蒙花苷体内外抗肺纤维化作用及其机制研究

目的 考察蒙花苷的体内外抗纤维化作用,并初步探讨其作用机制。方法 将C57BL/6J小鼠随机分为正常组(羧甲基纤维素钠)、模型组(羧甲基纤维素钠)、阳性对照组(吡非尼酮,200 mg/kg)和蒙花苷低、高剂量组(12.5、25 mg/kg),每组8只。除正常组外,其余各组小鼠均制备肺纤维化模型。造模结束后,灌胃给药,每天1次,连续14 d。观察小鼠一般情况,测定其肺指数,检测其血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、转化生长因子β1(TGF-β1)水平以及肺组织中白细胞介素6(IL-6)水平;采用苏木素-伊红(HE)染色及Masson染色观察其肺组织病理学变化,并参照Ashcroft评分标准进行肺纤维化评分;检测其肺组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、磷酸化胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)、TGF-β1的表达水平。使用TGF-β1刺激人胚肺成纤维细胞HFL1建立体外肺纤维化模型,实验设置正常组、模型组和蒙花苷低、中、高浓度组(3.7、7.4、14.8 mg/L),培养48 h后,检测细胞中α-SMA、CollagenⅠ、p-ERK1/2蛋白表达水平。结果 在体内实验中,与正常组比较,模型组小鼠肺指数和TNF-α、TGF-β1、IL-6水平均显著升高(P<0.01);肺泡中出现大量炎症浸染及细胞纤维化等病变,且有大量胶原蛋白沉积,HE染色和Masson染色评分均显著升高(P<0.01);肺组织中α-SMA、CollagenⅠ、p-ERK1/2及TGF-β1蛋白表达均显著上调(P<0.01)。与模型组比较,蒙花苷高剂量组小鼠上述指标均显著改善(P<0.05或P<0.01),蒙花苷低剂量组大部分指标(除肺指数外)均显著改善(P<0.05或P<0.01)。在体外实验中,与空白组比较,模型组细胞出现密度变大、明显增殖等变化,细胞中α-SMA、CollagenⅠ和p-ERK1/2蛋白表达均显著上调(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,蒙花苷各浓度组细胞密度变小,形态逐渐恢复正常;蒙花苷高浓度组细胞中上述蛋白及蒙花苷中浓度组细胞中p-ERK1/2蛋白表达均显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论 蒙花苷可能通过调控ERK及炎症相关通路,减轻炎症反应,从而发挥抗肺纤维化作用。

黄酮类成分抗肺纤维化的作用机制研究进展

肺纤维化是以成纤维细胞增殖及大量细胞外基质聚集并伴炎症损伤、组织结构破坏为特征的一大类肺疾病的终末期表现。研究表明,黄酮类成分具有抗肺纤维化的作用,其中二氢杨梅素、桑色素、漆黄素等可通过抑制成纤维细胞分化,阿尔泰金莲花总黄酮、橘皮苷、蒙花苷等可通过发挥抗炎作用,黄芩总黄酮、黄芩苷、白杨素等可通过抑制上皮-间充质转化,荔枝核总黄酮、地奥司明、水飞蓟宾等可通过抑制氧化应激,槲皮素、黄芩苷、芹菜素等可通过调控自噬,镰形棘豆总黄酮、毛蕊异黄酮、二氢槲皮素等可通过调控细胞凋亡过程,柚皮素、黄芩苷、香草兰总黄酮等可通过抑制细胞焦亡等多种途径,发挥抗肺纤维化的作用。

不同附子炮制品对肝损伤毒性的作用比较

目的与传统炮制黑顺片比较,探究无胆巴炮制蒸附片能否减轻对肝脏的损伤。方法将40只KM小鼠随机分为正常组、黑顺片低剂量组、黑顺片高剂量组、蒸附片低剂量组、蒸附片高剂量组。除正常组外,其余各组连续给药14d,记录小鼠体重变化。末次给药后,取心、肝、脾、肺、肾和胸腺计算脏器指数,检测血清中ALT和AST的变化,ELISA法检测肝组织匀浆中抗氧化相关指标的变化,HE染色观察肝组织病变,WesternBlot法检测肝组织中凋亡相关蛋白的变化。结果与正常组相比,两种附子炮制品都表现出对肝脏的损伤,与黑顺片相比,蒸附片两个剂量组对肝脏的损伤程度降低,表现为ALT、AST含量显著下降(P<0.05,P<0.01),蒸附片高剂量抗氧化指标SOD显著升高(P<0.05),同时MDA显著降低(P<0.01),凋亡蛋白Bax/Bcl2表达降低(P<0.05,P<0.01)。肝脏HE病理切片显示,蒸附片能有效缓解对肝脏的损伤。结论无胆巴炮制蒸附片较黑顺片相比,能有效降低对肝脏的损伤程度。