贵州茯茶散茶发花条件优化及微生物多样性分析

贵州是我国茶树品种资源最丰富的省份之一,茶园面积大,但经济产值低,夏秋茶浪费严重,品种结构单一。该研究以贵州省安顺市黑毛茶为供试原材料,人工接种茯砖茶“金花”发酵剂,优化散茯茶发花工艺条件,并开展了理化指标变化及真菌多样性研究。通过单因素试验及正交优化试验分析不同因素对黑毛茶散茶发花的影响。结果表明,其最佳发花条件为:含水量30%、温度24℃、发酵时间9 d及接种量1:100(m/m)。在此发花条件下,成品散茯茶冠突曲霉孢子数为3×10^(8)CFU/mL,水分、总灰分、茶多酚、游离氨基酸、水浸出物含量分别为3.0%、6.8%、12.0%、2.4%、42.6%。经过上述优化后,茶汤色明亮,金花茂盛,香气纯正,滋味醇和。通过高通量测序技术分析不同发酵时间下散茯茶的真菌多样性。结果表明,发酵3 d后,曲霉属(Aspergillus)相对丰度达到98.8%。该研究优化了贵州散茶发花的工艺条件,对提高茯砖茶品质具有重要意义,为其他茶叶散茶发花工艺提供参考。

云南独蒜兰原球茎诱导与增殖的研究

为组织培养快速繁殖云南独蒜兰,对其进行了种子无菌萌发的基本培养基、添加物与激素以及原球茎增殖激素配比的优化筛选。结果表明:在KC、1/2MS、B5这3种基本培养基中,B5较适于种子萌发;添加蛋白胨5 g/L、马铃薯泥50 g/L或活性炭粉1 g/L均有利于种子萌发形成原球茎;生长激素NAA、2,4-D对种子无菌萌发具有促进作用,而细胞分裂素6-BA则抑制了种子萌发。在以B5附加AC(活性炭)1 g/L的基础培养基中,激素组合6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L更有利于原球茎的增殖与生长。

杜鹃兰菌根结构显微观察初报

对杜鹃兰根的显微结构进行了观察,结果表明,杜鹃兰根具有典型的兰科植物菌根结构,皮层中有大量菌根真菌形成的菌丝球。菌丝球主要分布在根的基部和中部,菌丝球平均数为93个,根尖分布较少,菌丝球平均数为40个。

COR基因在植物抗寒基因工程中的作用

COR是植物冷调节基因,编码亲水性的多肽,通过形成α-螺旋的二级结构对产生脱水的细胞脂膜起到稳定作用从而使植物获得抗寒性。导入COR的转基因植物能得到抗寒性改良,其表达受到上游复杂的基因网络的调控。对COR基因与编码产物的结构特征及抗寒机理、抗寒基因工程、表达的调节、启动子具有潜在的应用价值等方面进行了综述,展望了该基因的研究意义。

马铃薯X病毒外壳蛋白基因片段的瞬时表达诱导对PVX的高抗性(英文)

为获得抗马铃薯X病毒(PVX)的植株,从疑似感染马铃薯X病毒的马铃薯叶片中提取出PVXcp cDNA,将其保守片段插入到RNAi质粒pHellsgate12中以构建编码发夹结构RNA的载体,通过Agroinfiltration的方法在本氏烟植株中瞬时表达。结果表明:病毒侵染10d后,15株引入该载体的本氏烟植株对PVX均具有抗性,此载体可用于产生对马铃薯X病毒具有高抗性的转基因植物。

马铃薯X病毒外壳蛋白基因的克隆与系统进化分析

从贵州威宁等地采集马铃薯病叶样本,采用试管捕捉反转录PCR(tube-capture-RT-PCR,TC-RT-PCR)的方法克隆出714 bp的PVX CP基因,编码237个氨基酸残基。系统进化分析表明,PVX CP基因可分为两大类群,推测分离物属于X3株系,并建议重型花叶也可作为PVX病叶样本。

适于植物愈伤组织DNA提取的改良CTAB法

本文介绍了一种提取植物愈伤组织DNA的改良CTAB方法。这种方法根据植物愈伤组织的特点,通过在提取液中加入PVP、将提取液加入样品中研磨、以氯仿/异戊醇代替酚/氯仿/异戊醇等措施获得质量较高的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增可检测到清晰的目的片段,说明提取的DNA可以用于一般的分子生物学实验。

白芨属种质资源的SRAP标记分析

为验证相关序列扩增多态性(SRAP)技术研究中药资源多样性的可行性,并对白芨属的育种研究工作提供分子理论依据,采用SRAP技术对兰科植物白芨属(Bletilla Rchb.f.)种类的17份材料进行了遗传多样性分析。结果表明:从72个引物组合中筛选出18个多态性好的引物组合,经扩增共产生417个多态性条带;UPGMA聚类分析表明,17份材料可以分为3大类,供试材料间的遗传距离变幅为0.288 1～1.095 6,平均值为0.610 9。

马铃薯品种茎段愈伤组织诱导和植株再生的研究

以2个马铃薯品种夏坡蒂和费乌瑞它茎段为外植体,研究了不同植物激素对马铃薯愈伤组织诱导及其不定芽分化的影响。结果表明,夏坡蒂和费乌瑞它的茎段最佳愈伤诱导组织培养基分别为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA30.5 mg/L和MS+ZT 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.5 mg/L,愈伤率均可达到100%;夏坡蒂和费乌瑞它的不定芽最佳诱导培养基分别为MS+ZT 2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L+GA35 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+ZT 2.0 mg/L+GA35 mg/L,诱导率分别为52.38%和53.6%。结果为进一步转基因工作中高效植株的再生奠定了一定的基础。

分子标记技术在玉米遗传育种上的应用

对RFLP、RAPD、SSR和AFLP分子标记的原理、特点,及其在玉米遗传多样性分析、杂种优势群划分、遗传图谱的构建以及分子标记辅助育种等方面的应用进行了综述,并对分子标记技术在玉米遗传育种中应用前景进行了探讨。

美花石斛组培苗促生内生真菌分离及筛选

本实验共分离获得198株内生真菌,其中57株分离自根,126株分离自茎,15株分离自叶。筛选出显著促进美花石斛组培苗生长的共生真菌8株,其中优势菌株为丝核菌;结果表明:促生真菌主要是提高了美花石斛组培苗根的成活率和幼芽的形成率,这对促进组培苗的成活和生长起着至关重要的作用。

竹生真菌及竹黄生物学研究进展(英文)

为对竹黄及其他重要竹生真菌的研究工作提供参考和思路,介绍了竹生真菌的生活类型、分布情况、寄主专一性、组织特异性,并从分类、形态特征、寄主植物、生态及人工培养等方面介绍了竹黄,最后对竹黄今后的研究方向进行了展望。

根癌农杆菌介导转化马铃薯研究

农杆菌介导的遗传转化应用广泛,一直受到人们的关注。马铃薯是重要的粮食作物,农杆菌介导的马铃薯遗传转化也取得了重大成就。本文就马铃薯遗传转化过程中的影响因素作一小结,并对进一步的研究作出展望。

大西洋和费乌瑞它马铃薯品种的核型分析

为了探索大西洋和费乌瑞它马铃薯品种的细胞遗传学特征,采用去壁低渗法对两品种的核型进行分析。结果表明:1)大西洋和费乌瑞它马铃薯品种都属四倍体,2n=48。2)大西洋的臂比值为(1.00±0.11)～(1.89±0.23),染色体相对长度为(5.07±0.79)%～(13.80±1.56)%,最长染色体/最短染色体=2.32,属于1B核型,核型公式为2n=4x=48=7m+2sm+2M+st;费乌瑞它的臂比值为(1.43±0.17)～(2.12±0.56),染色体相对长度为(6.04±0.54)%～(12.90±0.79)%,最长染色体/最短染色体=2.13,属于2B核型,核型公式为2n=4x=6m+5sm+t。

中国种子植物内生真菌资源及菌植协同进化

综述了中国种子植物内生真菌资源研究概况,比较了裸子植物和被子植物内生真菌种类,它们都具有肉座菌目(Hypocreales),粪壳菌目(Sordariales),散囊菌目(Eurotiales),毛霉目(Mucorales)及不产孢类(Myceliasterilia)内生真菌。裸子植物内生真菌涉及52个属,既包括高等的子囊菌和担子菌,也包括低等的卵菌(Oomycetes)和接合菌(Zygomycetes)类。被子植物涉及60个属,主要为高等的子囊菌(Ascomycetes)和担子菌(Basidiomycetes),低等的卵菌和接合菌报道很少。双子叶植物涉及40个属,单子叶植物内生真菌涉及30个属,两类被子植物所报道的内生真菌只有11个属相同。裸子植物与双子叶植物内生真菌相似程度较高,都具有炭角菌目(Xylariales)、格孢腔菌目(Pleosporales)、柔膜菌目(Helotiales)和白粉菌目(Erysiphales),刺盘孢菌属(Colletotrichum)、拟茎点霉属(Phomopsis)、枝孢霉属(Cladosporium)、地霉属(Geotrichum)等内真菌,共20个属相同。各类种子植物具有自己独特的一些内生真菌。还对植物与其内生真菌的协同进化关系进行了分析。

利用SSR标记分析12份优良玉米自交系的遗传多样性

为了对建立贵州优良玉米种质资源的指纹图谱以及玉米自交系的合理利用提供理论基础和依据,利用SSR标记研究了12份优良玉米自交系的遗传多样性。结果表明,从120对引物中筛选出52对多态性丰富的SSR引物,在供试材料中检测出201个等位基因变异,每对引物检测等位基因2~11个,平均3.87个。SSR引物的多态性信息量（PIC）介于0.12~0.78,平均多态性信息量为0.45。UPGMA聚类分析表明,12份供试材料在遗传距离0.60处分为4类,该结果与种质系谱的分类结果基本一致。

结球白菜COR基因克隆及序列分析

为了解结球白菜(Brassica campestris ssp.pekinensis)COR基因结构特征,设计1对保守简并引物,利用RT-PCR和普通PCR方法扩增COR基因。结果表明:获得冷诱导结球白菜COR基因的编码区cDNA。该基因命名为BpCOR,预测编码1个由142个氨基酸组成的理论分子量为14.82kD的蛋白。BpCOR蛋白与十字花科其他植物COR蛋白高度同源,具有很高的亲水性,且预测能形成α-螺旋-环-螺旋的超二级结构。

白芨属SRAP引物筛选及反应体系优化

为给白芨种质遗传多样性评价、分子标记辅助育种和遗传改良研究提供基础,建立适于白芨SRAP-PCR扩增的反应体系,利用L16(45)正交试验设计对白芨SRAP-PCR反应体系中的各影响因子进行探索。结果表明:Mg2+浓度为影响白芨SRAP-PCR反应的关键因素;在优化的20μL SRAP-PCR反应体系中各组分的最适含量为10×Buffer 2.0μL,Mg2+2.5mmo1/L,dNTPs 0.5mmol/L,引物0.2μmol/L,Taq酶1.0U,模板DNA 2.0ng/μL。利用SRAP反应体系,从72对SRAP引物组合中筛选出条带清晰、扩增稳定、多态性好的引物15对。

分子检测技术在转基因植物中的研究概况

对转基因植株常用分子检测技术的原理及其应用作了简要概述。

贵州21份玉米优质种质资源的SSR标记分析(英文)

为建立优质玉米种质资源的指纹图谱,给贵州玉米优良杂交组合的选配提供分子水平上的依据和基础,利用微卫星分子标记（SSR）技术对21份贵州玉米优质种质资源进行了遗传多样性分析。结果显示，共筛选出多态性丰富的20对 SSR 引物,在供试材料中检测出97位基因变异,每对引物检测到等位基因2-11个，平均4.85个。 SSR引物的多态性信息量（PIC）介于0.19-0.78，平均为0.53。UPGMA聚类分析表明，供试材料间遗传距离变幅为0.22-0.63，平均为0.43。