论学生健康成长离不开成就感的激励

从对学生的接触中,我们感到不少学生的性格并不像他们所应有的那样天真烂漫、无忧无虑,也不像人们所期望的那样对前景充满幻想与自信。他们时常情绪低落,缺乏进取心,若不及时发现,正确引导,一些学生会意志消沉,丧失信心。

解甘露醇罗尔斯顿菌的耐药性和原卟啉亚铁螯合酶毒力因子研究

目的:检测与分析解甘露醇罗尔斯顿菌的耐药性和β-内酰胺酶基因、原卟啉亚铁螯合酶基因及其结构和功能。方法:采用血平板分离划线培养、全自动细菌检测分析系统和16S RNA基因PCR分离并鉴定病原菌。采用微量稀释法对分离菌株进行药敏试验,β-内酰胺酶、超广谱β-内酰胺酶和碳青酶烯酶确证试验确定其产酶情况。采用PCR扩增分离菌株5个β-内酰胺酶基因和原卟啉亚铁螯合酶基因并测序。采用生物信息学软件分析该原卟啉亚铁螯合酶基因产物结构与功能。结果:患者血液中分离出解甘露醇罗尔斯顿菌。该菌株对头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星、替加环素敏感,但对五种青霉素类、四种头孢菌素类和两种碳青酶烯类抗菌药物耐药。该菌株产β-内酰胺酶但不产超广谱β-内酰胺酶和碳青酶烯酶。该菌株具有5个独特的β-内酰胺酶基因和原卟啉亚铁螯合酶基因,该基因产物为含2个Ⅱ类螯合酶超家族原卟啉亚铁螯合酶功能结构域,与脑膜炎奈瑟菌原卟啉亚铁螯合酶亲缘关系最近。结论:该株解甘露醇罗尔斯顿菌对β-内酰胺类抗菌药物有较高耐药性,其β-内酰胺酶基因与常见细菌β-内酰胺酶基因不同,原卟啉亚铁螯合酶可能是其重要毒力因子。

原核细胞microRNA特性及其作用机制研究进展

microRNA为一类非编码小RNA,主要通过其种子序列(seed sequence,SS)与靶mRNA位于5′端的SS结合序列特异性结合后抑制靶mRNA转录或降解靶mRNA,从而在转录后水平负调控靶基因表达。microRNA首先发现于秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans),此后发现各种真核细胞均存在大量各种microRNA。真核细胞首先转录出microRNA前体,经剪切后成为21~23nt有功能的microRNA,大多与靶mRNA的3′端序列结合后引起靶mRNA翻译抑制或降解。近年不少细菌等原核细胞microRNA被发现,但原核细胞microRNA不需剪切即有活性,大小为50~400nt,其特性、作用位点和机制等也与真核细胞有一定差异。本文简要介绍真核和原核细胞基因表达调控主要机制、microRNA特点及其调控基因表达的机制,以期为深入研究原核细胞型病原微生物基因表达调控与致病机制奠定基础。

八段锦运动对促进长期住院精神分裂症患者康复的效果观察

目的观察八段锦运动对促进长期住院精神分裂症患者康复的效果。方法选取2018年1月至2018年12月我院收治的长期住院精神分裂症患者64例,随机分为两组各32例。两组患者的抗精神药物治疗方案不变,对照组给予常规护理+每天散步1 h,观察组给予常规护理+每天2次八段锦运动练习,比较两组的干预效果。结果与干预前相比,观察组干预后的血脂及血糖指标水平均有显著改善(P<0.05),对照组干预后仅HDL水平显著降低(P<0.05)。干预后,观察组患者的体重指数显著低于对照组,睡眠障碍、睡眠质量、睡眠效率、入睡时间、睡眠时间评分均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论八段锦运动可有效促进长期住院精神分裂症患者的康复,改善患者的糖脂代谢、体重指数以及睡眠质量,具有推广价值。

园艺治疗对长期住院老年性精神分裂症患者的影响

目的:探讨园艺治疗对长期住院老年性精神分裂症患者的作用和影响。方法:将我院2015年1月~2016年12月期间收治的长期住院老年性精神分裂症患者120例作为研究对象并随机等分为对照组和研究组,对照组予以常规护理,研究组则在对照组的基础上予以园艺疗法。将临床效果进行对比。结果:接受相关治疗干预后,两组患者的BPRS,IPROS,NORS量表指标数据均显著性降低(P<0.05),研究组显著性低于对照组(P<0.05)。结论:针对长期住院老年性精神分裂症患者积极实施园艺治疗,可以产生明显的效果,有助于改善患者症状,具有极大地推广应用价值。

肺泡蛋白沉积症一例及文献复习

肺泡蛋白沉积症(pulmonary alveolar proteinosis,PAP)是一种罕见肺部疾病,最早于1958年由Rosen和Castleman首次报道[1]。主要因肺泡腔及终末呼吸性细支气管内表面活性物质异常沉积导致气体交换障碍,最终导致呼吸衰竭[2-3]。该病起病隐匿,发病率低,100万人中的发病率不到0.0005‰[4]。临床主要表现为进行性呼吸困难、咳嗽和低氧血症。由于临床表现缺乏特异性,容易漏诊或误诊。CT上呈典型“地图”或“铺路石”样改变,肺泡灌洗液呈现特征性外观以及涂片经PAS染色阳性可以确诊[5]。现将浙江大学医学院附属杭州市胸科医院1例确诊为PAP的患者分别就其临床表现、影像学改变、病理特征及治疗预后进行分析,并结合相关文献复习以提高对该病的认识。

康复指导对精神分裂症患者院外治疗依从性的影响

目的:观察对精神分裂症患者进行电话康复指导对其生活质量及服药依从性的影响。方法:选取2016年1月至2016年12月来茂名市第三人民医院进行复查的精神病患者82例,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各41例。对照组进行常规康复指导,观察组在其基础上进行电话康复指导。观察两组患者在进行指导后生活质量以及服药依从性的变化。结果:对照组和观察组患者生活质量好的占比率分别是29.27%和53.66%,观察组的占比率明显优于对照组的占比率;对照组和观察组患者的服药依从性良好率分别是53.66%和75.61%,观察组的服药依从性明显优于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论:电话康复指导可以帮助精神分裂症患者提高生活质量,加强患者服药依从性,效果肯定。

骨外尤因肉瘤一例临床病理分析

尤因肉瘤(Ewings sarcoma,ES)是一种低分化的小圆细胞恶性肿瘤,具有特征性的病理形态学和分子遗传学表现,遗传学上最常见的是存在11号和22号染色体之间的易位,即t(11;22)(q24;q12)易位,绝大多数产生EWSR1-FLI1融合,主要发生在骨组织,发生在骨外极其罕见。我们收集1例2019年7月就诊于浙江大学医学院附属杭州市胸科医院确诊为骨外尤因肉瘤(extraosseous Ewing's sarcoma,EES)患者资料,分析其临床病理学特征与分子遗传学特征,可为治疗及预后提供参考。

基于MDT理念的一体化管理对缓解期双相情感障碍患者认知与社会功能康复的影响

目的:探讨基于多学科协作诊疗(MDT)理念的一体化管理对缓解期双相情感障碍(BD)患者认知与社会功能康复的影响。方法:2018年8月1日~2020年2月1日,将92例缓解期BD患者采用随机数字表法分为观察组和对照组各46例,对照组进行常规干预,观察组在常规干预基础上给予基于MDT理念的一体化管理干预;比较两组干预前后认知功能[采用连线测试(TMT)、数字广度测验、威斯康星卡片分类测验(WCST)]、社会功能[采用社会功能缺陷筛选表(SDSS)]、病耻感[采用贬低-歧视感知量表(PDD)]和生活质量[采用生活质量综合评定问卷(GQOLI-74)]。结果:干预12周后,两组TMT、SDSS、PDD、GQOLI-74评分均优于干预前(P<0.05),且观察组优于对照组(P<0.01);干预12周后,观察组数字广度评分及WCST错误率均优于干预前和对照组(P<0.05)。结论:基于MDT理念的一体化管理在缓解期BD患者中实施效果良好,能够提高患者认知能力与社会功能康复效果。

浅析农业类企业的财务造假问题及防范措施

近年来,随着我国资本市场的不断发展,各行业财务造假案层出不穷,农业类企业更是泛滥。本文通过分析万福生科、振隆特产和参仙源财务造假的手段,得出农业类企业成为财务造假重灾区的原因,并结合农业现状提出一些针对性的措施和建议,以期防范和遏制农业类企业财务造假问题。

基于微信平台的延续性护理干预对双相情感障碍患者认知功能、功能失调性状况的影响研究

目的探讨基于微信平台的延续性护理干预对双相情感障碍患者认知功能、功能失调性状况的影响。方法选取2017年6月至2019年6月我院收治的86例双相情感障碍患者,随机平均分为两组。对照组采用常规护理干预,观察组采用基于微信平台的延续性护理干预。对比两组患者护理前后的认知功能、功能失调性状况及社会功能。结果护理后,观察组的即刻记忆、短时记忆、长时记忆及记忆商数评分均高于对照组,且操作智商、语言智商及总智商评分均高于对照组(P <0.05)。护理后,两组的DAS、 SDSS评分均下降,且观察组的DAS、 SDSS评分低于对照组(P <0.05)。结论基于微信平台的延续性护理干预可有效提高双相情感障碍患者的社会功能,改善其功能失调性状况,减轻社会功能缺陷。

奥马哈系统护理模式对抑郁症患者心理健康及生活质量的影响

抑郁症又称抑郁障碍,以显著而持久的心境低落为主要临床特征。病因尚不明确,但肯定的是与社会环境、家庭、生理及心理个性等因素有着密不可分的关系,病情严重患者甚至会出现自杀行为[1]。对于这类群体,社会、家庭应给予重点关注,并积极给予心理与药物治疗干预。奥马哈系统护理模式是指由问题评估分类、护理设计、护理服务、效果评价等系统组成的标准化医疗护理模式[2]。

肺炎链球菌StkP激酶与β-内酰胺类抗生素结合能力及耐药相关性分析

目的 确定肺炎链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶StkP与耐药相关性及其胞外区与β-内酰胺类抗生素结合的能力.方法 采用插入失活法构建肺炎链球菌ATCC6306株stkP基因敲除（ΔstkP）突变株.采用E-test检测青霉素（PCN）和头孢噻肟（CTX）对Δstkp突变株及其野生株的最低抑菌浓度（MIC）.采用生物信息学软件确定肺炎链球菌ATCC6306株丝氨酸/苏氨酸激酶编码基因（stkP）胞外区（EC-StkP）、构建EC-StkP三维空间结构模型、分析EC-StkP结构与功能关系.采用PCR扩增stkP基因胞外区片段（EC-stkP）,T-A克隆后测序.构建EC-stkP原核表达系统,SDS-PAGE联合凝胶图像分析系统检查目的重组蛋白（EC-rStkP）表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯EC-rStkP.采用等温滴定量热法（VT-ITC）和表面等离子共振法（Biacore）检测EC-rStkP与PCN和CTX结合能力.结果 肺炎链球菌ATCC6306株对PCN和CTX敏感（MIC=0.06和0.12 μg/ml）,但ΔstkP突变株对PCN和CTX高度耐药（MIC=16和32 μg/ml）.肺炎链球菌ATCC6306株StkP C端295 aa片段为胞外区,该胞外区有4个青霉素结合蛋白和丝氨酸/苏氨酸激酶相关（PASTA）功能结构域.克隆的stkP胞外区序列与GenBank中相应基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为99.6%和100%.构建的EC-stkP原核表达系统可表达可溶性EC-rStkP.PCN和CTX均能与EC-rStkP结合,但后者结合EC-rStkP能力强于前者.结论 肺炎链球菌stkP基因与β-内酰胺类抗生素耐药性密切相关,其表达产物丝氨酸/苏氨酸激酶StkP具有识别并结合β-内酰胺类抗生素的能力.

肺炎链球菌CiaR调控pbps和csRNAs基因表达作用及其与耐药相关性

目的构建肺炎链球菌ciaR基因敲除（ΔciaR）突变株，了解该菌二元信号传导系统CiaH/CiaR中反应调节蛋白CiaR对青霉素结合蛋白基因（pbps）和cia-依赖小RNA基因（csRNAs）表达的作用。方法采用电泳迁移率试验（ESMA）确定与重组表达CiaR蛋白（rCiaR）结合的pbps基因。构建用于敲除肺炎链球菌ciaR基因的自杀质粒pEVP3ciaR，通过自杀质粒同源重组、插入失活及氯霉素筛选获得ΔciaR突变株。采用PCR及测序鉴定ΔciaR突变株。采用E-test测定青霉素（PCN）和头孢噻肟（CTX）对肺炎链球菌菌株最低抑菌浓度（MIC）。采用实时荧光定量RT-PCR，检测ΔciaR突变株及其野生株1/4 MIC PCN或CTX作用前后pbps-mRNAs和csRNAs水平变化与差异。结果CiaR能与肺炎链球菌pbp1a、pbp1b和pbp2b基因启动子区结合。PCR和测序结果证实ΔciaR突变株中ciaR基因被插入失活。1/4 MIC PCN或CTX作用后，肺炎链球菌ΔciaR突变株pbps-mRNAs水平明显升高（P〈0.05）、csRNAs水平明显降低（P〈0.05），但其野生株pbps-mRNAs水平明显降低（P〈0.05）、csRNAs水平明显升高（P〈0.05）。E-test结果显示，PCN和CTX对ΔciaR突变株MIC均较野生株增加250倍。结论肺炎链球菌CiaR可通过下调PBP1a、PBP1b和PBP2b表达或上调csRNAs表达抑制PBPs表达，使该菌对PCN和CTX耐药性增强。

血清降钙素原在儿童细菌性上呼吸道感染中的诊断价值

目的探讨血清降钙素原(PCT)在儿童细菌性上呼吸道感染中的诊断价值。方法回顾性分析2015年1月-2017年6月271例上呼吸道感染患儿相关信息,以细菌培养结果为金标准,比较PCT、C-反应蛋白(CRP)及白细胞(WBC)计数在革兰阳性或阴性菌感染区分及儿童细菌性上呼吸道感染诊断中的价值。结果细菌培养阳性148例(54.6%),共分离到致病菌191株,单一感染革兰阳性菌和阴性菌分别有73例和55例。以2.0μg/L为界限PCT检测革兰阳性和阴性菌阳性率差异有统计学意义(P<0.01),当PCT≥10.0μg/L时,革兰阴性菌感染可能性更大。以细菌培养结果为金标准,PCT检测的灵敏度、特异度、准确度均高于CRP与WBC检测,漏诊率、误诊率均低于CRP与WBC检测。结论血清PCT作为区分革兰阳性和阴性菌感染指标有一定价值,采用PCT诊断儿童细菌性上呼吸道感染较传统的CRP和WBC更快速和准确,PCT检测为区分上呼吸道感染性质提供了一种新途径。

金黄色葡萄球菌肠毒素基因的检测和耐药性分析

目的了解金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)临床分离株的肠毒素基因携带情况和耐药现状。方法 PCR扩增SA肠毒素编码基因sea、seb、sec、sed、see和sef,电泳检测扩增结果。K-B法检测SA临床菌株对药物敏感性,头孢西丁法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。结果 89株临床菌株中,68株肠毒素基因阳性,阳性率为76.4%,sea、seb、sec、sed、see和sef检出率分别为58.4%、5.6%、43.8%、3.4%、2.2%和14.6%,36株(40.4%)同时检测到2种或2种以上肠毒素基因。MRSA和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)分别占42.7%(38/89)和57.3%(51/89),MRSA肠毒素基因携带率(92.1%,35/38)明显高于MSSA的携带率(64.7%,33/51),差异有统计学意义(P<0.05)。金黄色葡萄球菌除对万古霉素、利奈唑胺和呋喃妥因敏感外,对青霉素、苯唑西林等9种抗菌药物均有耐药性,且MRSA的耐药性比MSSA的强。结论应重视对金黄色葡萄球菌肠毒素和MRSA的检测,合理使用抗菌药物,以利于医院MRSA感染的控制。

不可分型流感嗜血杆菌Hap黏附素T-B优势抗原表位及其免疫原性研究

目的 了解无荚膜型流感嗜血杆菌（NTHi）临床菌株中Hap黏附素编码基因（hap）分布及其序列保守性,筛选并鉴定Hap蛋白优势T和B细胞（T-B）联合抗原表位及其免疫原性.方法采用生物信息学软件分析NTHi菌株hap基因序列保守性并预测其T-B联合抗原表位.采用PCR扩增NTHi临床菌株hap基因5′端156 bp和3′端855 bp片段（hap-5′-156和hap-3′-855）后测序.构建Hap蛋白N端52 aa和C端285 aa片段（Hap-N52和Hap-C285）7个T-B联合抗原表位肽噬菌体展示系统.采用Western blot和ELISA分别检测重组噬菌体PⅢ蛋白（rPⅢ）展示的T-B联合抗原表位肽抗原性和免疫反应性.结果 hap基因产物为NTHi膜表面蛋白.不同NTHi菌株hap基因5′端156 pb和3′端855 bp序列相对保守,中间区变异较大.56株NTHi临床菌株均能检出hap-5′-156和hap-3′-855片段,其核苷酸和氨基酸序列相似性为92.3％～100％.Hap-N52片段中Hap-N5-24以及Hap-C285片段中Hap-C4-27、Hap-C28-47、Hap-C114-129、Hap-C150-173、Hap-C200-227和Hap-C241-267为评分较高且变异较小的预测T-B联合抗原表位.Western blot和ELISA检测结果显示,rPⅢ展示的Hap-C4-27或Hap-C150-173表位肽能与NTHi抗血清产生较强的杂交条带且96.9％（63/65）和92.3％（60/65）NTHi感染患儿血清标本相应抗体阳性.结论 hap基因在NTHi临床菌株中分布广泛且5′端156 pb和3′端855 bp序列保守.Hap-C4-27和Hap-C150-173为Hap蛋白优势T-B联合抗原表位,可作为NTHi多抗原肽疫苗的候选表位.

肺炎链球菌StkP激酶胞外区与β-内酰胺类抗生素结合位点分析

目的分析肺炎链球菌丝氨酸/苏氨酸激酶StkP胞外区(EC-StkP)基序(motif)在与β-内酰胺类抗生素结合中的作用。方法分别将EC-StkP的3个motif(SXXK)依次和全部突变为AXXA,将突变后得到的质粒导入受体细胞进行克隆表达,SDS-PAGE联合凝胶图像分析系统检查目的重组突变蛋白(EC-rStkP)表达情况,Ni-NTA亲和层析法分别提纯突变蛋白。采用等温滴定量热法(ITC 200)和表面等离子共振法(Biacore t200)检测突变蛋白与青霉素(PCN)和头孢噻肟(CTX)结合能力。结果PCN和CTX均不能与第1个、第3个以及3个motif均突变的蛋白质结合,但第2个motif突变后还能与CTX有较弱结合,而与PCN却不能结合。结论肺炎链球菌StkP激酶胞外区的3个motif都能与β-内酰胺类抗生素结合,且以与第1个motif和第3个motif结合为主。

肺炎链球菌StkP/CiaR组成耐药相关二元信号传导系统的分析与鉴定

目的确定肺炎链球菌β-内酰胺抗生素耐药相关胞内应答调节蛋白CiaR能与跨膜丝氨酸/苏氨酸激酶StkP结合组成StkP/CiaR二元信号传导系统(TCSS)。方法采用PCR扩增stkP基因胞内区片段(IC-stkP),T-A克隆测序确认序列正确后构建其原核表达系统。SDS-PAGE检查IC-stkP片段和我们以往构建的ciaR基因原核表达系统目的重组蛋白rIC-StkP和rCiaR表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rIC-StkP和rCiaR。采用Co-IP和LC-MS/MS鉴定rIC-StkP捕获的肺炎链球菌靶蛋白。采用等离子共振法(SPR)和等温滴定量热法(ITC)检测rCiaR与rIC-StkP结合能力。结果所构建的IC-stkP片段原核表达系统能有效表达rIC-StkP。SDS-PAGE结果显示提纯的rIC-StkP和rCiaR在胶上均为单一蛋白质条带。CiaR可与rIC-StkP特异性共沉淀,其3个裂解肽位于CiaR分子内且序列完全相符。SPR和ITC结果显示,rCiaR与rIC-StkP呈高亲和力强结合,其KD值分别为1.526×10^-9 mol/L和1.980×10^-6 mol/L。结论肺炎链球菌CiaR可作为StkP激酶下游应答调节蛋白组成StkP/CiaR-TCSS。

亚抑制浓度鱼腥草素钠和红霉素体外诱导对肺炎链球菌耐药性影响

目的观察亚抑制浓度鱼腥草素钠和红霉素体外诱导对肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Sp)耐药性影响,探讨Sp红霉素耐药的分子机制。方法琼脂稀释法测定ATCC6306和10株红霉素敏感临床分离株对鱼腥草素钠和红霉素MICs;1/2MIC的鱼腥草素钠和红霉素为起始浓度进行连续诱导,检测诱导前后菌株对鱼腥草素钠和红霉素的MICs;PCR扩增药物诱导前后菌株L4和L22编码基因rplD和rplV并测序,比较诱导前后氨基酸序列的变化。结果Sp经鱼腥草素钠诱导传代的各临床菌株MICs改变不超过2倍,无耐药株产生;诱导前所有菌株对红霉素的MIC为0.125μg/ml~0.25μg/ml,诱导后ATCC6306和5株临床菌株成为红霉素耐药株,MIC为4μg/ml~32μg/ml,其中ATCC6306和3株临床L4和L22氨基酸序列存在1处~3处替换突变。结论红霉素体外诱导肺炎链球菌获得稳定性耐药,耐药机制可能与核糖体蛋白L4和L22氨基酸突变相关。相对于化学合成药物肺炎链球菌对鱼腥草素钠不易产生耐药。