海南耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药基因分析

目的检测海南省5家综合医院临床送检微生物标本中的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌,了解其耐药基因及流行现状。方法收集2014年6月—2016年6月期间住院患者各种培养标本中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌菌株,对其进行菌种鉴定和药敏分析试验;然后对筛选出的菌株进行bla_(KPC-2)、bla_(NDM-1)和bla_(IMP)耐药基因PCR特异性扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析,经BLAST比对,确定耐药基因的基因型。结果从5家医院的临床各种标本中,收集到75株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE),主要为肺炎克雷伯菌45株占60.0%,阴沟肠杆菌13株占17.3%;科室分布主要为ICU占43.9%,儿科占10.7%;通过药敏实验表明75株CRE除对替加环素(10.6%)、阿米卡星(23.3%)、左氧氟沙星(37.3%)、环丙沙星(40.0%)的耐药率较低外,第一到第三代头孢及氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦的耐药率均为100%;第四代头孢头孢吡肟也达到89.3%,复方磺胺甲噁唑的耐药率78.7%,哌拉西林/三唑巴坦耐药率也达到64%;75株CRE细菌中11株bla_(KPC-2)基因阳性占14.6%;25株为bla_(NDM-1)基因阳性占33.3%和12株bla_(IMP)基因阳性占16%。结论 NDM-1型金属酶为海南省CRE菌株的主要耐药基因型,KPC-2型为首次发现占12%。未检测出目的基因的CRE菌株的耐药机制有待于进一步的研究。

孔雀石绿分光光度法测定双酚A

在酸性介质中,双酚A对羟基自由基氧化孔雀石绿的反应具有抑制作用,据此建立了测定双酚A含量的分光光度法。在最佳实验条件下,体系的吸光度变化值与双酚A浓度呈线性关系,其线性范围为8.14×10^-8~7.02×10^-7 mol/L。线性回归方程为ΔA=0.0184＋0.452c（×10^-6mol/L）,线性相关系数为0.9862,检出限为2.44×10^-8 mol/L。应用本法测定5种塑料制品中双酚A的含量,回收率在96%~106%之间,RSD在1.5%~3.8%之间。