MMP-2、MMP-9和VEGF-D在乳腺癌中的表达及其与肿瘤淋巴管新生的关系

目的探讨MMP-2/-9和VEGF-D在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌淋巴管新生的关系。方法应用免疫组织化学方法,对48例乳腺癌组织及10例正常乳腺组织的MMP-2/-9、VEGF-D以及LYVE-1的表达进行检测,统计分析MMP-2/-9、VEGF-D与乳腺癌脉管新生的关系。结果 MMP-2/-9与VEGF-D在乳腺癌组织中均呈过表达,且在腋淋巴结转移组和无转移组的表达差异均有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组织中淋巴管新生密度在腋淋巴结转移组和无转移组的表达差异均有统计学意义(P<0.05),随着MMP-2/-9与VEGF-D表达强度增加,淋巴管新生数量也增加(P<0.01)。结论 MMP-2/-9和VEGF-D与乳腺癌淋巴结转移密切相关,可能通过协同促进淋巴管新生,是其促进乳腺癌的淋巴结转移的机制之一。

短肽RGDSY-CTTHWGFTLC对乳腺癌细胞转移和增殖的影响

目的研究短肽RGDSY-CTTHWGFTLC对乳腺癌MCF-7细胞的抗肿瘤能力,为开发更高效的肽类抗肿瘤药物奠定实验理论基础。方法 (1)化学合成目标短肽RGDSY-CTTHWGFTLC(简称RGDSY-CTT),阳性对照肽CTTHWGFTLC(简称CTT),阴性对照肽STTHWGFTLS(简称STT);(2)将MCF-7细胞接种于预涂布纤连蛋白的96孔板,与短肽共孵育2 h,检测RGDSY-CTT对MCF-7细胞粘附能力的影响;(3)将MCF-7细胞接种于预铺基质胶的Transwell小室,与短肽共孵育16 h,检测RGDSY-CTT对MCF-7细胞侵袭能力的影响;(4)与短肽共孵育12 h后,MTT法检测RGDSY-CTT对MCF-7细胞增殖能力的影响;(5)与短肽共孵育24 h后,PI染色流式法检测RGDSY-CTT对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响。结果(1)短肽对MCF-7细胞粘附能力的影响:RGDSY-CTT在终浓度为50、100、200μg/ml时,MCF-7细胞的粘附率依次为85.1%、74.1%和63.8%,随着浓度升高,粘附率明显降低,且比CTT组下降更显著(P<0.05);(2)短肽对MCF-7细胞侵袭能力的影响:RGDSY-CTT在终浓度为100、200μg/ml时,对MCF-7细胞的侵袭抑制率分别为41.8%和63.9%;两个浓度均有明显抑制(P<0.01);但与CTT组比抑制无显著差异(P>0.05);(3)短肽对MCF-7细胞增殖的影响:RGDSY-CTT在终浓度为50、100、200μg/ml时,MCF-7细胞的增殖率依次为98.8%、82.4%和63.0%,随着肽浓度升高,增殖率下降明显;在100、200μg/ml时增殖抑制能力比CTT更强(P<0.05);(4)短肽对MCF-7细胞凋亡和细胞周期的影响:RGDSY-CTT处理组MCF-7细胞经流式法检测到凋亡峰,细胞周期阻滞发生在G0/G1期,占76.7%,显著高于CTT组、STT组及正常对照组(P<0.01)。结论 RGDSY-CTT能抑制乳腺癌细胞的侵袭能力,同时还具有抑制乳腺癌细胞粘附、增殖和诱导肿瘤细胞凋亡的能力。

乳腺癌MMP-2、MMP-9的体外阻断研究

目的:探讨乳腺癌MMP-2、MMP-9表达的临床病理联系及直接阻断MMP-2、MMP-9对乳腺癌细胞增殖、侵袭及细胞周期的影响。方法:应用免疫组织化学方法检测48例乳腺癌MMP-2、MMP-9的表达。明胶酶谱法检测乳腺癌MCF-7细胞MMP-2、MMP-9的表达。MCF-7细胞接种于预铺BME的Transwell小室上室,与MMP-2、MMP-9的阻断剂CTT共孵育16h,观察阻断MMP-2、MMP-9对MCF-7细胞侵袭能力的影响。MCF-7细胞与CTT共孵育12h后,MTT法检测阻断MMP-2、MMP-9对细胞增殖能力的影响。MCF-7细胞与CTT共孵育24h后,PI染色流式法检测阻断MMP-2、MMP-9对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:48例乳腺癌组织有MMP-2表达者45例(93.75%),MMP-9表达者38例(79.17%),MMP-2和MMP-9在发生淋巴结转移组明显高表达(P<0.05);组织学分级越高,MMP-2和MMP-9的表达越显著(P<0.05)。明胶酶谱法检测:在MCF-7培养上清中检测到MMP-2、MMP-9的表达。在浓度为100μg/ml和200μg/ml时CTT对MCF-7细胞的侵袭抑制率达到39.5%和61.9%。在终浓度为50、100、200μg/ml时,CTT对MCF-7细胞的增殖率均无明显下降(P>0.05)。CTT处理组MCF-7细胞经流式法检测未见凋亡峰,细胞周期各期未见明显阻滞(P>0.05)。结论:MMP-2、MMP-9与乳腺癌的淋巴结转移密切相关,阻断MMP-2、MMP-9可有效抑制乳腺癌的浸润和转移。

不同年龄段女性乳腺癌临床病理特点回顾性分析

目的：回顾性分析不同年龄段女性乳腺癌的临床病理特征，探讨其发病特点，为不同年龄段女性乳腺癌临床诊治提供经验。方法整理并分析广州医科大学附属第一医院2001年1月至2005年12月确诊的123例不同年龄段女性乳腺癌的临床病理资料及相关免疫组化指标。结果123例乳腺癌患者中，青年组（≤35岁）女性乳腺癌占7.3％，中年组（＞35~60岁）女性乳腺癌占67.5％，老年组（＞60岁）女性乳腺癌占25.2％。青年组乳腺癌淋巴结转移率、肿瘤大小及组织学分级（Ⅱ/Ⅲ级）明显高于中、老年组，差异均有统计学意义（P＜0．05），而中、老年组间比较，差异无统计学意义（P＞0．05）。病理分型：全部乳腺癌中有非特殊类型乳腺癌101例，特殊类型乳腺癌22例；青年组乳腺癌9例全是非特殊浸润癌，而＞中年组非特殊浸润性乳腺癌占81.9%，老年组非特殊浸润性乳腺癌占77.4%，青年组非特殊浸润性乳腺癌占比明显高于中、老年组，但各组间比较，差异均无统计学意义（P＞0．05）。免疫组化指标青年组乳腺癌表皮生长因子（VEGF）-C/VEGF-D的表达阳性率分别为100.0%和88.9%，高于中年组的77.1%和72.3%，以及老年组的70.9%和67.7%，但各组间VEGF-C/VEGF-D表达阳性率比较，差异均无统计学意义（P＞0．05）。结论＞35~60岁是女性乳腺癌发病高峰，青年组女性乳腺癌淋巴结转移率、肿瘤大小、组织学分级等临床病理特征及VEGF-C/-D表达阳性率均高于中、老年组，其恶性程度更高，临床处理需注意早期诊断和治疗。

医学成人教育实践与发展的思考

医学成人教育实践过程中存在的一系列问题,可能对成人教育质量造成不良影响,分析考虑可以从弹性学制、课程建设、教学方法和手段、考核制度及师资队伍建设等方面进行教学改革和尝试,希望能找到一种适合成人学员的教学模式,使之愿意学、方便学、真正能提升其能力和技能,切实提高成人教育质量。

双靶点抗肿瘤肽RGDSY-CTTHWGFTLC的设计合成及活性研究

目的设计合成CTTHWGFTLC(简称CTT)的衍生肽RGDSY-CTTHWGFTLC(简称RGDSY-CTT),以期获得更优的水溶性、活性和抗肿瘤能力。方法 (1)自行设计RGDSY-CTT肽,化学合成(公司合成),并合成CTT(阳性对照)、STT(即STTHWGFTLS,阴性对照),质谱分析。(2)将Ⅳ型胶原酶、酶底物酪蛋白分别与RGDSY-CTT、CTT共孵育,酪蛋白水解抑制实验检测短肽的抑酶活性。(3)取RGDSY-CTT、CTT分别溶于蒸馏水,以蛋白定量BCA法对比两者的溶解度。(4)MCF-7细胞接种于预涂布纤连蛋白的96孔板,分别与RGDSY-CTT、CTT、STT共孵育,细胞黏附试验比较短肽对MCF-7细胞黏附能力的影响。(5)MCF-7细胞接种于Transwell小室的上室,分别与RGDSY-CTT、CTT、STT共孵育,细胞迁移试验比较RGDSY-CTT与CTT对MCF-7细胞迁移能力的影响。结果短肽合成,质谱分析符合。在浓度为250μg/ml时RGDSY-CTT、CTT对Ⅳ型胶原酶的水解抑制率为53.6%和77.7%;在500μg/ml时,两者抑制率分别为94.6%和96.9%。BCA法测得CTT的饱和溶解度约为745μg/ml,而RGDSY-CTT最高检测值为4 030μg/ml,溶液并未饱和。RGDSY-CTT在终浓度为50、100、200μg/ml时,MCF-7细胞的黏附率依次降低为:85.1%、74.1%、63.8%,黏附率显著低于CTT处理组(P<0.01)。在100和200μg/ml浓度时,RGDSY-CTT对MCF-7细胞的迁移抑制率为42.9%和60.8%;两个浓度RGDSY-CTT的抑制作用均比CTT强(P<0.05)。结论新合成短肽RGDSY-CTT的水溶性较CTT明显改善。RGDSY-CTT获得了抑制肿瘤细胞黏附的能力,并具有比CTT更强的运动抑制能力。

视网膜母细胞瘤Rb50细胞株VEGFR-3表达的研究

目的:研究视网膜母细胞瘤细胞株VEGFR-3的表达,探讨视网膜母细胞瘤自身增殖的机制。方法:选择Rb50细胞株,通过S-P免疫组化法、RT-PCR法及PCR产物琼脂糖凝胶电泳等方法,研究Rb50细胞株VEGFR-3的表达情况。结果:S-P免疫组化法呈阳性结果,表明Rb50细胞株有VEGFR-3的表达,RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳表明Rb50细胞株有较高水平VEGFR-3 mRNA的存在。结论:视网膜母细胞瘤细胞株有VEGFR-3的表达,表明VEGFR信息通路对视网膜母细胞瘤生长、浸润的影响,除了与促进肿瘤血管及淋巴管新生,改善肿瘤组织微环境相关外,还与促进肿瘤细胞自身增殖有关。

2型糖尿病患者的肺病理改变及单肺通气时呼吸力学的变化

目的:观测2型糖尿病患者肺组织病理改变及单肺通气时呼吸力学变化的特点。方法:40例接受胸腔镜手术患者按是否合并2型糖尿病分为糖尿病组(DM组)和对照组(C组)。观测两组患者肺组织病理改变并用免疫组化法对组织中的糖基化终末产物(AGEs)作定性分析。观测两组患者在麻醉前(T1)、麻醉后单肺通气前(T2)、手术结束前(T3)、术后24 h(T4)各时刻血糖、血气分析及吸气峰压等指标的变化。结果:与C组比较,DM组患者的肺病理改变表现为:肺泡壁、动脉壁普遍增厚,肺泡间隔可见明显纤维组织增生,肺间质可见明显炎性细胞浸润;免疫组化法可见组织中的AGEs阳性表达;单肺通气时DM组出现吸气峰压升高及氧合指数降低(P<0.05)。结论 :2型糖尿病患者单肺通气时呼吸力学指标出现吸气峰压升高及氧合指数降低的改变特点,可能与糖尿病患者的肺病理损害及AGEs在肺组织中的沉积有关。

《肾小球肾炎》网络课件的设计与制作

随着现代教育的发展,网络课件的设计与制作已成为现代教育技术研究的一个重要领域。该文介绍了根据肾小球肾炎教学内容及教学目标的要求进行网络课件的设计与制作的总体过程。网络课件给学生创造了立体学习空间,为医学专业课注入了新的内涵和新的信息。

病理学实验课教学的几点体会

病理学是研究疾病的发生、发展及其转归规律的一门基础医学课程,因其是一门形态学科,理解内容相对少,记忆内容多而令人感到枯燥乏味,部分学生缺乏学习兴趣,影响教学质量。病理实验教学从实验教学方法、教学内容、教学手段等方面进行了初步的探讨和实践。

《肾脏病理》网络课件的研制

结合<肾脏病理>网络课件的研制与应用,介绍了网络课件制作的具体方法、常用软件及技术路线,总结了制作技巧及注意事项,为医学网络课件的制作提供经验.

基于微课的混合式教学模式设计与实践

混合式教学模式融合了传统教学和网络教学的优势,已成为现代教学发展的重要方向。从混合式教学设计、网络资源开发、混合式教学实践、教学效果分析等方面对基于微课的混合式教学模式进行深入探究。精炼生动的微课资源是混合式教学成功实施的保障。学生在线自主学习是混合式教学成功实施的前提;课前、课中、课后的无缝衔接,一体化的有机融合是混合式教学成功实施的核心;教师主导的学生之间激烈探讨是混合式教学成功实施的关键;混合式教学改革能够极大地激发学生的学习兴趣,提高了教学质量。

医学形态学实验课程的跨学科整合探索

医学课程整合教学是医学教育教学改革的发展趋势。广州医科大学基础学院紧跟国内外教改动态及充分考虑自身条件，将传统的基础医学形态实验课程体系模块化，按实验内容相近原则进行分割，构建医学人体形态学（人体解剖学、组织胚胎学、病理学）、免疫及病原生物学（微生物、寄生虫、免疫学）、生物科学（细胞生物学、遗传学、生物科学）3个模块。根据教学内容的整合，逐步建立健全综合形态学实验教材、教学方法、考核体系和评价手段等。形成以器官系统为基础、内容冗余度少、结构性好、整体协调的基础医学形态课程体系。

基质金属蛋白酶2和9及血管内皮生长因子C在乳腺癌淋巴结转移中的作用

目的研究血管内皮生长因子C（VEGF-C）与基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9在乳腺癌组织中的表达及三者在乳腺癌淋巴结转移中的作用。方法应用免疫组织化学sP法对84例乳腺癌（有腋淋巴结转移者52例，无腋淋巴结转移者32例）的VEGF—C、MMP-2和-9以及血管内皮透明质酸受体-1（LYVE-1）的表达进行检测，统计分析VEGF—C、MMP-2和-9与乳腺癌淋巴管生成的关系。利用重组质粒表达载体介导的短发夹式干扰RNA（shRNA）靶向沉默乳腺癌MCF-7细胞株中VEGF—C基因，PCR检测VEGF—C、MMP-2和-9的表达。结果VEGF—C与MMP-2和-9在乳腺癌组织中均呈过表达，分别为83．3％（70／84）、89．3％（75／84）和75．0％（63／84），且在腋淋巴结转移组[94．2％（49／52）、98．1％（51／52）和88．5％（46／52）]比无淋巴结转移组[65．6％（21／32）、75．0％（24／32）和53．1％（17／32）]明显高表达（P〈0．05）；淋巴管密度在腋淋巴结转移组及无转移组的表达有统计学意义（P〈0．05），随着VEGF．C与MMP-2和-9表达强度增加，淋巴管数量也增加（P〈0．05）；转染重组质粒后MCF-7细胞株的VEGF．C及MMP-2和．9的mRNA表达水平下调，抑制率分别为95．O％、53．0％和77．0％（P〈0．05）。结论VEGF-C与MMP-2和-9协同促进乳腺癌组织的淋巴管新生和乳腺癌淋巴结转移。

鼻炎患者气道炎症和高反应性特征比较

目的比较变应性与非变应性鼻炎患者全身及上下气道炎症、气道高反应性的特征及差异,探求上下气道炎症及高反应性之间的内在联系。方法按是否具有鼻炎临床症状及变应原皮肤点刺试验结果将受试者分为三组:变应性鼻炎组184例、非变应性鼻炎组129例、健康正常组162例,均进行外周血嗜酸粒细胞(EOS)计数、鼻灌洗液炎症细胞分类、诱导痰炎症细胞分类、呼出气一氧化氮、肺通气功能检查和乙酰甲胆碱支气管激发试验。比较三组全身及上下气道炎症、气道高反应性的特征及差异。结果①非变应性鼻炎和变应性鼻炎组患者血EOS计数、鼻EOS计数、痰EOS比例阳性率与正常组的差异均具有统计学意义(P<0.01),变应性鼻炎组呼出气一氧化氮、支气管激发试验阳性率与正常组的差异具有统计学意义(P<0.01);②增加下气道EOS炎症发生的危险因素分别是:变应原皮肤点刺试验阳性(OR=4.096)、血EOS计数升高(OR=9.715)、气道高反应性(OR=3.107)和鼻灌洗液EOS计数升高(OR=16.398);③增加气道高反应性的危险因素分别是:变应原皮肤点刺试验阳性(OR=4.276)和诱导痰EOS比例升高(OR=4.890)。结论部分无下呼吸道症状的变应性鼻炎患者存在下气道炎症及高反应性;部分无下呼吸道症状的非变应性鼻炎患者存在下气道炎症;上气道炎症是导致下气道炎症的主要高危因素;特应性体质和气道炎症是气道高反应性的独立危险因素。因此,上气道炎症导致下气道炎症,甚至发展为下气道高反应性可能是部分非变应性鼻炎患者向变应性鼻炎甚至哮喘发生、发展的重要过程和机制。

羧甲司坦对香烟烟雾提取物诱导A549细胞炎性损伤的影响

目的:探讨羧甲司坦抑制香烟烟雾提取物(CSE)诱导A549细胞炎性损伤的作用。方法:传代培养人A549细胞并分为5组:对照组,CSE组,羧甲司坦低、中、高剂量组(予不同浓度羧甲司坦孵育和CSE诱导)。qRT-PCR、ELISA检测主要细胞因子的合成和释放,免疫蛋白印迹(Western-blot)、免疫荧光(IF)观察NF-κB及MAPK相关信号通路的活化情况。结果:以羧甲司坦预处理或后处理,均可降低CSE诱导的A549细胞的IL-6、IL-8和MIP-1βmRNA的表达;降低IL-6及IL-8的释放。羧甲司坦预处理可抑制p65入核。Western-blot结果显示,对照组,CSE组,羧甲司坦低、中、高剂量组的P-p65蛋白相对表达量分别为(0.17±0.05)、(0.90±0.19)、(0.68±0.15)、(0.64±0.12)和(0.57±0.13),pERK1/2蛋白相对表达量分别为(0.30±0.10)、(1.25±0.33)、(1.01±0.19)、(0.89±0.22)和(0.81±0.18),CSE组均明显高于对照组,羧甲司坦低、中、高剂量组均明显低于CSE组(P<0.05)。结论:羧甲司坦通过抑制NF-κB p65及ERK1/2 MAPK活化,发挥对CSE诱导的A549细胞炎性损伤的保护作用。