骆驼瘤胃乳酸菌的分离、鉴定及其降解吲哚的功能研究

为研究从驼骆瘤胃内容物分离、筛选的乳酸菌,其体外降解吲哚的功能。利用MRS培养基筛选骆驼瘤胃乳酸菌,提取细菌总DNA,扩增16S rDNA序列,构建系统发育树。在以吲哚(500 mg/L)为唯一碳源、氮源的无机盐培养基中胁迫培养乳酸菌,紫外分光光度计测定吸光度值(600 nm),测定乳酸菌在高浓度吲哚环境中的生长曲线;使用GC-MS动态检测吲哚残留量,测定乳酸菌对吲哚的降解能力。结果显示:筛选获得4株乳酸菌,GU366019、GU366027、GU366021、GU366034均归属为乳杆菌属(Lactobacillus),其中GU366019、GU366027、GU366021为德氏乳杆菌亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.),GU366034为驯马乳杆菌(Lactobacillus equicursoris)。四株菌在添加吲哚的无机盐培养基中生长缓慢,但对吲哚降解能力强。GU366027、GU366019、GU366021在144 h内,GU366034在156 h可将吲哚100%降解,证实来源于骆驼瘤胃的乳酸菌具有降解吲哚的功能。本实验在补充肠道毒素降解微生物资源的同时,也为乳酸菌降解、清除肠道毒素提供了研究依据。

鹰嘴豆总皂苷制备及体外降血糖与抗氧化活性评价

优化鹰嘴豆总皂苷的提取及纯化工艺,评价其体外降血糖及抗氧化活性。采用响应面法优化超声辅助提取鹰嘴豆总皂苷,并利用大孔树脂对其进行纯化。通过鹰嘴豆总皂苷对α-葡萄糖苷酶抑制作用来评价其体外降血糖活性;以总抗氧化能力、对DPPH·及·OH自由基的清除能力及还原能力评价其体外抗氧化活性。最佳提取工艺为:乙醇浓度68.13%、超声功率106.96 W、超声温度49.86℃、超声时间45.26 min,此条件下提取率为0.4824%。D-101大孔树脂纯化后,鹰嘴豆总皂苷纯度由16.42%提升至27.81%。纯化后的鹰嘴豆总皂苷对α-葡萄糖苷酶抑制作用(IC50=0.2053mg/mL)、总抗氧化能力(TEAC=8.408 mmol/g)、DPPH·清除能力(IC50=0.0667 mg/mL)、·OH清除能力(IC50=1.836 mg/mL)及还原能力均呈现一定的剂量-效应关系,且都强于未纯化的鹰嘴豆总皂苷。通过优化鹰嘴豆总皂苷提取及纯化工艺,其提取率和纯度得到提高,并具有一定的体外降血糖及抗氧化活性。