推进非遗传承艺术教育 弘扬中华优秀传统文化——以云南技师学院为例

云南技师学院通过开设非遗专业,开展非遗技能培训、非遗进校园艺术教育,传承非遗技艺,塑造良好育人环境,打造文化传承阵地。通过建立非遗特色课程体系和活动育人体系,运用多元化的教学模式和开展社会服务,不仅传承了非遗技艺,提高了学生的技能水平和人文素养,也激发了学生对中华优秀传统文化的热爱与创新精神,为当地乡村振兴和文化传承注入了新的活力。

防御假单胞菌H78中crp基因对抗生素合成的调控作用

crp基因(编码cAMP受体蛋白)作为全局调控因子广泛存在于各种细菌中,在不同菌株中表现不同的调控功能。防御假单胞菌(Pseudomonas protegens)H78能产生硝吡咯菌素(Prn)、2,4-二乙酰基间苯三酚(2,4-DAPG)和藤黄绿菌素(Plt)等多种广谱抗生素。为探究P.protegens H78中crp基因对抗生素Prn、2,4-DAPG和Plt合成的调控作用,利用基因无痕敲除、HPLC分析、lacZ报告基因分析等技术,分析crp基因对抗生素Prn、2,4-DAPG和Plt合成及基因表达的影响。结果表明:H78菌株中crp基因的敲除导致Prn合成操纵子prnABCD表达显著下降;Plt合成及操纵子表达显著上升;2,4-DAPG合成及操纵子表达小幅下降。因此,P.protegens H78中crp基因对抗生素Prn合成存在显著的正调控作用,而对Plt合成存在明显的负调控作用,对2,4-DAPG合成存在一定的正调控作用。

发酵优化绿针假单胞菌GP72-ND3ΔphzO高产吩嗪-1-羧酸

对绿针假单胞菌GP72-ND3ΔphzO的发酵条件进行优化并在5 L反应器中进行放大培养。在摇瓶水平通过单因素实验、正交实验、最陡爬坡实验和中心组合设计实验,优化得到最佳培养基组成为甘油49.55 g/L、大豆蛋白胨37.34 g/L、KCl 1.5 g/L、MgSO_(4)0.75 g/L、K 2 HPO_(4)0.225 g/L,发酵60 h后吩嗪-1-羧酸(phenazine-1-carboxylic acid,PCA)的最大产量为(6.01±0.17)g/L,是优化前的2.6倍。在1 L反应器中优化发酵pH,当培养过程pH值维持在6.8时,PCA的产量最高,为(7.16±0.04)g/L,是优化前的1.2倍。在最优培养基和pH条件下,对菌株在5 L反应器中进行放大培养,发酵60 h后PCA的最大产量为(6.84±0.53)g/L。研究为提高PCA的生物合成速率和工业化应用提供支持。

不同喂养条件和营养强化对大型溞总脂及脂肪酸组成的影响

大型的总脂和脂肪酸组成随食物的变化及营养强化的实施而发生显著变化。酵母组总脂为 2 .5 % ,明显高于海水小球藻组 (1.6 5 % )和有机肥组 (1.5 % )。经鱼油强化或海水小球藻二次培养后脂类含量明显升高。三组中酵母组的MUFA含量最高为 5 5 %。主要是C16∶1ω7(2 2 % )与C18∶1ω9(2 3 % ) ,而PUFA最低 (16 .6 % ) ,其中EPA(2 .7% )、DHA(0 .8% )等ω3HUFA含量均很低 ;与酵母组相比 ,海水小球藻组和有机肥组的MUFA含量显著下降 ,PUFA含量显著升高 ,均为 30 %～ 33 %左右 ,三组中海水小球藻组EPA含量最高 (14% ) ,其次是有机肥组 (5 .9% )和酵母组 (2 .7% ) ;有机肥组DHA含量最高 ,达 11.7% ,而酵母组和海水小球藻组DHA含量均很低 ,仅为 0 .7%～ 0 .8%。经鱼油强化后 ,酵母组的MUFA含量显著下降 ,PUFA显著升高 ,EPA由 2 .7%提高到 10 %左右 ,DHA由 0 .8%升至 7% ;酵母组经海水小球藻二次培养后MUFA显著降低 ,PUFA相应升高 ,EPA由 2 .7%提高到 9.7% ,而DHA含量无变化。

温度、盐度对大型溞生长和生殖的影响

大型一般５个幼龄和１２～１７个成龄，幼龄龄期各１ｄ左右，各成龄平均龄期在水温１５℃、１８℃、２１℃、２５℃下分别为３．５ｄ、２．６ｄ、２．５ｄ、２．１ｄ，龄期随温度降低和龄数增加而呈延长趋势。随温度升高大型生长加快，生长率在Ⅳ－Ⅴ龄达到高峰，随后Ⅴ－Ⅵ龄的生长率显著下降了约６０％～７０％。低温下生长率变化较高温相对平缓，后期低温下大型的生长与体长超过了高温。随温度升高，大型性成熟、产卵提前，生殖率加快，但生殖量显著下降。２１℃是大型繁殖的最适温度，其总生殖量最高，达５９１．９个，未经低盐度驯化的大型其２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ的半致死盐度（ＬＳ_(５０)）分别为９．６５、９．４５、８．９８，生殖上限盐度为９．３左右。经低盐度短期驯化至８．５ｄ，其ＬＳ_(５０)分别提高到１２．５４、１２．０５、１１．３，生殖上限盐度下的存活时间也得到了大幅度的延长。

假单胞菌M18株pltZ基因转录阻抑藤黄绿菌素ABC转运系统

假单胞菌(Pseudomonassp .)M18株的藤黄绿菌素(Pyoluteorin ,Plt )生物合成基因簇下游存在一个Plt生物合成负调控基因pltZ和一个负责Plt分泌及自身抗性的ABC(ATP_bindingcassette)转运系统基因簇。利用启动子探针载体pME6 0 15和pME6 5 2 2分别构建ABC转运基因pltH与lacZ的翻译和转录融合表达质粒pHZLF和pHZCF ,分别引入野生型假单胞菌M18株和pltZ突变菌株M18Z。半乳糖苷酶活性的测定结果表明:在pltZ突变株M18Z中,pltH’-‘lacZ翻译融合表达水平约比野生型提高3 7～8 4倍,pltH’‘lacZ转录融合表达水平显著提高了2 8～7 4倍,表明pltZ能在转录水平上阻抑PltABC转运系统的表达,pltZ很可能通过阻抑PltABC转运系统的表达。

TTT模式在战现场急救教学中的应用效果评价

目的 探讨基于培训者培训(training the trainer to train, TTT)模式的学员教官制在战现场急救教学中的应用效果。方法 从某军医院校“红十字战救突击队”已接受教员培训的老队员中遴选学员教官(对照组),学员教官对新队员(试验组)进行战救培训及考核。研究者自行设计问卷对试验组进行教学效果评价,通过历史对照比较两组战救技术考核结果。结果 96.61%的学员愿意接受学员教官培养模式,77.97%的学员愿意成为学员教官,学员对授课质量的评价得分最高的条目是操作要点讲解(4.64±0.73),对每个授课模块的评价得分最高的项目是包扎(4.78±0.52),学员掌握情况自评得分最高的项目为包扎(4.27±0.84),学员最希望获取的教学能力为随机应变能力(4.81±0.47)。试验组止血与通气技能通过率分别为81.36%、 76.27%,表明大多数学员已基本掌握这两项技能。两组止血和通气考核通过率比较差异无统计学意义。质性评价中,学员表示学员教官上课生动有趣;学员们希望成为学员教官,沿用该模式;希望完善教学模式、增加培训时间。结论 TTT模式在战现场急救教学中具有良好的效果,受训学员对TTT模式接受度和参与度均较高,该模式在军医院校和基层部队均具有一定的推广价值。

不同脂肪源对褶皱臂尾轮虫脂类和脂肪酸组成的影响(英文)

以褶皱臂尾轮虫 (Brachionusplicatilis )为实验动物并设计不同脂肪源饵料 ,分别为 :面包酵母Saccharomycescerevisice(对照组 ) ,微绿球藻Nannochlorpsisoculata (A) ,5 %大豆磷脂 + 5 %鱼油 + 90 %面包酵母 (B) ,10 %鱼油 + 90 %面包酵母 (C)。结果表明 :(1)接受不同脂肪源的轮虫的脂肪酸组成显著不同 ,尤其是高度不饱和脂肪酸 (HUFA ,2 0C)含量存在显著差异 ,说明饵料中HUFA含量对轮虫体内相应脂肪酸的含量有显著影响。投喂饵料C的轮虫具有高含量的n - 3HUFA(2 6 .7% ) ,而对照组轮虫的n - 3HUFA只有 7.5 6 % ,所以投喂饵料C使轮虫的脂类HUFA水平得到了强化 ,提高了轮虫的营养价值。 (2 )轮虫脂类的HUFA水平不仅由饵料中脂类的相应脂肪酸组成决定 ,而且轮虫脂类HUFA的提高和强化效果与饵料中HUFA的化学形态密切相关。甘油三酯型饵料HUFA的强化轮虫效果高于磷脂型的HUFA。 (3)将富含HUFA的鱼油直接添加在干性饵料如面包酵母中 ,而不是通过对鱼油乳化后直接强化轮虫 ,同样能取得良好的强化效果 ,且操作简便 ,不易污染水质 。

微波辅助提取芦荟多糖的研究

将微波辅助提取技术应用于芦荟中水溶性多糖的提取,寻求最佳提取工艺。采用单因素和正交试验,分别考察了微波辐照时间、微波功率、液料比、提取pH四个因素对芦荟多糖提取率的影响。试验结果表明,最佳提取条件为微波时间120 s,料液比为1∶30(g/mL),微波功率455W,提取液pH11.00,在此时条件下提取率为3.421%。

假单胞菌gacA插入突变对藤黄绿脓菌素和吩嗪-1-羧酸合成代谢的差异性调控

假单胞菌株M18分泌藤黄绿脓菌素 (Pyoluteorin ,Plt )和吩嗪 1 羧酸 (Phenazine 1 carboxylicacid ,PCA)并抑制多种植物病菌的生长。从M18中克隆双基因调控系统gacS gacA的组成基因gacA ,并构建了该基因抗性插入突变株M18G。在KMB培养基中 ,M18G合成Plt的能力受到完全抑制 ,而PCA的积累约比野生型提高 31倍左右。Plt合成基因簇突变株M18T和在M18G基础上构建的PCA合成基因簇突变株M18GA的Plt和PCA合成的动力学变化表明 ,在M18G菌株中 ,Plt合成的抑制并不引起PCA的过量积累 ,PCA的过量积累也不引起Plt合成的抑制。由此推测 。

假单胞菌M18调控因子GacA与RsmA的相关性及对抗生物质合成代谢调控机制的分析

假单胞菌M18是一株可同时合成并分泌吩嗪-1-羧酸(Phenazine-1-carboxylic acid,PCA)和藤黄绿脓菌素(Pyoluteorin,Plt)两种抗生物质的生防菌株。为了进一步研究假单胞菌M18抗生物质合成代谢的调控方式与机制,在分别构建gacAr、smA等单基因突变株基础上,又构建了gacArsmA双基因突变株M18GR以及gacA′-l′acZ和rsmA′-′lacZ等翻译融合表达载体(pMEGA和pMERA)。通过在PPM和KMB两种培养基中发酵培养和两种抗生物质PCA和Plt的HPLC定量测定显示,双突变株M18GR的PCA和Plt的合成量不论在PPM还是在KMB培养基中都介于单突变株M18G和M18R之间。由实验结果分析推测,两种调控因子对抗生物质合成的调控作用不是发生在转录水平,很可能发生在转录后水平。由β-半乳糖苷酶的定量分析表明,在假单胞菌M18中,两种调控因子不存在自诱导机制;虽然GacA未调控RsmA的合成,但RsmA可能部分正向调控GacA的表达。

学科核心素养的培育与达成——以“花的结构”为例

生物教学是发展生物学科核心素养的主渠道。在“花的结构”一课的教学中,教师要基于核心素养,从目标、情境、问题、活动、思维、评价六个维度进行设计和实施,促进学生学科核心素养的生成、发展、进阶。

假单胞菌M-18qscR突变株的构建及其对抗生素合成的调控

在革兰氏阴性菌中,全局性调控因子QscR参与菌群传感调节系统,调节多种毒素因子、次生代谢产物、稳定期基因以及参与生物膜形成的基因的表达,它通过与靶基因DNA启动子的调节元件结合,调节基因转录。假单胞菌株(Pseudomonas sp.)M-18是促进植物生长的根际细菌,能同时分泌藤黄绿菌素(pyoluterion,Plt)和吩嗪-1-羧酸(phenazine-1-carboxylicacid,PCA)。运用同源重组技术,构建了假单胞菌(Pseudomonas sp.)M-18株的qscR突变菌株M-18Q。比较野生株M-18和突变株M-18Q生物合成PCA和Plt的产量,在28℃恒温条件下,在PPM和KMB培养基中M-18Q菌株合成PCA的量分别约为野生型M-18菌株的4～6倍和3～5倍,分别达到480μg/mL和140μg/mL。在PPM培养基中,野生株M-18和突变株M-18Q几乎都没有Plt的合成,而在KMB培养基中,突变菌株和野生型M-18合成Plt的量基本一致。反式互补实验表明,在qscR突变株M-18Q中,PCA生物合成受到抑制而Plt的生物合成却不受影响。phzA基因是吩嗪合成基因簇中第一个基因,phzA‘-’lacZ翻译融合实验表明,qscR基因产物通过抑制PCA合成基因簇的表达,实施负调控作用。结果表明qscR基因是作为一个全局调控基因区别性地调控PCA和Plt的生物合成。

假单胞菌株M18gacA基因对BHL和HHL合成正调控及对PCA合成负调控无相关性

经初步鉴定,假单胞菌株(Pseudomonassp.)M18至少能产生5种N-酰基高丝氨酸内酯类(N-acyl-homoserinelactones,AHLs)信号分子,它们是:N-丁酰高丝氨酸内酯(N-butyryl-L-homoserine lactone,C4-HSL,BHL)、N-己酰高丝氨酸内酯(N-hexanoyl-L-homoserine lactone,C6-HSL,HHL)、N-3-氧-己酰高丝氨酸内酯[N-(3-oxohexanoyl)-L-homoserinelactone,3-Oxo-C6-HSL,OHHL]、N-3-氧-辛酰高丝氨酸内酯[N-(3-oxooctanoyl)-L-homoserine lactone,3-Oxo-C8-HSL,OOHL]和N-3-氧-癸酰高丝氨酸内酯[N-(3-oxodecanoyl)-L-homoserine lactone,3-Oxo-C10-HSL,ODHL)。在gacA突变菌株M18G中,信号分子的积累量明显减少,且只能检测出其中的4种;同时,吩嗪-1-羧酸(Phenazine-1-carboxylic acid,PCA)的合成量比野生株M18提高了2倍左右。在M18菌株中,基因rhlⅠ的编码产物参与BHL和HHL的合成。构建rhlI’-’lacZ翻译融合表达质粒pMEIZ,分别导入野生株M18和突变株M18G,突变株M18G的半乳糖苷酶活性比野生株M18下降约40%,表明GacA对基因rhlI的表达具有正调控作用。但是,在野生株M18和突变株M18G的发酵液中,分别或同时添加过量的外源BHL和HHL,对PCA合成的影响不显著,表明在突变株M18G中,PCA合成量的增加与BHL和HHL合成量的减少没有明显的相关性。

假单胞菌M18调控基因ppbR的克隆及功能研究

假单胞菌(Pseudomonas sp.)M18是促进植物生长的根际细菌,能产生吩嗪-1-羧酸(PCA)和藤黄绿菌素(Plt)两种不同的抗生素。根据生物信息学分析,铜绿假单胞菌PA2572基因编码蛋白可能是一个双元调控系统的应答调节子。本研究从假单胞菌M18基因组中扩增出PA2572同源基因片段ppbR,利用体外定点插入突变和同源重组技术构建了M18的ppbR突变株M18P。研究结果表明,突变株M18P在泳动能力和群集运动能力上有显著的下降。突变株合成PCA的能力比野生型有显著的下降,在发酵液中PCA积累量仅为野生型的50%。在KMB培养基中,突变株Plt的积累量和野生型没有显著的差异。

假单胞菌单基因甲基化位点的检测与自发表型变异分析

重亚硫酸盐测序(BSP)技术是一种广泛应用的DNA甲基化检测技术,其检测分辨率达到单碱基水平,可用于短片段的高精度测序。利用BSP技术对DNA水平上不存在差异的绿针假单胞菌HT66及其荧光表型突变株HT66-FLUO的同一基因片段gacS并行测定,发现HT66-FLUO的gacS中存在2个甲基化位点,甲基化率分别为50%和100%,确定全局性调控基因gacS发生了甲基化修饰,从而影响了gacS的功能,导致HT66-FLUO自发表型变异。研究表明,BSP检测方法可应用于细菌单基因的甲基化位点分析,为细菌甲基化研究提供借鉴。

军队护理人员灾害应急医学救援综合能力指标体系的构建研究

目的建立军队护理人员灾害应急医学救援综合能力评价指标体系。方法采用文献回顾和小组讨论的方法,初步拟定指标体系框架和函询问卷,使用德尔菲专家函询的方法,邀请11名相关领域的专家对拟定的指标体系进行两轮问卷咨询,对专家意见进行综合,修改指标内容并得出指标权重。结果最终构建的指标体系共包含7个一级指标,21个二级指标,56个三级指标。两轮专家函询有效问卷回收率100%,专家的权威系数分别为0.80、0.85,肯德尔系数分别为0.228、0.239。结论该指标体系的构建过程科学合理,内容具有针对性,对军队护理人员应急医学救援综合能力的培养具有指导意义。

不同基质对黑木相思扦插繁殖的影响

本文结合黑木相思的生物学特性,总结黑木相思栽培技术,同时重点分析4种不同基质对黑木相思扦插繁殖的影响。结果表明,泥炭土+珍珠岩+蛭石(1∶1∶1)是适宜黑木相思扦插繁殖选用的基质配方,同时要因地制宜综合考虑扦插繁殖的外界环境条件、成本投入等因素。

化学除草技术在林业育苗中的应用

在当前社会发展中,植树造林已成为我国经济与自然环境和谐发展的重要基础工作之一。而除草是我国林业育苗过程中的一项重要工作,杂草快速生长不仅会消耗土壤中大量的肥力,还会抢占苗木的生存空间,所以对苗木的成活率及生长效率将会产生极为不利的影响。在当前林业育苗工作中,化学除草是极为常用的除草技术之一,即采用化学试剂对林区的杂草进行清除。本文对化学除草技术在林业育苗中的应用展开探讨,以期能为林业工作者提供工作意见。