角质细胞生长因子-2的发酵及纯化工艺研究

目的研究重组人角质细胞生长因子 2 (rhKGF 2 )工程菌的高密度发酵和提纯工艺。方法通过增加培养基营养成分 ,发酵过程补加葡萄糖 ,获得高产率菌体。细菌裂解液经硫酸铵沉淀、分子筛、肝素亲和色谱和离子交换色谱等方法进行纯化 ,电泳分析结果。结果每 1L发酵液可获得菌体 12 .2g ,表达率达 2 8.7%。纯化后rhKGF 2纯度达 97%。结论rhKGF 2工程菌可获得高密度发酵。纯化工艺适用于rhKGF

重组人白细胞介素-2/粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子融合蛋白的纯化及复性研究

目的 研究重组人白细胞介素－２／粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＩＬ－２／ＧＭ－ＣＳＦ）融合蛋白纯化及复性的最佳条 件。方法 常规方法提取包涵体，用本室专利技术提纯，复性后样品经 ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ离子交换层析，获得融合蛋 白。结果获得具有生物活性的融合蛋白，其纯度达到９５％。结论 此工艺操作简便，纯化效果好，获得率高。

重组人IL-2-GM-CSF融合蛋白的分离纯化及稳定性研究

IL-2(白细胞介素2)、GM-CSF(粒/巨噬细胞集落刺激因子)是机体两个重要的细胞因子,对抗原提呈细胞(APC)、T细胞及体液免疫应答能力均有很强的调节作用。我们设计研制了重组人IL-2-GM-CSF融合蛋白,以期通过此融合蛋白与T细胞和巨噬细胞膜表面相应受体结合,来提高抗原提呈的效率,并研究其新的生物学功能。 从PLY4-IL-2-GM-CSF工程菌(DH5α)中挑取单菌落,在LB中制备过夜菌。