高迁移率族蛋白1对Aβ_(25-35)刺激下BV-2细胞NF-κB表达的作用

目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对β-淀粉样蛋白(Aβ)_(25-35)刺激下的小鼠小胶质细胞系BV-2中核因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法:将对数期生长的BV-2细胞分为4组:正常细胞组(不做任何处理)、模型组(加入40μmol/L Aβ_(25-35))、RNA干扰组(采用RNA干扰HMGB1后加入40μmol/L的Aβ_(25-35))和溶剂对照组(加入终浓度为0.1%的DMSO)。各组细胞孵育72 h后(Aβ_(25-35)处理24 h)采用Western blot法检测HMGB1和NF-κB p65的蛋白表达情况。结果:CCK-8结果显示40μmol/L Aβ_(25-35)为最佳造模浓度。选择30 nmol/L带GFP荧光基团的HMGB1-siRNA转染BV-2细胞,转染效率约为80%~90%。Western blot实验结果显示,HMGB1-siRNA片段干扰后BV-2细胞中HMGB1的表达明显降低(P<0.05);Aβ_(25-35)刺激BV-2细胞后,胞内HMGB1和核内NF-κB p65表达均明显升高(P<0.05),HMGB1-siRNA作用后,HMGB1和核内NF-κB p65表达均明显下降(P<0.05)。结论:RNA干扰HMGB1表达可减少Aβ_(25-35)刺激的BV-2细胞核内NF-κB的表达。

姜黄素对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆及海马炎症信号通路的影响

目的:探讨喂饲姜黄素对淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因小鼠学习记忆和海马β-淀粉样蛋白(Aβ)含量及高迁移率族蛋白1(HMGB1)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)、Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB(NF-κB)p65表达的影响。方法:20只雄性转基因小鼠随机分为模型组(M组,n=10)和治疗组(T组,n=10),另选10只雄性同窝野生型小鼠作为对照组(C组,n=10)。T组4月龄起喂饲含姜黄素(100mg·kg-1·d-1)的饲料,M组和C组喂饲普通饲料,9月龄时进行Morris水迷宫实验,免疫组织化学和Westernblot分别检测Aβ和HMGB1、RAGE、TLR4、NF-κBp65蛋白的表达。结果:与C组比,M组水迷宫实验中逃避潜伏期延长(P<0.05),且平均跨平台次数减少(P<0.05),海马CA1区和DG区Aβ数量及IOD值增加(P<0.05),海马中HMGB1、RAGE、TLR4和NF-κBp65表达均增多(P<0.05)。与M组比,T组逃避潜伏期缩短(P<0.05),且平均跨平台次数增多,海马CA1区和DG区Aβ数量及IOD值降低(P<0.05),海马中HMGB1、RAGE、TLR4和NF-κBp65表达均减少(P<0.05)。结论:持续喂饲姜黄素5个月可显著改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力并减少海马Aβ含量,其机制可能与抑制海马HMGB1-RAGE/TLR4-NF-κB信号通路有关。

老年骨科患者术后高活动性谵妄危险因素的巢式病例对照研究

目的采用巢式病例对照研究探讨老年骨科患者术后高活动性谵妄（PHTD）发生的危险因素。方法回顾性分析2008年1月至2013年12月温州医科大学附属第二医院行骨科手术的老年患者病例资料，年龄I〉65岁、美国麻醉医师协会（ASA）分级为Ⅰ ～Ⅳ级，且病历资料齐全、明确诊断为PHTD的患者共74例作为病例组；采用巢式病例对照研究按1：6频数匹配同期同类无PHTD发生的患者444例作为对照组，收集患者年龄、性别、ASA分级、术前／术后电解质、术前血糖、术前／术后血浆白蛋白、术前／术后红细胞比容（Hct）、是否使用非甾体类镇痛药、抗胆碱能药物或苯二氮革类药物、麻醉方式、麻醉时间、术后镇痛差异等资料，筛选PHTD发生的危险因素。结果单因素Logistic分析显示性别、年龄、ASA分级、术前电解质、麻醉时间、手术时间、术中低血压、术后镇痛差异是PHTD发生的危险因素。多因素Logistic回归分析显示性别（OR=2．562，95％CI：1．438～4．564，P：0．001）、年龄（OR=3．929，95％CI：1．788～8．633，P=0．001）和术前电解质（OR=3．714，95％CI：2．068～6．670，P〈0．001）是PHTD发生的独立危险因素。结论男性、高龄、术前电解质异常是老年骨科患者PHTD发生的独立危险因素。