中国传统发酵乳中嗜热链球菌H2的培养及益生特性评价

为促进国产乳品发酵剂自主研发,从内蒙传统发酵乳中分离鉴定一株嗜热链球菌菌株H2(Streptococcus thermophilus),通过响应面法优化培养基组成,采用体外分析法对菌株H2进行益生特性评价。结果表明,培养基氮源为45.25 g/L酵母提取物、生长因子为169.5 mg/L半胱氨酸、缓冲体系补充物为0.705 g/L碳酸钙且培养条件控制为温度40℃、初始pH值5.5、接种量3.5%时,培养液中活菌数达4.20×10^9 CFU/mL,是优化前的37.8倍。体外益生特性评价实验证明,H2在pH=3时存活率为49.65%,胆盐质量分数为0.3%时存活率可达99.62%。H2的发酵上清液经高效液相色谱(HPLC)法检测,分别检测到L-乳酸、甲酸、乙酸、丙酸、异丁酸、异戊酸等多种发酵代谢产物,其中L-乳酸浓度达到最大,为12.64 mmol/L,且未检到D-乳酸。H2的发酵上清液对3种自由基均有清除作用,其中对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)的清除率最高,为94.06%。

蛋清溶菌酶的提取及其酶学性质探究

采用阳离子交换法-超滤法协同分离提取蛋清中溶菌酶,首先通过单因素试验和Box-Behnken试验,优化蛋清中溶菌酶的提取工艺,然后对其酶学性质进行探究。结果表明:在树脂用量为蛋清滤液的24.2%,NaCl浓度1.00 mol/L,蛋清滤液pH 9.10,洗脱时间62.61 min时,溶菌酶经超滤离心后测得纯度为96.36%,比活力为23 718.61 U/mg。对所得溶菌酶酶学性质的研究表明:溶菌酶最适pH 7.0,在pH 4.0~7.0范围内稳定性较好,最适反应温度60℃,低温下热稳定性良好,在较高温度下酶活下降较快。Na^(+)和Ca^(2+)对酶有较强激活作用,K^(+)有一定激活作用,Mg^(2+)和Mn^(2+)对酶活影响不大,而Zn^(2+)对酶有明显抑制作用。甘油、Tween20、Tween40、Tween80等表面活性剂均对溶菌酶有抑制作用,其中甘油抑制效果最强。本研究结果对溶菌酶的工业化提纯和生产具有重要的意义。