人白细胞介素-31的真核表达及其对HaCaT细胞IL-6和TNFα表达的影响

目的构建人白细胞介素-31(hIL-31)基因真核表达载体并将其转染到HaCaT细胞,观察其对HaCaT细胞炎症因子分泌的影响。方法分离人外周血单核细胞,加入终浓度为20 nmol/L的豆蔻佛波醇乙酯(PMA),继续培养24 h收集细胞。RT-PCR克隆hIL-31 cDNA,并将其克隆到真核表达载体pSecTag2/Hygro B上。将构建成功的重组体转染至HaCaT细胞,用Western blot分析hIL-31在细胞中的表达以及RT-PCR方法分析其对IL-6、TNFα表达的影响。结果经双酶切、测序及Blast分析鉴定,我们成功获得hIL-31基因cDNA全长序列和pSecTag2/HygroB-IL-31重组体。转染至HaCaT细胞的外源性hIL-31可以促进IL-6、TNFα的表达。结论 hIL-31可以通过自分泌的方式促进HaCaT细胞炎性相关细胞因子的表达。

城乡养老保险制度衔接文献综述——兼评《城乡养老保险制度衔接暂行办法(征求意见稿)》

随着城乡一体化的步伐加快,养老保险城乡制度衔接任务也颇为紧迫。本文通过介绍城乡养老保险制度衔接的重要性,必要性与可行性,以及解读城乡养老保险制度衔接的暂行办法,最后找出《办法》中的漏洞并加以简要分析,最终提出宏观解决措施。

CRNDE过表达促进人肝癌细胞系HepG2增殖和迁移

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)结直肠差异性表达基因(CRNDE)对HepG2细胞增殖和迁移能力的影响及作用机制。方法构建CRNDE过表达质粒,进行慢病毒包装后感染HepG2细胞。实验分别设置阴性对照组(LV5/NC)和CRNDE过表达组(LV5/CRNDE)。应用2.5μg/mL嘌呤霉素干预4~5周,筛选出CRNDE过表达HepG2细胞系;CCK8和细胞划痕实验检测细胞的增殖及迁移能力变化;real-time PCR和Western blot检测两组细胞E-cadherin、N-cadherin、Bax和Bcl-2 mRNA及蛋白表达变化。结果与LV5/NC组相比,LV5/CRNDE组CRNDE表达显著升高(P<0.01),且LV5/CRNDE组细胞的增殖和迁移能力均显著提高(P<0.01);同时,LV5/CRNDE组细胞E-cadherin和Bax表达均明显降低(P<0.01),而N-cadherin和Bcl-2表达则明显升高(P<0.01)。结论CRNDE可通过促进N-cadherin和Bcl-2表达,抑制E-cadherin和Bax表达,进而增强HepG2细胞的增殖和迁移能力。

IL-31对人支气管上皮16HBE细胞VEGF、EGF及EGFR表达的影响及作用机制

目的探讨IL-31对16HBE细胞VEGF、EGF和EGFR表达的影响及作用机制。方法 IL-31单独及分别联合P38 MAPK信号阻断剂SB203580或JNK信号阻断剂SP600125处理16HBE细胞,分别用real-time PCR和Western blot检测VEGF、EGF和EGFR mRNA及蛋白表达水平;采取Western blot分别检测P38 MAPK和JNK的磷酸化表达水平。结果与对照组相比,IL-31显著上调VEGF、EGF和EGFR mRNA和蛋白的表达(P<0.01),并且能显著上调P38 MAPK和JNK的磷酸化表达(P<0.01)。与IL-31组相比,IL-31+SB203580或SB203580组p-P38 MAPK的表达水平均明显下降(P<0.01),而IL-31+SP600125或SP600125组p-JNK的表达水平均明显下降(P<0.01)。与IL-31组相比,IL-31联合SB203580或SP600125组VEGF的表达均明显下降(P<0.01),而EGF和EGFR的表达在IL-31联合SB203580组显著下降(P<0.01)。结论 IL-31可通过激活P38 MAPK及JNK信号通路而诱导VEGF表达;而IL-31诱导的EGF和EGFR表达则主要通过P38 MAPK信号通路介导。

综合性实验在医学分子生物学实验教学中的探讨

综合性实验以其连贯性和系统性强、信息量集中,学生的自主性和创造性能够在实验过程中得到充分发挥等优势,受到了越来越多的重视。综合性实验在医学分子生物学实验教学中具有重要的作用,具有"科研小课题"之称。因此,探索综合性实验的教学模式,改革分子生物学实验教学的方式,对于大大提高医学分子生物学实验教学的成效,提高医学生的科研能力具有举足轻重的作用。该文主要针对综合性实验在医学分子生物学实验教学中的模式进行探讨。

抗抑郁药物治疗功能性消化不良的比较研究

目的探讨单独应用抗抑郁药物治疗功能性消化不良的方法及效果，为临床治疗提供参考。方法我院收治的80例功能性消化不良患者随机分为两组各40例。对照组行内科常规治疗；实验组单独应用抗抑郁药物治疗。治疗后随访1～3个月，并同时采用状态一特质焦虑问卷（STAD、抑郁状态量表（SDS）评分标准和焦虑自评量表（SAS）评分标准四项对患者治疗心理结果进行评估，并对患者日常生活活动能力（ADI）分级变化进行统计。结果随访期间两组内比较，治疗后患者的S-AI、T-AI、SDS和SAS四项心理评分变化均优于治疗前，差异有统计学意义（P〈0．05）；两组间比较，实验组患者的上述各项和ADI分级均优于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论早期对功能性消化不良患者单独应用抗抑郁药物治疗，是避免其产生焦虑、抑郁等不稳定心理的重要方法，能显著改善其生活质量。

大量血浆联合丹参治疗顽固性肝硬化腹水疗效观察

目的:观察大量血浆联合丹参注射液在顽固性肝硬化腹水中的治疗作用。方法:比较并进行临床随机分组对照研究。丹参联合大量血浆组与对照组在总胆红素、白蛋白、腹水减少等方面的差异。结果:丹参联合血浆组可以使总胆红素明显下降,白蛋白上升,腹水明显减少,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:丹参注射液联合大量血浆治疗顽固性肝硬化腹水明显优于对照组。

完善大学生创业教育体系的路径探索

创业教育在当前高等教育大众化的背景下是十分必要的。文章从树立明确的创业教育观念、多个学科互补、加强领导和规范管理、整合师资力量和营造创业氛围等方面阐述了完善大学生创业教育体系的路径。

浆膜型嗜酸粒细胞胃肠炎伴血清CA125明显升高1例报告

我院收治过1例嗜酸粒细胞性胃肠炎（eosinophilic gastroenteritis,EG）患者。这是一种极少见的疾病,Kaijiser在1937年首次报告了3例,近年来国内已有数十例报道。典型病人以胃肠道的嗜酸粒细胞浸润、胃肠道水肿增厚为特点。现报告如下。1病例报告患者,男,55岁。

超短波治疗仪辅助生长抑素在急性胰腺炎治疗中的效果

目的超短波治疗仪辅助生长抑素治疗急性胰腺炎(AP)的效果。方法回顾性分析2019年2月至2019年12月我院接收的78例AP患者临床资料,将采用常规疗法结合生长抑素治疗的39例患者资料纳入对照组,将采用超短波治疗仪辅助生长抑素治疗的39例患者资料纳入观察组,两组治疗14d。比较两组患者治疗14d的临床疗效及治疗前、治疗14d的炎症因子[血清白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、C-反应蛋白(CRP)]水平。结果治疗14d,观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗14d,两组患者IL-6、IL-10、CRP低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论超短波治疗仪辅助生长抑素可以有效提高AP患者的临床疗效,减轻患者的炎症反应。

金融危机背景下的中国体育旅游业:评析与展望

对金融危机背景下体育旅游业发展现状进行分析,发现存在的挑战和机遇,并通过分析已有体育旅游资源优势及后奥运体育旅游发展优势,提出振兴与恢复我国体育旅游的相关对策建议。

N-乙酰半胱氨酸抑制IL-18在血管平滑肌细胞中诱导TNF-α和IL-6表达

目的:研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对白细胞介素18(IL-18)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)表达的影响。方法:培养的VSMC细胞,加入或不加入NAC(5mmol/L)处理1h后,再以不同浓度的IL-18刺激不同时间,通过ELISA测定培养上清IL-6及TNF-α蛋白质水平,加入IL-18(100μg/L)6h后RT-PCR分析细胞中相应的mRNA水平。同时Westernblot分析NAC对IL-18激活的NF-κB的影响。结果:通过IL-18刺激的VSMC培养上清中的IL-6及TNF-α水平及细胞中的mRNA水平显著升高(P<0.01),且具有时间和剂量依赖关系(P<0.01)。NAC(5mmol/L)显著抑制IL-18诱导的IL-6及TNF-α的mRNA和蛋白质水平表达(P<0.01)。Westernblot分析显示NAC能够抑制IL-18对NF-κB的激活作用。结论:NAC体外可以抑制IL-18在SMC中诱导的IL-6及TNF-α表达。

白介素29体外抗乙肝病毒作用

目的研究白介素29(IL-29)体外抗乙肝病毒的效果。方法从RNA水平探讨了IL-29抗乙肝病毒的效果。RT-PCR分析IL-29诱导抗病毒蛋白MxA、2′,5-′OAS、PKR和RNase L mRNA水平表达;同时Western blot分析IL-29激活的信号通路以探讨其抗乙肝病毒的机理。结果IL-29能明显降低HepG2.2.15细胞中乙肝病毒mRNA的水平,且能够上调抗病毒蛋白MxA和2′,5-′OAS的mRNA表达并激活ERK1/2、AKT信号途径。结论在HepG2.2.15细胞中IL-29有显著的抗乙肝病毒作用。

IL-10抑制脂多糖诱导的Hela细胞IL-15和IL-6转录

目的研究IL-10对脂多糖(LPS)诱导的Hela细胞IL-15mRNA和IL-6 mRNA表达的影响,分析其激活的信号转导通路。方法培养的Hela细胞,经不同浓度的LPS及IL-10单独或联合处理后,提取细胞总RNA和总蛋白,RT-PCR分析IL-15和IL-6转录水平的变化,Westernblot分析信号转导通路蛋白变化。结果RT-PCR分析得知①1ng～10μgLPS刺激Hela细胞12h后,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA水平均明显上调(与对照组比较:P<0.01),且存在剂量依赖关系,100ng/mL时达峰值;100ng/mLLPS刺激Hela细胞0～24h,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA水平亦明显上调(与对照组比较:P<0.01),24h内存在时间依赖关系,12h时达峰值。②单独IL-10(10ng/mL)作用于Hela细胞12h后,IL-15 mRNA和IL-6 mRNA没有明显变化(与对照组比较:P>0.05)。不同浓度的IL-10(1,10,100ng/mL)均下调100ng/mLLPS诱导的Hela细胞IL-15 mRNA和IL-6 mRNA的表达,且浓度越高IL-10抑制作用越明显。Western blot分析显示LPS主要通过磷酸化信号蛋白PI3K/AKT和ERK1/2上调IL-15和IL-6转录,IL-10能阻断AKT的磷酸化而对ERK1/2的磷酸化没有影响。结论IL-10可抑制LPS诱导的炎症细胞因子IL-15和IL-6的转录,这可能与其阻断AKT的磷酸化有关,因而,IL-10可能应用于某些临床感染性疾病的预防和治疗。

曲妥珠单抗对不同pH培养HER2阳性乳腺癌细胞增殖的抑制及促凋亡作用

肿瘤细胞外酸性微环境是肿瘤形成和进展的关键环节，亦是导致肿瘤细胞对放疗和化疗药物不敏感的原因之一。乳腺癌除了手术和放疗外，化学药物治疗也是临床重要手段（根据细胞膜靶蛋白的表达特点制定相应的治疗措施）。但由于肿瘤细胞内外环境，尤其是酸性环境导致的分子功能的变异，使得药物治疗效果并不理想，复发率较高。因此，寻找药物治疗的适宜pH环境成为当务之急。

生物化学与分子生物学教学虚拟实验平台建设的思考

计算机支持的协作学习(CSCL)是近年来教育技术领域研究的热点之一,信息及多媒体技术深刻影响了高等医学教育,虚拟实验教学将很大程度地填补了传统实验教学的不足,对于深入理解生物化学与分子生物学实验的微观发生机制,扩展学生对该学科的深入了解,对多学科领域知识的融会贯通,更重要的是,对生物化学与分子生物学实验教学的发展起到重要的推动作用。

内镜下治疗消化道息肉及其护理体会

消化道息肉因其易发生出血及癌变，不同病理类型的息肉癌变率为1．6％～20．O％，故临床一经发现就应切除。治疗方法有内镜下治疗及外科手术治疗，而内镜下治疗既能减轻患者的痛苦，节约开支，又能缩短治疗时间，减少术后并发症，故消化道息肉镜下治疗已成为常规方法。2010年1月-2012年6月我院在镜下治疗消化道息肉204例，无1例发生出血及穿孔等并发症，现将护理方法报道如下。

生物化学与分子生物学中心实验室的建设与管理

实验室是高等院校开展实验教学、科学研究、技术开发的重要场所，是培养学生实践技能与创新能力的重要基地，是医学教学的重要组成部分。安徽医科大学生物化学与分子生物学中心实验室成立于2001年．为了适应培养高素质新型医学人才的需要，本中心在实验室建设与管理上进行了一些探索和改革，取得了良好效果。

HIL-29通过激活MAPK信号途径上调Hela细胞TLR3表达

目的探讨人白细胞介素29（hIL-29）对Hela细胞TLR3受体表达的影响。方法重组的hIL-29加入Hela细胞中，以RT—PCR分析Toll样受体3（TLR3）、2’5’-寡聚腺苷酸合成酶（2＇5＇-OAS）、MXA蛋白的mRNA表达水平变化，western—blot分析TLR3受体蛋白质水平变化及信号蛋白MAPK（ERK1／2）激活变化。结果hIL-29显著上调TLR3受体的mRNA水平和蛋白质水平的表达，并且具有剂量依赖性。hIL-29刺激Hela细胞18h后，2’5’-OAS、MXA蛋白的mRNA表达水平显著升高（P〈0.01）。western—blot分析hIL-29刺激Hela细胞5～30min后，信号蛋白ERK1／2磷酸化水平显著升高（P〈0.01）。结论hIL-29可能通过激活ERK1／2上调（2＇5＇-OAS）、MXA和TLR3的表达。

人白细胞介素29对Hela细胞抗病毒保护作用

目的研究重组人白介素29(rhIL-29)对Hela细胞的抗病毒保护作用及其作用机制。方法传代培养的Hela细胞按一定密度接种于24孔培养板,分别加入不同浓度的rhIL-29,培养24h后换液一次,继续以含rhIL-29的培养基培养16h,用水疱性口炎病毒(VSV)感染后,以不加rhIL-29为空白对照。RT-PCR分析MxA蛋白、2′,5′-寡腺苷酸合成酶(2′,5′-OAS)mRNA及VSV的RNA水平;MTT及细胞形态学检测分析rhIL-29对Hela细胞的抗病毒保护作用。结果经rhIL-29处理的Hela细胞的MxA蛋白、2′,5′-OAS的mRNA表达明显上调,VSVRNA含量显著下降。MTT分析结果rhIL-29对Hela细胞有保护作用且具有剂量依赖关系(P<0.01)。结论rhIL-29通过上调MxA蛋白、2′,5′-寡腺苷酸合成酶,抑制VSV增殖具有一定的保护Hela细胞免受病毒损伤的作用。