锰基纳米材料用于胃肠道恶性肿瘤的化学动力治疗

目的探讨携载葡萄糖氧化酶的富含锰介孔硅纳米(MSN@Mn-GOx)的制备、物化表征及其治疗胃肠道恶性肿瘤的效果。方法检测MSN@Mn-GOx的形貌、大小、元素、价态、电位、耗氧能力及类芬顿性能;采用核磁共振成像(MRI)方法分析MSN@Mn-GOx在T1加权下的成像能力,构建荷瘤小鼠肠癌模型(n=3),通过尾静脉注射MSN@Mn-GOx观察注射前后的T1成像能力;体外试验分为Control组(PBS)、含锰介孔硅(MSN@Mn)组(20μg/mL MSN@Mn纳米颗粒)及携载葡萄糖氧化酶的富含锰介孔硅(MSN@Mn-GOx)组(20μg/mL MSN@Mn-GOx纳米颗粒),按上述分组对胃肠癌细胞进行处理。分别采用细胞增殖-毒性实验(CCK-8)、细胞免疫荧光实验检测MSN@Mn-GOx诱导胃肠癌细胞的活性氧(ROS)生成、细胞增殖及细胞杀伤能力的改变。结果MSN@Mn-GOx为带负电荷的100 nm类圆形实心纳米颗粒,可催化葡萄糖产生大量氧气继而增加H2O2浓度。相比于中性H2O2溶液,MSN@Mn-GOx在低酸条件(pH=6.0)下可催化生成更多羟自由基(P<0.05)。MRI成像试验中,MSN@Mn-GOx有浓度依赖性的T1增强成像效果,在荷瘤小鼠体内观察到,相比于注射前,注射MSN@Mn-GOx后的瘤体有T1增强信号(P<0.01)。细胞免疫荧光实验显示:相比于Control组,MSN@Mn及MSN@Mn-GOx均可明显诱导胃肠癌细胞ROS产生(P<0.05)。CCK-8实验显示,相比于Control组,MSN@Mn及MSN@Mn-GOx对胃肠癌细胞浓度依赖性杀伤效果(P<0.05)。Edu实验显示,相比于Control组,MSN@Mn及MSN@Mn-GOx均可抑制胃肠癌细胞的增殖能力(P<0.05)。结论MSN@Mn-GOx具有良好的MRI成像效果、自产H2O2能力及类芬顿性能,可诱导胃肠癌细胞内ROS产生进而产生良好的抗肿瘤效应,是胃肠道恶性肿瘤治疗的一种潜在新方法。

miR-132诱导动脉粥样硬化中血管内皮细胞的促炎症过程

目的:探讨miR-132能否调控动脉粥样硬化的促炎性过程。方法:用miR-132模拟物和抑制剂转染人脐静脉内皮细胞,然后根据实验要求用或不用肿瘤坏死因子α(TNFα)处理,分从mRNA和蛋白水平检测SIRT1及其下游基因的表达量。结果:与对照组相比,转染miR-132的内皮细胞中,3′UTR荧光素酶活性(0.338±0.036)显著下降(P=0.000)。在人脐静脉内皮细胞中,miR-132能在mRNA水平及蛋白水平抑制SIRT1的表达(P<0.01)。同样,SREB、脂肪酸合酶及HMGCR的表达均出现下降。结论:miR-132直接作用于SIRT1的mRNA。在人脐静脉内皮细胞中,miR-132通过抑制SIRT1、SREBP-1c及其下游调控基因包括FASN和HMGCR的表达,控制脂肪生成和胆固醇生成。miR-132抑制SIRT1的表达,参与内皮细胞中脂质代谢依赖性的促炎性过程。miR-132可能是种新型的靶向治疗AS的方法。

改良式颈动脉内膜剥脱术治疗颈动脉狭窄:附2例报道

在传统颈动脉内膜剥脱术的基础上,我们通过两例病例报道来研究一种新型颈动脉内膜剥脱术,无需补片,改变颈动脉切口的方向以防颈内动脉再狭窄,2例患者术后恢复良好,无手术并发症。研究发现,与外翻式、补片式相比,改良式颈动脉内膜剥脱术既可防止再狭窄发生,又能缩短手术时间,具有明显可行性。

miR-132在人脐静脉内皮细胞中的生物学功能

目的:探讨动脉粥样硬化组织中miRNA-132的表达及其对内皮细胞增殖、凋亡及脂代谢的影响.方法:用Real-time PCR法检测48例动脉粥样硬化患者组织与正常动脉组织的表达量;培养人脐静脉内皮细胞,分别转染miR-132 inhibitor及阴性对照,检测细胞的增殖、凋亡;利用Western blot检测相关基因表达变化.结果:抑制miR-132表达,内皮细胞的增殖增强,凋亡减少;增殖相关基因PCNA和KLF5升高及凋亡相关基因表达降低.结论:miR-132抑制HUVEC细胞的增殖,并在体外诱导细胞凋亡,miR-132可能抑制动脉粥样硬化的形成,其抑制功能可能通过下游PCNA和KFLs而实现.

CBL在血管外科教学中的应用

为克服传统教学模式的缺点、提高教学质量,将CBL引入血管外科教学。通过实践,探讨了CBL模式在血管外科教学中的应用及效果,并对CBL的难点与重点、优势与不足进行归纳总结,为培养临床型人才提供经验借鉴。

基于氧化亚铜纳米颗粒的光热/化学动力协同策略体外抑制胃癌细胞的迁移

目的探讨氧化亚铜(Cu_(2)O)纳米的制备、物化表征及其胃癌抗肿瘤效应的作用。方法采用透射电镜,动态光散射,Zeta电位分析及紫外吸收光谱分析方法分析Cu_(2)O纳米的形貌、粒径大小及类芬顿性能,利用不同浓度的Cu_(2)O纳米对细胞进行处理,并进行光照或者非光照处理,并分别采用细胞增殖-毒性实验(CCK-8)、Transwell细胞迁移实验评估该纳米的体外抗肿瘤作用效应。结果制备的Cu_(2)O纳米为100 nm左右的类圆形结构,在近红外光(NIR,0.5/cm2)照射5 min后Cu_(2)O纳米温度从25℃提高到50℃,同时Cu_(2)O纳米在过氧化氢浓度和pH为近中性的条件下(pH=6.5)可催化大量活性氧(ROS)生成。CCK-8试验表明:相比于对照组,Cu_(2)O纳米对胃癌细胞具有浓度依赖性抑制增殖作用;Transwell细胞迁移实验表明:Cu_(2)O纳米能抑制胃癌细胞的迁移能力。结论Cu_(2)O铜基纳米颗粒具备良好的光热性能、化学动力性能及抗肿瘤效应,是胃癌治疗的一种潜在新方法。

MicroRNA-132通过诱导线粒体氧化应激障碍-铁死亡进程促进动脉粥样硬化

目的探讨MicroRNA-132(miR-132)在动脉粥样硬化斑块中的表达及生物学意义。方法收集在本医院行外周血管造瘘手术的动脉粥样硬化患者的斑块样本及周围正常血管样本各30例,分为实验组(n=30)与对照组(n=30);利用RT-qPCR验证miR-132在30例组织标本中的表达水平;采用脂质体转染技术上调人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中miR-132的表达,继而通过流式细胞及激光共聚焦技术分析过表达miR-132的HUVEC内活性氧(ROS)、ROS与线粒体的定位关系、线粒体活性氧超氧化物(mtROS)、线粒体膜电位状态(MMP)以及线粒体膜转换孔通透性(mPTP)的功能变化;通过ELISA检测HUVEC内线粒体氧化还原呼吸链复合体(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型)活性的状态;通过Westernblot检测铁死亡关键蛋白的表达水平。结果与正常血管样本(对照组)相比,miR-132在动脉粥样硬化斑块的表达水平显著上调(P<0.001);相比于正常HUVEC,脂质体转染的HUVEC内miR-132表达量显著上升(P<0.001),细胞内ROS明显增加(P<0.001),且大部分ROS与线粒体存在共定位关系;同时于正常HUVEC,miR-132过表达的HUVEC细胞内MMP下降(P<0.001)、mtROS升高(P<0.001)、线粒体活性氧mPTP更多开放(P<0.001),继而引起线粒体氧化还原呼吸链应激障碍,铁死亡关键蛋白GPX4显著下调(P<0.001)、氧化蛋白NOX4显著增多(P<0.001)。结论MiR-132可通过诱导线粒体氧化应激障碍-铁死亡进程促进动脉粥样硬化,有望成为动脉粥样硬化的治疗靶点。

球囊扩张成形术处理透析用动静脉内瘘狭窄性病变及短中期结果

目的：探讨球囊扩张成形技术在治疗血液透析用动静脉内瘘（AVF）狭窄的临床效果。 方法：回顾性分析2014年5月—2015年12月间采用球囊扩张成形技术治疗的31例血液透析用AVF狭窄性病变患者的临床资料。 结果：31例患者中，男18例，女13例；桡动脉-头静脉内瘘27例，桡动脉-贵要静脉内瘘2例，尺动脉-贵要静脉内瘘2例；均接受球囊扩张技术治疗。28例（90.3%）获得技术上的成功，围手术期无患者死亡。1例患者术后出现动脉穿刺处假性动脉瘤，1例患者术后出现AVF血栓形成，1例患者出现前臂皮下血肿，其他所有患者AVF恢复通畅并能够以正常流量进行血液透析治疗。术后随访3-12个月，3、6、12个月初次通畅率分别为92.9%，75.0%，50.0%。 结论：球囊扩张成形术处理AVF狭窄性病变微创、安全，是AVF狭窄性病变的合理治疗方法，但其中长期疗效仍有待于进一步改善。

Hybrid技术在复杂主动脉病变治疗中的应用

目的:探讨杂交技术在复杂主动脉病变应用。方法:回顾性分析2007年8月—2012年8月采用Hybrid技术治疗的12例复杂主动脉病变患者的临床资料,其中主动脉夹层9例,胸腹主动脉瘤3例,手术方式主要为各种人工血管旁路术联合覆膜支架腔内修复术。结果:所有患者均取得技术成功。1例主动脉夹层患者术后出现支架近心端1型内漏,未予处理,1例主动脉夹层患者围手术期死于严重纵膈内感染,余患者术后康复良好。8例患者随访3个月至2年,均存活良好,未发现内漏及其他并发症。结论:Hybrid技术是治疗复杂主动脉病变一种合理的可选择方案。

CBL教学在血管外科轮转住院医师培养中的应用

目的探讨以病例为基础的学习（case．basedlearning，CBL）在血管外科临床带教中的应用及效果。方法将37名住院医师随机划分为CBL教学组（21人）和传统带教组（16人）。CBL教学通过典型病例的选择——典型病例库的建立与应用——自主学习——定期举办学术讲座等步骤开展教学。传统带教以基础理论学习、参与临床实践、参加科室病例讨论等方式开展教学。以出科考试（笔试和临床操作技能）、住院医师对教学法的反馈进行效果评价，对数据进行描述性统计分析和独立样本t检验。结果CBL教学组的笔试成绩和临床技能考核后测成绩均高于传统带教组『笔试成绩（85．53±1．75）VS．（79．94±2．29）；临床技能成绩（85．10±1．64）VS．（80．31±1．82）1。在提高学习效率、培养临床思维、促进知识的掌握与应用、拓宽知识面、增进交流与表达能力、提高学习积极性等方面，CBL教学组也有较大优势。结论CBL教学能有效提高教学质量，并获得更高的评价，但必须不断完善典型病例库，加强对血管外科基础理论的教育更有利于CBL的开展。

颅外段颈动脉损伤九例

颈动脉损伤（carotid artery injury,CAI）病程凶险，死亡率高、按受伤部位呵分为颅内段及颅外段。按伤情可分为开放性和闭合性，后者也被称为钝性颈动脉损伤（blunt carotid artery injuries，BCAl）。笔者回顺分析我院2004年1月-2010年12月收治的9例颅外段CAI患者的诊治过程，现报告如下．

超声定位腔镜深筋膜下交通支离断术治疗下肢静脉性溃疡

目的：探讨腔镜深筋膜下交通支离断术（SEPS）治疗下肢静脉性溃疡（VU）的方法及效果。方法回顾性分析了20例VU患者共26条C5～C6级下肢SEPS手术的方法和效果。术前以超声对功能不全交通支（ICPV）行体表定位，术中先行大隐静脉腔内激光闭合，再以超声刀行 SEPS 术。结果超声对ICPV定位的正确率为90.63%，假阳性率6.25%，假阴性率9.38%，SEPS术后所有C6级患肢VU均在短期内愈合，随访期间无溃疡复发。结论超声对ICPV诊断准确率高，定位可靠。SEPS治疗VU术后安全，疗效确切，并发症少。

微小RNA-22调控人动脉平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡功能及其机制

目的探讨微小RNA（miRNA，miR）-22是否参与调控人动脉平滑肌细胞（ASMCs）功能及其机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—-PCR）和荧光原位杂交观察miR-22在动脉壁中的表达特点；细胞计数试剂盒（CCK-8）法、迁移小室（Transwell）及流式细胞实验分别检测miR-22对ASMCs增殖、迁移及凋亡的影响；双荧光素酶基因报告实验确定miR-22的靶基因；通过慢病毒过表达miR-22后，观察其对大鼠颈动脉球囊损伤后新生内膜的影响。结果（1）miR-22在动脉硬化闭塞症（ASO）血管壁中表达（0．256±O．046）明显低于正常血管壁（0．946±0．081，P=0．000），且其主要定位于动脉中层；（2）与对照组比较，miR-22具有抑制ASMCs增殖（1．146±0．050比1．677±0．082，P=0．000）和迁移（16．50±1．38比37．83±2．54，P=0．000），促进凋亡的功能[（7．33±0．98）％比（3．95±0．89）％，P=0．000]。（3）双荧光素酶基因报告实验证实真核生物延伸因子2激酶（eEF2K）是miR-22的靶基因，miR-22可在转录后水平负性调控eEF2K表达；（4）慢病毒（LV）-miR-22组（0．832±0．126）与对照组（1．579±0．215，P=0．000）比较，明显减少大鼠颈动脉新生内膜面积。结论miR-22通过靶向结合eEF2K，抑制ASMCs增殖及迁移、促进凋亡，减少新生内膜增生。

前S2区突变LHBs与C53蛋白相互作用对HepG2细胞生物学功能的影响

目的明确肝癌细胞系HepG2中前S2区突变乙型肝炎表面抗原大蛋白（hepatitis Bvirus large surface protein，LHBs）与C53蛋白相互作用对细胞生物学功能的影响。方法分别构建pc—MV-5a·pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒，共同转染肝癌细胞系HepG2后，分别检测其相互作用对Chkl活性的影响；BrdU法细胞增殖检测明确其对细胞有丝分裂及增殖的影响。结果成功构建pc—MV-5a—pres2LHBs和pCDNA-4-C53质粒；其在细胞内的相互作用增加细胞Cdkl活性并促进细胞的增殖和有丝分裂过程。结论肝癌细胞系HepG2内pres2LHBs及C53的相互作用对细胞生物学功能存在影响，提示可能与HBV后肝癌的发病机制相关。