblot技术分别从mRNA以及蛋白表达水平检测CaSR基因表达的变化。结果:所构建的质粒载体成功的在MDA-MB-231细胞中抑制了CaSR mRNA及其蛋白的表达。与对照组相比,psiRNA-CaSR载体对CaSR mRNA的抑制率达到65%,对CaSR蛋白抑制率约为70%。结论:实验证明所设计的shRNA片段可以有效地抑制CaSR基因的表达,为下一步研究工作奠定了基础。