基于科研思维培养的细胞生物学实验教学改革

细胞生物学实验是生命科学、医学相关专业的重要实验课程。当前,课程存在内容陈旧、教学模式单一等问题,不利于学生批判精神和创新思维的培养。我们以培养学生科研思维为导向,从实验设计、教学过程、课程思政等方面进行教学改革,帮助学生掌握分析问题、设计实验、归纳总结的科研方法,树立团队协作、务实诚信的科研精神。

蝎毒注射液对AD模型大鼠空间认知障碍改善作用及对海马IGF-1/PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨蝎毒注射液(SVI)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠的空间认知能力和海马组织中胰岛素样生长因子(IGF)-1/磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路表达的影响,为探索SVI治疗AD作用机制提供依据。方法以双侧海马注射β-淀粉样蛋白(Aβ)25~35制备AD模型大鼠,分为假手术对照组、AD模型组、SVI低、中、高剂量组,每组12只。SVI低、中、高剂量组于AD造模后给予1次/d腹腔注射SVI(5、10、20μg/kg),1次/d,连续10 d。治疗结束后用Morris水迷宫测试各组空间认知功能,选取SVI中剂量组作为SVI干预组,取各组海马组织,免疫组织化学法检测IGF-1含量,逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)法检测IGF-1、PI3K和Akt的mRNA表达,Western印迹检测PI3K、Akt、p-Akt(Ser473)蛋白表达情况。结果与假手术对照组相比,AD模型组空间认知功能受损,逃避潜伏期延长,平台穿越次数和目标象限停留时间显著减少(P<0.01)。与AD模型组相比,SVI低、中、高剂量组逃避潜伏期显著缩短,平台穿越次数和目标象限停留时间显著增加,认知功能得到明显改善(P<0.01)。与假手术组相比,AD模型组海马中IGF-1、PI3K、Akt mRNA和PI3K、Akt、p-Akt(ser473)蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与AD模型组相比,SVI干预组mRNA水平及PI3K、p-Akt(ser473)、p-Akt/Akt蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论SVI能够改善AD模型大鼠的空间学习记忆障碍,可能与促进海马组织中IGF1表达、激活PI3K/Akt信号通路有关。

酵母双杂交及其衍生系统

酵母双杂交系统是一种研究蛋白质相互作用的分子生物学方法,过去20多年里,大量衍生系统的出现使得这套双杂交技术体系更加完善和高效,成为研究蛋白质-配体相互作用的重要技术手段,广泛应用于功能基因组学、蛋白质组学、病理学等研究领域。对酵母双杂交及其衍生系统的基本原理和应用进展进行综述。

SPOC线上线下混合式教学法在“分子生物学”中的应用

以“分子生物学”课程为对象开展了线上线下混合式教学的探索和实践。根据“分子生物学”课程内容和培养目标的要求,设计和分配线上线下教学内容。借助中国大学MOOC平台,整合多种网上学习资源,开设了专属的小规模限制性在线课程。根据学生线上自学的学情反馈,重新制定线下课堂的授课和答疑重点,辅以学生授课、现场答题等课堂任务激发学生学习的主动性,取得了良好的教学效果。SPOC混合式教学改善了“分子生物学”教学中出现的课时少、学生学习不积极等问题,有利于提升教学质量。

浅谈本科分子生物学实验教学改革

针对传统分子生物学实验教学存在的缺点,在实验内容设置、教学安排模式、考核评价体系等方面进行教学改革,建立以构建目标蛋白质的基因工程菌为主线的一套综合性分子生物学实验教学体系,实验项目系统化、课时安排连贯化,以期充分调动起学生的积极性,训练学生的综合技能,培养学生分析解决科学问题的科研精神。

基于Camtasia Studio的交互式微课制作方法——以分子生物学实验为例

在当前信息化教学全面展开的大环境下,以讲授单个知识点或技能为目标的微课短视频因其短小精悍、主题突出、编排灵活的特点,被广泛应用于课堂教学和在线学习中。为了帮助学生更好地掌握分子生物学实验操作技能,满足学生使用智能手机、平板电脑随时点播学习的需求,作者所在课题组利用录屏和视频编辑软件Camtasia studio将“分子生物学实验”的主要知识点制作成简短的微课视频,其制作方法主要涉及PPT课件的设计与制作、实验操作视频的拍摄、PPT讲解的录屏、视频后期编辑等操作。

植物维生素E生物合成及代谢工程研究进展

维生素E是人体必需的营养物质,在生物体中具有重要的代谢作用和抗氧化功能。绿色植物是人类和动物维生素E的主要来源。综述了近年来植物维生素E的生物合成途径,参与维生素E生物合成的牻牛儿基牻牛儿基二磷酸还原酶、对羟苯基丙酮酸双加氧酶、尿黑酸植基转移酶、2-甲基-6-植基苯醌甲基转移酶、生育酚环化酶、γ-生育酚甲基转移酶、植醇激酶等相关酶基因克隆及代谢调控的研究进展,并对未来研究方向进行了展望。

蝎毒多肽的抗肿瘤作用机制

蝎毒的主要生理活性组分是其内含的多种生物活性多肽,一般长度为20~80氨基酸,分子内含2~4个二硫键,理化性质稳定并能发挥多种药理作用。蝎毒多肽是离子通道抑制剂,而离子通道在癌细胞中失调和过表达,在肿瘤的发展和侵袭中起重要作用。因此,蝎毒多肽具有明显的抗肿瘤效用,其作用机制主要有诱导癌细胞凋亡,抑制癌细胞增殖、侵袭、转移和血管生成,以及调节免疫细胞活性。

NO与2型糖尿病内皮祖细胞功能异常的关系

2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM）是由行为、环境和遗传等多因素引起的一组以高血糖为临床标志的代谢综合征,患者常并发有血管闭塞性疾病,如冠状动脉粥样硬化、脑血管疾病、周围血管疾病及血管内皮功能受损。越来越多的证据显示,

健康教育对支气管哮喘患者的疗效影响

目的探讨健康教育对支气管哮喘的疗效的影响。方法选择住院支气管哮喘患者100例,随机分为观察组50例和对照组50例,观察组住院期间在常规治疗及护理基础上给予健康教育。对照组只给予常规的治疗和护理。结果观察组住院期间及出院后半年内的发作次数,平均住院天数与对照组比较均明显减少。呼气流量峰值与对照组比较明显增加,两组比较具有统计学差异(P<0.05)。结论健康教育能够提高哮喘患者的治疗效果,减少哮喘的发作次数及住院天数,改善了肺功能,提高了患者的自我管理能力和生活质量。

思维导图在高职院校人体解剖学与组织胚胎学教学中的应用

思维导图是一种可视化的组织性思维工具,能通过层次分明的逻辑关系展示出教学内容的结构体系,应用于人体解剖学与组织胚胎学教学中能优化教学设计,帮助学生更清晰地理解知识框架,增强学生的自主学习能力,达到提升教学质量的目的。

高职人体解剖学“心脏”教学设计

本文对高职临床医学专业人体解剖学与组织胚胎学教学中“心脏”这部分内容进行教学设计。在分析教材和学情的基础上,设计以学生为中心的教学实施方案,充分发挥教师引领作用,从课前预习、课堂参与、课后作业等多个环节培养学生的学习自主性。教学过程中综合运用多种信息化教学手段,有效活跃了课堂气氛,提高了课堂质量,达成了教学目标。

中医药治疗改善高血压动脉功能的研究现状与思考

高血压是临床常见病、多发病。高血压病人的靶器官损伤与血管功能状态密切相关。中医药治疗高血压病有其优势,能有效抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统活性,调节自主神经功能,改善血管弹性,改善内皮功能失调状态及抗血管重塑,以改善高血压的动脉功能,减少靶器官损害。本研究就近10年有关中医药治疗改善高血压动脉功能的研究现状作一综述。

用户视角的短视频内容分发平台算法推荐智能化评价

以抖音、快手、美拍、微视、西瓜视频5个短视频内容分发平台为研究对象,应用关键事件法、德尔菲法及结构方程模型分析发现,准确性、多样性、新颖性、惊喜性是用户视角下反映短视频平台算法推荐智能化效力的四大表征。从算法技术赋能用户使用体验感知的角度而言,目前,各短视频平台在多样性上呈现出最佳的算法技术赋能效果,惊喜性是各平台凭借算法优势收获用户认同的现实短板。更为垂直化的短视频平台借助算法优势,更容易在用户使用体验感知中取得竞争优势。算法技术素养高的用户对短视频平台算法推荐智能化的感知要求更加严苛,男性与低龄人群在四个维度上的评价均显著低于女性和高龄人群。低消费人群对准确性、新颖性和惊喜性的评价显著低于高消费人群,说明用户的消费水平与短视频平台算法推荐智能化感知之间具有群体差异和正向的影响逻辑。算法推荐智能化评价的人口统计特征差异,反映出不同类型短视频平台经由算法赋能后的用户体验感知群像特征。

豆类活性肽PA1b在大肠杆菌中的多拷贝串联表达

为构建能表达串联豆类活性肽PA1b(peaalbumin 1 subunitb)基因的重组大肠杆菌,并进行诱导表达和产物纯化。通过合成PA1b基因,采用同尾酶技术构建1~4拷贝数的串联PA1b基因,分别克隆至pET32a(+)原核表达载体上,转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,亲和层析纯化融合蛋白,肠激酶切除融合标签和切开串联体,获得单体PA1b肽。结果显示,大肠杆菌转化子中的重组质粒pET32a(+)-nPA1b(n=1~4)经PCR及测序验证正确,经1mmol/LIPTG25℃诱导8h,均能以包涵体形式表达出重组融合蛋白。SDS-PAGE分析结果表明,串联拷贝数越多,融合蛋白中PA1b含量越高。Ni-NTA亲和纯化得到高纯度的4拷贝串联PA1b融合蛋白,经肠激酶充分酶切、超滤浓缩后获得重组PA1b多肽。获得了表达1~4拷贝串联PA1b基因的重组大肠杆菌,并通过酶解4拷贝PA1b融合蛋白制备了重组PA1b,为多拷贝法制备PA1b肽奠定基础。

豆类活性肽PA1b研究进展

从豆科植物种子中提取的37个氨基酸残基的PA1b是一种富含半胱氨酸的结构紧凑的小分子多肽,理化性质稳定,对多种提取试剂和蛋白酶不敏感,能杀伤象鼻虫、蚜虫、蚊虫等害虫,具有开发成新型生物杀虫剂的巨大潜力。此外PA1b还是一种激素类蛋白,具有调节植物细胞生长分化和哺乳动物糖代谢等功能。综述了PA1b的结构、生物多样性、作用机制及异源表达等方面的研究进展,并展望了发展前景。

蛋白酶水解脱脂乳培养基的优化

为减少进口发酵剂的使用,降低国内乳制品的生产成本,国内需要自主研发发酵剂,水解脱脂乳培养基的优化是发酵剂制备过程中的一个重要环节。为制备有利于乳酸菌生长的水解脱脂乳培养基,本研究首先以发酵乳杆菌V9为试验菌种,筛选出水解脱脂乳最适的蛋白酶,再通过单因素与正交实验对制备脱脂乳水解液的温度、时间、pH值、加酶量进行优化。结果表明,最适水解条件为:在p H为8.5的12%脱脂乳中按25 U/mL接入碱性蛋白酶,55℃水解1 h,以此水解脱脂乳为培养基培养乳酸菌活菌数达到2.5×10^9CFU/mL,较脱脂乳培养基中的活菌数提高了1.74倍。利用此优化培养基培养鼠李糖乳杆菌grx19和植物乳杆菌S7,得到的活菌数分别较脱脂乳培养基提高了1.50和1.62倍。

低场核磁共振法测定猪肉中脂肪含量

为避免索氏抽提法使用有机溶剂带来的环境污染与危害,提高猪肉中脂肪含量的检测效率,采用低场核磁共振技术研究测定猪肉中脂肪含量。首先优化回波时间、重复扫描次数等信号采集参数和样品质量、烘干时间、检测温度等样品相关参数,然后对方法重复性和精密度进行考察验证。结果表明,4 g肉糜烘干6 h,在检测温度50℃、回波时间0.3 ms、重复扫描次数64次条件下,以纯猪油为标准样品,检测结果良好,标准曲线R2达到0.999 9,重复性相对标准偏差为1.69%~2.72%,日内、日间精密度分别为3.07%、2.57%。该低场核磁法与GB 5009.6—2016《食品中脂肪的测定》中索氏抽提法之间相关系数高达0.999 5。因此,该方法可用于猪肉中脂肪含量的准确定量,同时可为其他畜禽肉脂肪含量的测定提供参考。

嗜热链球菌grx90冻干保护剂的制备

嗜热链球菌grx90是由实验室分离、筛选和保存的专利菌株,其具有重要的益生特性。为提升嗜热链球菌grx90在冷冻干燥过程中细胞存活率,本研究对冻干过程中的离心条件以及冻干保护剂配方进行优化。结果表明,通过单因素实验将离心条件优化为转速8000 r/min离心时间8 min。盐类、氨基酸类、醇类以及糖类保护剂的最佳添加物分别为乙酸钠、L-半胱氨酸后、山梨醇、乳糖后。进一步通过正交实验将保护剂的配方优化为:12%脱脂乳中添加0.1%乙酸钠、0.3%L-半胱氨酸、2%山梨醇、5%乳糖,菌液与保护剂1:2混合装液高度7 mm,预冻12 h后对嗜热链球菌grx90具有显著保护作用,细胞存活率为94.13%。

贮藏温度对真空冻干发酵剂发酵乳杆菌grx07活性的影响

以真空冻干的发酵剂grx07为研究对象,通过测定该发酵剂在20、4、-20℃三种温度下贮藏的存活率、活菌数、水分活度、发酵活力及影响乳酸菌代谢活力的关键酶活(乳酸脱氢酶、β-半乳糖苷酶、ATP酶的酶活),来探讨不同的贮藏温度对发酵乳杆菌grx07菌粉活力的影响。结果表明,发酵剂grx07在20℃贮藏3个月时存活率低于1%;在4和-20℃保藏12个月时菌粉存活率分别为4.45%和51.05%。在-20℃贮藏12个月的活菌数仍能达到3.78×10^11 cfu/g,菌粉水分活度为0.210;活化后发酵pH达到4.30,乳酸脱氢酶、β-半乳糖苷酶、ATP酶的活力分别为贮藏前酶活力的80.24%、74.60%、87.10%。因此,真空冻干发酵剂grx07长期贮藏的适宜温度为-20℃。