白血病细胞株K562中HIF1-α的表达及其对下游基因的影响

目的探讨白血病细胞株K562中低氧诱导因子1-α(HIF-1α)表达的增加对下游靶基因的影响及意义。方法氯化钴(CoCl_2)做化学缺氧诱导剂,加入K562细胞培养基,分别培养0、4、8、16 h。Real-Time RT-PCR及Western印迹法分别检测HIF-1αmRNA和蛋白水平的表达。Real-Time RT-PCR检测不同时间HIF-1α下游靶基因VEGF、MDR1/MDR3、survivin、Bcl-2、Caspase-3、Bax等的表达。分析HIF-1α表达的变化对下游基因转录活性的影响和意义。结果随着CoCl_2作用时间的增加,K562细胞HIF-1αmRNA水平表达略有增加,但变化不大(P>0.05),蛋白水平增加明显。下游VEGF、MDR1/MDR3、survivin、Bcl-2转录活性增加(P<0.05),而Bax、Caspase-3表达先增加后减少。结论 CoCl_2主要增加K562细胞株HIF-1α蛋白的表达。HIF-1α蛋白使VEGF、MDR1/MDR3、survivin、Bcl-2等促肿瘤存活基因的转录活性增加,而最终减少了Caspase-3、Bax等促肿瘤细胞凋亡基因的表达。因此,HIF-1α可能是调控白血病进展的关键调节因子。

利用siRNA靶向沉默Jeko-1细胞survivin mRNA基因的实验研究

本研究旨在探讨Survivin基因在淋巴瘤细胞中的生物学作用,为将来以Survivin为靶点治疗套细胞淋巴瘤提供实验室证据。体外化学合成针对survivin mRNA基因的siRNA片段,通过DMRIE-C转染Jeko-1细胞,以无关siRNA、未转染的细胞为对照,采用RT-PCR和Western blot方法检测siRNA的抑制效果,利用流式细胞术检测细胞的凋亡率,用CCK-8法检测转染24、48、72 h对细胞增殖的影响。结果表明,与未转染的空白组相比,siRNA转染Jeko-1细胞后24、48、72 h survivin mRNA的相对表达量分别为0.49±0.03、0.38±0.02和0.17±0.02;细胞增殖抑制率分别为(31.2±2.1)%、(43.3±3.4)%和(52.6±2.5)%;细胞凋亡率分别为(6.3±0.5)%、(13.5±1.1)%和(23.6±1.6)%;survivin蛋白表达水平逐步减低。结论:靶向survivin的siRNA能在体外特异性下调目的基因survivin mRNA和蛋白的表达,表现出抑制Jeko-1细胞增殖和促使其凋亡的生物学效应,survivin基因有望成为淋巴瘤治疗的一个药物靶点。

2种CCK-8试剂最佳实验条件比较

在细胞学实验中，MTT（噻唑蓝）比色法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因MTT法具有简便、经济、安全等特点，而被广泛使用，但其操作较繁琐，需加入二甲基亚砜（DMSO）溶解甲腆颗粒，且往往因溶解不全而对实验结果造成影响，为克服MTT法的不足，近年来出现了另外一些检测试剂，如XTr试剂、MTS试剂，国外研发出了1种新型的检测方法CCK-8（cellcountingkit-8），其原理为活细胞线粒体脱氢酶转化的黄色结晶为高度水溶性，

构建shRNA慢病毒载体抑制U937细胞株VEGFR-1基因的表达

目的构建针对血管内皮生长因子受体1(vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR-1)基因的siRNA前体表达载体,鉴定其对U937细胞株VEGFR-1基因干扰效率。方法体外设计并合成针对VEGFR-1基因的慢病毒shRNA干扰载体,通过PCR及测序证实载体构建成功。将慢病毒颗粒以最适滴度转染人单核白血病细胞株U937,应用Real-Time PCR、Western印迹法检测抑制效率。结果构建的慢病毒载体的序列通过PCR、测序等鉴定,与设计序列相同。Real-Time PCR检测显示U937细胞干扰组VEGFR-1 mRNA表达率下降75.98%,Western印迹法显示U937细胞干扰组VEGFR-1蛋白表达量较空白载体对照组明显减少。结论构建的shRNA表达载体可在mRNA和蛋白水平上有效抑制U937细胞株VEGFR-1基因的表达。

胃癌组织中血管内皮生长因子C的表达及其临床意义

目的探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)与其受体-3(VEGFR-3)与胃癌临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学染色,检测20例正常胃组织和98例胃癌组织中VEGF-C表达。结果胃癌组织中VEGF-C阳性表达率为71.4%(70/98),而癌旁组织和正常胃粘膜组织中其阳性表达率为9.2%(9/98)和5.0%(1/20)。98例胃癌组织中VEGF-C表达与患者性别、肿瘤直径大小、肿瘤部位、分化程度、是否存在血管浸润以及浸润深度无显著相关,而与淋巴结转移、淋巴管浸润、远处转移、TNM临床分期显著相关(P<0.05)。结论 VEGF-C及其受体系统是淋巴管生成的重要调节因子,对于胃癌区域淋巴管生成、淋巴转移途径有非常重要的意义。

大流量扭曲式叶片屏蔽泵轴向力调节

对大流量、扭曲式叶片屏蔽泵的轴向力问题进行讨论,根据试验数据和过程,分析总结了轴向力调节的方法及其适用性,为大流量扭曲式叶片屏蔽泵的水力设计提供依据。

SOCS1与经典型慢性骨髓增殖性肿瘤关系的研究

目的探讨细胞因子信号转导抑制蛋白(suppressorofcytokinesignaling,SOCS)在经典型骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPNs)中的临床作用及其机制。方法采用实时定量PCR检测SOCS1的表达情况,DNA直接测序法检测SOCS1基因突变,甲基化特异性PCR检测SOCS1甲基化发生情况,旨在研究SOCS1在MPNs患者发病机制中的作用,以期为该疾病的诊断和治疗探索新的途径。结果 100例MPNs患者中有37例(37%)存在SOCS1基因甲基化,44例polycythemia vera(PV)有15例(34%)存在SOCS1基因甲基化,48例essential thrombocythemia(ET)有19例(38%)存在SOCS1基因甲基化,8例primary myelofibrosis(MF)有3例(37.5%)存在SOCS1基因甲基化;对照组病例共173例患者中有21例(12%)存在SOCS1基因甲基化:93例Chronic myelocytic leukemia(CML)有15例(16%)存在SOCS1基因甲基化,30例myelodysplastic syndrome(MDS)有4例(13.3%)存在SOCS1基因甲基化,30例acute myeloblastic leukemia(AML)有2例(6.7%)存在SOCS1基因甲基化,20例健康志愿者未发现有SOCS1基因甲基化;MPNs患者中SOCS1基因甲基化组与正常对照组相比,其SOCS1基因的表达量明显减少(P<0.05),表明SOCS1基因甲基化可导致SOCS1基因基因表达降低;SOCS1甲基化患者的白细胞计数高于非甲基化患者(P<0.05),SOCS1甲基化的MPNs患者较非甲基化患者更易进展为典型MPNs,无甲基化患者未见外周血计数、年龄的相关性;SOCS1基因全序列测序未发现突变。结论 MPNs患者中存在SOCS1基因甲基化,且甲基化导致其基因表达降低,提示SOCS1基因甲基化对疾病发展有提示作用;SOCS1基因甲基化与MPNs患者年龄、外周血细胞计数相关;SOCS1超甲基化可激活JAK-STAT信号通路或伴JAK2突变,这些改变可能代表了一种潜在的治疗方向。

复值相干模量蚂蚁体技术

蚂蚁体算法是通过模拟自然界蚂蚁的觅食行为而总结出的一种正反馈仿生学算法机制。蚂蚁体技术已经广泛应用于断层预测,实现断层裂缝的自动追踪。文中回顾了蚂蚁体技术的发展历程,研究了影响蚂蚁体追踪质量的6个参数。传统的蚂蚁体技术基于地震方差体,信噪比和分辨率相对较低,文中提出了基于多道局部复值相干的蚂蚁体预测断层技术。该方法将复值相关算法和蚂蚁体算法结合起来追踪断层,得到复值相干模量蚂蚁体。实际应用表明,该方法既克服了多道局部复值相干边缘检测技术受地层边界影响大、对多组断层预测困难的缺点,又克服了传统蚂蚁追踪方法对断层预测不全面、干扰信息多的缺点。同时,人工解释结果验证了该方法具有较高的准确度和可靠性。

奥氮平治疗老年痴呆伴发精神行为障碍的临床研究

目的对奥氮平治疗老年痴呆伴发精神行为障碍临床效果的分析与探讨。方法选取80例在我院接受治疗的老年痴呆患者参与治疗,治疗时间为2014年12月~2015年12月。按照治疗方法的区别,将患者分为对照组（利培酮治疗）和实验组（奥氮平治疗）,对治疗效果进行对比分析。结果对照组（40例）中,治疗有效的患者13例,一般有效的患者15例,无效的患者12例,总有效率为70.0%;实验组（40例）中,治疗有效的患者19例,一般有效的患者20例,无效的患者1例,总有效率为97.5%。实验组总有效率高于对照组,组间差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论对于患有老年痴呆伴发精神行为障碍患者而言,给予奥氮平药物治疗能够显著提升疗效。

康复期精神分裂症患者治疗依从性相关因素的调查研究

目的针对康复期精神分裂症患者,讨论患者治疗依从性的相关影响因素,为日后的临床工作提供参考与指导。方法将我院收治的康复期精神分裂症患者作为研究对象,选择年份为2013年2月至2015年2月,患者总计120例。针对所有患者的治疗依从性进行调查研究,主要是选择自拟治疗依从性调查表的方法来完成。结果经过临床统计,120例康复期精神分裂症患者当中,依从性好的患者共计70例,占比58.3%;依从性差的患者共计50例,占比41.7%,比较差异有统计学意义,P<0.05。在相关因素的调查当中,发现年龄因素、性别因素、文化程度、社区医疗服务、家庭成员关系、护患关系是主要的影响因素,应在日后的治疗过程中特别关注。结论康复期精神分裂症患者,已经处于比较稳定的阶段,如果能够得到外界的有效帮助,自身的心理想法控制会得到稳定的干预,患者很有可能步入到正常的生活轨道当中,未来的完全康复并非不可能。但是,由于康复期精神分裂症患者自身,仍然存在较多的负面想法,虽然表面上较为稳定,可是仍然容易受到较多外界因素的作用。此时,如果能够将治疗依从性相关因素做出良好把控,则可以对患者产生积极作用,相反的,则会造成负面影响。建议在日后的治疗中,将依从性影响因素深入分析,健全把控方案,帮助康复期精神分裂症患者取得更好的恢复效果。

焦虑性神经症患者个性特征分析与心理干预

目的:探讨焦虑性神经症患者的人格特征以辅助临床治疗工作。方法:采用MMIP量表对65例焦虑性神经症患者进行测试,与中国常模比较。结果:焦虑性神经症患者的MMPI分值以Hs、D、Hy、Pt最高(P<0.05～0.01)。结论:焦虑性神经症的发生与个性基础有关,在临床工作中应根据病人心理特点进行心理干预。

在欣赏中走进音乐世界

对音乐的一切感受,都源于对音乐的欣赏,如何设计教学过程,选定教学方法,提高学生的欣赏能力呢？笔者认为,遵循认知规律,将欣赏教学的各个阶段有机的融合,渗透在一起,是提高学生欣赏能力的有效途径。一、感知欣赏感知欣赏是音乐欣赏的最初阶段。

综合干预方式联合二甲双胍治疗抗精神病药物所致体重增加的研究

目的:研究综合干预方式联合二甲双胍对抗精神病药物引起的体重增加的治疗作用。方法:116例患者按照随机原则分为对照组(仅给予一般健康教育)、综合干预组和综合干预联合二甲双胍组。三组患者分别在第4、8、12周末测量体重、腰围、计算体质指数(BMI)、测量空腹血糖(FPG)及血脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),观察时间均为12周。最后对治疗前后各时点数据采用配对t检验进行统计学分析。结果三组干预前后比较,其中综合干预方式联合二甲双胍干预组体重、FPG、BMI、TG于治疗后均有明显的下降,差异均有统计学意义(P<0.05),综合干预组干预前后比较体重、FPG、BMI、于治疗后均有明显的下降,差异均有统计学意义(P<0.05),对照组干预前后比较差异无统计学意义。

施展音乐舞台 感受艺术魅力

何新事物的产生,总有其适应的过程,新课程改革也是一样,笔者通过参加教师培训,经过多年来的教育摸索和实践,基本能抓住新课程改革的本质,领会新课程改革的精神,明确新课程改革的目标和方向,一个新的音乐课程体制展现在我面前.

16例焦虑症患者健康教育路径的应用体会

健康教育路径是遵循整体护理的模式,运用护理程序的方法,对患者进行规范的、全面的、有计划的和有效的健康教育[1],而焦虑症患者对疾病和自身往往缺乏的正确认识,不能妥善看待和处理应激事件,造成疾病迁延,健康教育路径的实施恰恰可以激发患者治疗的主观能动性,形成积极的思维方式.本研究通过在护理工作中对16例焦虑症患者实施健康教育路径,转变了患者的观念与认识,重建起健康的行为方式,提高了疗效和服务质量,也实现了医护人员能力的提升.

新课程视野下的音乐教学评价

基础教育课程改革强调学生的个性发展,在我们的教育对象中,每个学生都有可开发的潜能,只是表现的领域不同而已。这就需要我们教师要能够有效地与学生进行沟通,在以促进学生的发展为终极目标的前提下,从不同的视角、不同的层面去评价学生。而对教师教学行为的反思性评价,更能生成有效的课堂教学。

精神分裂症运用认知矫正治疗的临床探讨

目的 探讨精神分裂症运用认知矫正治疗的临床效果。方法 选取2014年1月-2015年1月我院收治的精神分裂症患者88例作为研究对象。将所有患者随机分为观察组和对照组,每组44例患者。观察组患者运用认知矫正治疗,对照组采用工娱治疗。观察两组患者各方面改善情况。结果 观察组患者治疗后BPRS评分改善情况明显优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;观察组患者治疗依从性优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论 精神分裂症运用认知矫正治疗能够促进患者认知功能恢复,提高患者的治疗依从性与社会功能。

多奈哌齐治疗血管性痴呆的效果研究

目的研究血管性痴呆采用多奈哌齐治疗的效果。方法纳入2015年6月~2016年6月因血管性痴呆于哈尔滨市第一专科医院就诊的62例患者,按随机数字表法分组,31例为常规治疗,设为对照组。31例为多奈哌齐治疗,设为实验组。治疗后比较两组疗效。结果治疗后实验组MMSE[（22.59±3.87）分vs.（17.51±3.35）分]和ADL[（53.32±7.55）分vs.（41.29±7.61）分]较对照组提高,CDR较对照组下降[（0.88±0.18）分vs.（1.66±0.30）分],治疗总有效率高于对照组[30例（96.77%）vs.26例（83.87%）],差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论多奈哌齐治疗血管性痴呆效果较好。

东营市垦利区水库移民后期扶持项目实践

近年来,垦利区围绕水库移民后期扶持政策,以平台企业为载体,以园区建设为依托,发挥移民资金“四两拨千斤”作用,积极探索水库移民后期扶持新模式,从“授人以鱼”变“授人以渔”,引导移民村发展特色产业,推动村集体经济破壳,探索出了一条符合当地实际的移民幸福之路。

低氧对Jurkat细胞低氧诱导因子-1α及其类泛素化的影响及意义

目的 探讨低氧条件下Jurkat细胞低氧诱导因子-1α（HIF-1α）类泛素化的变化对其基因转录活性和蛋白稳定性的影响,以及对下游靶基因转录活性调控的影响和意义.方法 氯化钴（CoCl2）化学缺氧法模拟肿瘤缺氧不同时间,分别用荧光定量PCR、Western blot法检测HIF-1α基因及蛋白稳定性的变化,类泛素-1（SUMO-1）、类泛素蛋酶-1（SENP-1）蛋白水平的表达,VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1和survivin等基因转录活性的变化.结果 在缺氧诱导4、8、16、48、72 h后,HIF-1α基因转录活性分别为缺氧诱导前的（0.79 ±0.19）、（2.65±2.05）、（4.19±4.72）、（2.77±3.37）、（0.09±0.05）、（0.69±0.55）倍（P〉0.01）,而蛋白稳定性逐渐增高后减低（P〈0.01）.SEN-1蛋白的表达与SUMO-1蛋白表达呈相反趋势,前者逐渐增高后减低,而后者逐渐减低后增高（P〈0.01）.除survivin 基因外,VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1基因转录水平与HIF-1α蛋白稳定性相平行.结论 缺氧引起SENP-1表达变化,通过减低HIF-1α蛋白类泛素化作用而影响HIF-1α稳定性,从而改变下游VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1等基因的转录活性而最终影响细胞牛物学过程.