病毒性心肌炎小鼠心肌骨桥蛋白和Ⅰ型胶原表达的动态变化

目的:观察病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌骨桥蛋白(OPN)及Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)的表达,探讨OPN在VMC发病中的作用机制。方法:以柯萨奇病毒B3(myocarditic coxsackievirus B3,CVB3)感染BALB/C小鼠建立VMC模型,取心肌组织行HE和Masson染色,并计算病理积分及心肌胶原纤维容积分数(CVF);RT-PCR检测Col I含量;RT-PCR及ELISA法检测OPN表达。结果:VMC组第7天心肌细胞大量坏死,炎性改变明显,随后炎性病灶逐渐吸收,第28天病灶周围炎细胞几近消失,纤维化明显;VMC组各时间点心肌病理积分、OPN mRNA表达均明显高于同时间点对照组(P<0.05),以第7天最高,第14天开始下降,与ELISA检测结果一致;第7,14天Col Ⅰ mRNA表达较弱,第21,28天表达增强,均高于对照组(P<0.05),与CVF结果一致,且Col Ⅰ mRNA与CVF呈正相关。结论:VMC急性期即出现OPN表达增加,至恢复期仍高于对照组,提示OPN可能参与VMC急性期的炎症反应,并促进恢复期胶原表达。

BOT及其核心问题浅析

BOT方式是国际上为利用私人资本进行基础设施建设而衍生的一种新型投资方式，涉及的当事人及法律关系都很繁杂。本文首先从内部剖析了BOT投资方式的基本问题及其特点，并在此基础上对当前BOT上存在的核心问题进行了比较分析，重点对其法律性质进行探析。

论我国海外直接投资保护措施的不足

随着国际贸易的日益频繁，我国对外投资呈增长之势，在此过程中也出现了不少投资纠纷。本文通过对我国目前几种主要的对海外直接投资利益的保护方式进行分析，拟找出其不足，为今后的改进做准备。

新生儿呼吸窘迫综合征患儿血清转化生长因子-β_1、骨形态发生蛋白-7、维生素A水平及其与病情程度的关系

目的探讨血清中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)、维生素A在新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)患儿中的表达情况及其与病情程度的关系。方法选取64例NRDS患儿及60例无NRDS的早产儿分别作为NRDS组、对照组,检测两组TGF-β_1、BMP-7和维生素A水平。结果 NRDS组血清TGF-β_1和BMP-7水平高于对照组(P<0.05),两组血清维生素A水平差异无统计学意义(P>0.05);病情Ⅲ~Ⅳ级NRDS患儿血清TGF-β_1和BMP-7水平高于Ⅰ~Ⅱ级患儿(P<0.05);NRDS患儿血清TGF-β_1和BMP-7水平与病情程度呈正相关(P<0.05),但维生素A与病情程度无相关性(P>0.05)。结论 NRDS患儿血清TGF-β_1和BMP-7水平明显升高,且两者水平越高患儿病情程度越重。

手足口病患儿血清免疫、炎性指标及心肌酶学指标的变化及其临床意义

目的探讨手足口病(HFMD)患儿血清免疫球蛋白、炎性细胞因子及心肌酶学指标水平的变化及其临床意义。方法选取湖南省妇幼妇幼保健院确诊的手足口病患儿128例进行回顾性分析,病例收集时间2013年6月-2017年2月,根据患儿病情分为普通组80例、重症组48例,分别检测两组血清免疫球蛋白、炎性细胞因子及心肌酶学指标水平并进行比较分析。结果血清Ig M、Ig G、Ig A水平组间比较,重症组均低于普通组(P<0.05);重症组患儿的血清IL-1β、IL-6、IL-10、IL-2、IFN-γ、TNF-α水平均高于普通组,差异均具有统计学意义(P<0.05);重症组患儿的血清CK-MB、LDH水平均高于普通组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 HFMD患儿的血清免疫水平降低、炎性反应程度加重、心血管系统可能受累。

曲尼司特对病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的作用

目的探讨曲尼司特在病毒性心肌炎心肌纤维化中的作用。方法 72只BALB/C小鼠随机分为对照组、模型组和干预组(n=24)。模型组和干预组小鼠感染柯萨奇病毒B3建立病毒性心肌炎模型,其中干预组小鼠造模后即用曲尼司特(200 mg/kg)灌胃给药直到取材前一天;对照组和模型组小鼠予等量生理盐水灌胃。造模后第7、14、28天取各组8只小鼠心肌组织,甲苯胺蓝染色、硫堇染色检测心脏肥大细胞数目,苏木精-伊红染色观察心肌组织病理学变化,Masson三色染色观察心肌纤维化,RT-PCR、免疫组化检测骨桥蛋白(OPN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA及蛋白表达,并对OPN mRNA与肥大细胞数目作相关性分析。结果模型组和干预组小鼠心肌组织OPN mRNA及蛋白的表达于第7天达最高,第14天次之,第28天最低;TGF-β1 mRNA及蛋白的表达第7天升高,第14天达高峰,第28天较前稍下降;干预组小鼠心肌组织TGF-β1、OPN mRNA及蛋白在各时间点的表达均低于模型组(均P<0.05),但仍高于对照组(均P<0.05)。肥大细胞的数目与OPN的表达呈正相关。结论曲尼司特可能通过减少肥大细胞数,抑制TGF-β1及OPN表达,在抗心肌纤维化过程中起重要作用。

心脏肥大细胞及Toll样受体4在小鼠病毒性心肌炎中的作用

目的探讨心脏肥大细胞及Toll样受体4(TLR4)在病毒性心肌炎(VMC)发生发展中的作用。方法 48只BALB/C小鼠随机分为对照组和模型组,每组24只,以柯萨奇病毒B3腹腔注射制作VMC模型,分别于制模后7 d、14 d和28 d,两组各取8只小鼠心肌组织,行苏木精-伊红和Masson染色观察两组小鼠心肌病理改变,以甲苯胺蓝染色法和透射电镜检测两组小鼠各时间点心肌肥大细胞数目及脱颗粒情况,采用免疫组化法及RT-PCR检测小鼠心肌TLR4及其mRNA的表达,并对模型组各时间点肥大细胞数目及TLR4 mRNA的表达进行相关性分析。结果模型组各时间点心肌病理评分均较对照组明显增高(均P<0.05);模型组28 d时心肌胶原纤维容积分数较对照组各时间点以及模型组7 d、14 d时均明显增高(均P<0.05)。模型组肥大细胞数目明显多于对照组相应时间点(均P<0.05);各时间点模型组心肌TLR4及其mRNA表达均高于对照组(P<0.05)。模型组各时间点心肌肥大细胞数目和TLR4 mRNA表达呈正相关(R2=0.877,P<0.05)。结论 VMC小鼠心肌肥大细胞数和TLR4的表达在各时间点均较对照组明显增加,提示肥大细胞及TLR4可能在VMC的炎症反应和纤维化过程中起重要作用。

曲尼司特抑制病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的作用

目的探讨曲尼司特对病毒性心肌炎(VMC)小鼠心肌纤维化的作用。方法 72只BALB/C小鼠完全随机分为对照组、模型组和干预组(n=24),对照组小鼠腹腔内注射Eagle's培养液,模型组和干预组腹腔注射科萨奇病毒B3建立VMC模型,干预组建模后予曲尼司特灌胃(每日200 mg/kg),维持给药到取材前一天。分别在造模后7、14、28 d三个时间点每组各取8只小鼠心肌组织,行苏木精-伊红染色和Masson染色观察病理改变;甲苯胺蓝和硫瑾染色观察肥大细胞(MC)计数;RT-PCR及Western blot检测结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)的m RNA及蛋白表达量;并分别对CTGF m RNA与MC计数和ColⅠm RNA的表达进行相关性分析。结果各时间点模型组心肌病理积分及胶原容积分数高于对照组,曲尼司特干预后降低(P<0.05)。模型组MC计数、CTGF和ColⅠm RNA及蛋白的表达高于对照组,曲尼司特干预后降低,但仍高于对照组(P<0.05)。模型组7 d、14 d时心肌MC计数与CTGF m RNA呈正相关(r=0.439,P=0.049);模型组7 d、14 d时心肌组织CTGF m RNA与ColⅠm RNA呈正相关(r=0.646,P=0.007),28 d时亦呈正相关(r=0.326,P=0.031)。结论曲尼司特可能通过抑制MC的聚集、降低CTGF和ColⅠ的表达,减轻VMC小鼠心肌纤维化效应。

脓毒症患儿血浆miR-146a、miR-223表达与IL-6、IL-10、TNF-α水平变化的临床意义分析

目的:探讨脓毒症患儿血浆微RNA-146a(miR-146a)、miR-223表达及与白细胞介素-6(IL-6)、IL-10和肿瘤坏死因子(TNF-α)的关系。方法:选取2016年2月至2017年2月在我院治疗的脓毒症患儿44例作为脓毒症组,同时选取32例全身性炎症反应综合征(SIRS)患儿(SIRS组)和40例健康儿童(对照组),检测和比较各组患儿血浆miR-146a、miR-223、IL-6、IL-10和TNF-α的表达,同时采用序贯器官衰竭估计评分(SOFA评分)评价脓毒症患儿的病情。结果:脓毒症组miR-146a、miR-223、IL-6和IL-10表达分别为(5.90±1.22)×10^(-5)、(13.17±2.13)×10^(-4),20.21(12.06,64.13)ng/L和17.60(8.94,70.11)pg/m L,明显高于SIRS组和对照组(P<0.05);脓毒症组和SIRS组血浆TNF-水平分别为(22.50(22.50,29.80)pg/m L和(23.40(19.41,30.01)pg/m L,明显高于对照组(P<0.05);患儿miR-146a、miR-223与SOFA评分呈正相关(rs=0.411和0.321,P<0.05),而血浆IL-6、IL-10及TNF-α水平与SOFA评分无显著相关性(P>0.05);miR-146a与血浆IL-6、IL-10水平呈显著正相关(rs=0.297和0.301,P<0.05),miR-223与血浆TNF-α水平呈正相关(rs=0.284,P<0.05)。结论:脓毒症患儿血浆miR-146a和miR-223表达、IL-6、IL-10和TNF-α水平均异常上调,且血浆miR-146a和miR-223表达与IL-6、IL-10、TNF-水平及病情程度显著相关。