对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤大鼠血浆miR-122表达的变化

目的探讨血浆微RNA(miR)-122在药物性肝损伤中的变化及其在肝毒理临床前评价中的作用。方法 SD雄性大鼠单次ig给予对乙酰氨基酚0,625和1250mg·kg-1,并于给药后1.5,3,6,12,24,36及96h采集血样。以乙酰氨基酚诱导急性肝损伤大鼠血浆中稳定表达的miR-103为校正基因,实时定量逆转录PCR(RT-qPCR)法检测不同时间点大鼠血浆miR-122的表达。测定血浆中不同时间点谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)和肝组织病理学检查。结果组织病理学观察结果显示,与正常对照组相比,大鼠分别ig给予对乙酰氨基酚625mg·kg-1 1.5和3h后,肝组织病理无明显变化,给药后6和12h,肝腺泡Ⅲ带出现明显的空泡样变性和肝窦充血,给药后24h肝腺泡Ⅲ带有明显的细胞坏死;而36h时基本恢复正常;而对乙酰氨基酚1250mg·kg-1组给药后24和36h时肝腺泡Ⅲ带有明显的细胞坏死。与正常对照组相比,大鼠分别ig给予对乙酰氨基酚625和1250mg·kg-1后12和24h,血清GPT和GOT均有显著性升高(P<0.05),且对乙酰氨基酚1250mg·kg-1组大鼠血清GPT活性均是对照组2倍以上。与正常对照组相比,血浆miR-122在大鼠给予对乙酰氨基酚1250mg·kg-1 1.5h即升高3.6倍(P<0.05),并且持续升高,12h达峰值后开始下降,96h恢复正常水平;大鼠给予625mg·kg-1对乙酰氨基酚给药后6h,血浆miR-122升高5.2倍,12h达峰值后开始下降,36h恢复正常水平。肝损伤大鼠血浆miR-122不同时间点的表达水平与肝损伤GPT和GOT变化相似。结论循环miR-122可能成为药物性肝损伤临床前和临床早期检测的理想的血液学分子标志物。

庆大霉素致大鼠急性肾损伤的尿液生物标志物

目的探讨大鼠急性肾损伤后尿液新生物标志物时间和剂量依懒性,以寻找敏感和特异的新生物标志物。方法 SD大鼠分别im给予硫酸庆大霉素注射液0,5,20和80 mg·kg-1,每天1次,按照给药次数又分为给药1,3,7,14 d和给药14 d恢复期28 d亚组,共计20组,给药后24 h,取血检测尿素氮(BUN)和肌酐(CRE),取尿用干化学法检测尿蛋白,用酶联免疫法(ELISA)检测肾损伤分子-1(KIM-1)、用电化学发光免疫法检测β2微球蛋白(β2-MG);HE染色观察肾组织病理改变。结果尿蛋白结果显示,给予庆大霉素80 mg·kg-17和14 d,个别雌性大鼠可见尿蛋白明显阳性(3+),恢复期末有明显恢复趋势。给药80 mg·kg-17 d组雌性大鼠BUN和CRE明显升高(P<0.05),雄性大鼠CRE升高(P<0.05),BUN有升高趋势;给药80 mg·kg-114 d组雌雄大鼠BUN和CRE均明显升高(P<0.05),20 mg·kg-1组雌性大鼠CRE升高(P<0.05),恢复期末,雌雄大鼠BUN和CRE恢复正常。肾组织病理学结果显示,给药20和80 mg·kg-13 d组肾见局灶性肾小管扩张,给药20 mg·kg-17和14 d组肾见炎细胞浸润和局灶性肾小管扩张,给药80 mg·kg-17和14 d组肾见局灶性肾小管上皮细胞变性坏死、炎细胞浸润、局灶性管型(轻度),给药80 mg·kg-1恢复期28 d组肾见嗜碱性小管、肾小管管型。给药20和80 mg·kg-13,7和14 d组雌雄大鼠KIM-1明显升高(P<0.05),给药80 mg·kg-1恢复期28 d组雌雄大鼠和给药20 mg·kg-1的雄性大鼠KIM-1明显升高(P<0.05),但有恢复趋势;给药80 mg·kg-13 d组雌雄大鼠β2-MG明显升高(P<0.05),给药20和80 mg·kg-17和14 d组雌雄大鼠β2-MG明显升高(P<0.05或P<0.01),给药80 mg·kg-1雌雄大鼠和给药20 mg·kg-1的雌性大鼠恢复期28 d组β2-MG明显升高(P<0.05),但也有恢复趋势。结论与传统的各项检测指标相比,KIM-1和β2-MG在庆大霉素诱导的急性肾损伤模型中具有较好的敏感性和特异性。

盐酸异丙肾上腺素致急性心肌损伤大鼠血清心肌钙蛋白Ⅰ动力学变化特点

目的研究大鼠静脉注射不同剂量盐酸异丙肾上腺素后血清心肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）的动力学变化及诊断时间窗,为临床前cTnⅠ的应用提供理论依据。方法 SD大鼠单次静脉注射盐酸异丙肾上腺素0.625、1.250和2.500 mg/kg,并于给药前和给药后1、4、8、24、48和72 h分别采血,测定血清AST、LDH和CK活性及血清cTnⅠ浓度。结果各给药组大鼠给药后1 h平均血清cTnⅠ即出现显著升高,且4 h达到峰值。0.625、1.250和2.500 mg/kg剂量组大鼠血清cTnⅠ分别是对照组的272.7、523.5和1 242.0倍,呈明显的剂量依赖性;给药后48-72 h血清cTnⅠ值与对照组接近。各组给予盐酸异丙肾上腺素后4 h血清AST显著升高,且达到最大值,分别是对照组的1.3、1.6和2.1倍;给药后24-72 h,各组血清AST值均与对照组接近。给药后1-72 h血清LDH和CK未见明显改变。结论急性心肌损伤动物血清cTnⅠ升高时间早于传统心肌酶学标志物,且升高幅度较大,用于临床前药源性心肌损伤的诊断时间窗宽（1-24 h）。cTnⅠ在临床前药源性心脏毒性诊断中是较为理想的生物标志物。