Peyton四步教学法在临床微生物检验实践教学中的应用探讨

临床微生物检验作为检验医学重要组成部分,侧重于培养学生的实践技能。然而,传统教学方法虽有所改进,但由于课堂时间和个体指导的限制,学生的实操机会和对操作要点的理解仍显不足。本文探讨了Peyton四步教学法在临床微生物检验实践教学中的应用。该方法包括示范操作、讲解操作、指导操作和独立操作四个步骤,逐步引导学生掌握操作技能和专业理论。教师首先通过完整演示操作过程,让学生观察学习;接着详细讲解每一步骤的理论背景和实施要点;然后在教师指导下学生进行操作,及时纠正错误,确保准确掌握操作步骤;最后学生独立完成操作,教师评估掌握情况并提供反馈。这种分阶段、渐进式的教学方法不仅显著提升了学生的操作技能,还加深了其对理论知识的理解。在实践中应用Peyton四步教学法可增强临床微生物检验实践教学的效果,也为检验医学教学改革与创新提供新思路和新模式。

如何提高临床微生物检验的质量

要提高临床微生物检验质量,为临床提供及时、准确和可靠的结果,就必须进行全面的质量管理即质量保证[1].质量保证也就是为了使检验结果更好地反映患者的实际情况,必须对检验的全过程进行质量控制,包括从临床医师开出检验单,到病人准备、标本采集、标本运送、标本处理、标本分析及结果处理,直至最后发出报告的整个过程[2].下面就从分析前质量保证、分析中质量控制、分析后质量保证进行阐述.

NICU院内感染病原菌流行分布情况及其耐药性变迁

目的研究NICU近年院内感染病原菌的流行分布情况及耐药性的变迁,为临床合理用药提供理论依据。方法回顾性分析2006年1月至2008年6月NICU住院的2596例患儿,对1474例疑合并有院内感染患儿分别采集下呼吸道分泌物、血液、尿和粪便等进行培养。结果414例患儿4060份标本共分离出病原菌622株,阳性率为15.32%(622/4060),平均院内感染率为15.95%(414/2596),其中2006年为10.18%(91/894)、2007年为18.64%(205/1100)和2008年上半年为19.60%(118/602)。2006年前3位的病原菌为葡萄球菌、铜绿假单胞菌、克雷伯杆菌和链球菌(并列第三);2007年为真菌、葡萄球菌和肠球菌;2008年上半年为真菌、克雷伯杆菌和葡萄球菌。下呼吸道院内感染病原菌前3位,2006年为铜绿假单胞菌、葡萄球菌和嗜麦芽黄单胞菌;2007年为真菌、铜绿假单胞菌和链球菌;2008年上半年为克雷伯杆菌、嗜麦芽黄单胞菌和铜绿假单胞菌。细菌耐药情况:阳性菌对克林霉素、头孢唑啉和青霉素G的耐药性较高,而对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺敏感性高;革兰阴性杆菌对头胞第二、三代抗生素耐药性高,但对碳青霉烯类和氨基糖苷类抗生素敏感。结论院内感染的发生率逐年增加,病原菌谱不断改变,特别是真菌目前占居首位,但病原菌的耐药性变迁不大。

2007—2009年临床分离958株鲍曼不动杆菌分布状况及其耐药趋势分析

目的了解2007—2009年958株鲍曼不动杆菌感染分布状况及其耐药性变化趋势,为临床合理使用抗菌药物和医院感染控制提供实验室依据。方法采用WHONET5.4统计软件回顾性分析了2007—2009年间临床分离鲍曼不动杆菌的标本来源、病区分布及耐药性变迁,应用SPSS13.0的2检验对细菌耐药率进行分析。结果临床分离的958株鲍曼不动杆菌来自呼吸道的标本占85.5%;主要引起ICU患者的感染,占44.0%。3年来,鲍曼不动杆菌对亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟的耐药率呈上升趋势(P<0.01);到2009年,亚胺培南、哌拉西林/他唑巴坦和头孢吡肟的耐药率均超过40%;其余11种抗菌药物的耐药水平较高,其中对妥布霉素、氨苄西林/舒巴坦、左旋氧氟沙星、头孢他啶、头孢曲松、庆大霉素、氨曲南等7种抗菌药物3年比较,2008年与2007年比耐药率呈上升趋势(P<0.05),而2009年与2008年比较耐药率变化不明显(P>0.05);对复方新诺明和环丙沙星连续3年耐药率变化不明显(P>0.05)。结论对鲍曼不动杆菌的连续性监测可及时发现其耐药情况,分析其耐药变化趋势,指导临床合理地应用抗生素,并协助医院感控部门制定最佳的感染控制措施,有效地控制鲍曼不动杆菌在医院的定植与传播,减少或延缓耐药菌株的出现。

下呼吸道感染鲍曼不动杆菌临床分布及耐药性分析

目的:了解下呼吸道感染鲍曼不动杆菌临床分布情况及耐药现状。方法:对2007-2008年我院住院患者下呼吸道标本分离出的470株鲍曼不动杆菌进行回顾性调查及耐药情况统计,用VITEK2Compact对其进行鉴定和对17种常用抗菌药物的药敏实验。结果:470株鲍曼不动杆菌主要以重症ICU病房分布为主,占33.2%,其次为呼吸内科病房(13.2%),神经外科病房(11.0%);2008年鲍曼不动杆菌对常用抗生素的耐药率比2007年都有所提高(P<0.05),除了对氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦和庆大霉素;检测中出现4个月相对分离高峰期。结论:鲍曼不动杆菌以下呼吸道感染为主,对常用抗菌药物耐药现象严重。临床在抗感染治疗时应合理选择抗菌药物。同时应加强医院病房环境和人员手消毒,控制鲍曼不动杆菌在医院内定植和播散。

大肠埃希菌表型分布及其耐药性分析

目的调查临床分离的大肠埃希菌产不同β-内酰胺酶株分布情况、表型特征及耐药现状。方法收集某院2007年7月--2008年7月临床分离大肠埃希菌株，用VITEK2Compact对其进行鉴定和17种常用抗菌药物的药敏试验，以高级专家系统软件（AESTM）验证和解释药敏测试结果。结果421株大肠埃希菌中，表型主要分为三类：产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）株、产获得性青霉素酶株和野生株。产ESBLs菌株共249株，占59．14％，其中67株为CTX-M型；产获得性青霉素酶菌株120株，占28．50％；产碳青霉烯酶菌株8株，占1．90％；野生株47株，占11．16％。产酶总阳性率为88．84％（374／421）。主要标本来源为洁净中段尿，分离174株（41．33％），其次为痰标本101株（23．99％）；而科室来源则比较分散，最多为肾内科39株（9．26％）。各型产酶株的耐药性有很大差异；产ESBLS仍是大肠埃希菌产生耐药性的主要原因，其对大多数β-内酰胺类抗生素的耐药性明显高于产获得性青霉素酶株和野生株（P〈0．05），并对大多数抗菌药物高度耐药。结论大肠埃希菌产酶率非常高，并存在多种耐药表型，其中以产ESBLs最为常见；产酶株的多重耐药和交叉耐药现象十分严重，应高度重视对产酶株的监控，合理使用抗菌药物，以控制耐药株的产生与扩散。

尿路感染大肠埃希菌临床分离及耐药性的动态分析

目的:动态分析尿路感染大肠埃希菌的临床分离及其对常用抗生素的耐药谱,为临床经验治疗提供依据。方法:采用回顾性调查方法统计2005年1月至2008年9月我院尿路感染大肠埃希菌的分离情况,并用最低抑菌浓度(MIC)法测定菌株对21种抗菌药物的敏感性。结果:4年间细菌感染情况,大肠埃希菌占尿路感染所有病原菌的首位(38.5%),临床分离趋势变化不大(P>0.05);783例该类患者中住院患者为85.4%,且老年女性患者占40.6%,人群分布具有统计学意义(P<0.01)。4年间耐药性变化,大肠埃希菌仅对两种头孢类抗菌药物耐药率有显著变化(P<0.01),其中对头孢他啶耐药率有上升趋势,而对头孢吡肟的耐药率呈下降趋势;在余下常用19种耐药率变化不大的抗菌药物中(P>0.05),亚胺培南对该菌的抗菌活性最强,其耐药率为0%,该菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、阿米卡星耐药率稳定在10%以下。对呋喃妥因耐药率<20%,对头孢噻肟、头孢曲松、头孢西丁、氨曲南、庆大霉素、妥布霉素耐药率在20%～60%,但对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、头孢呋辛、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、四环素的耐药率>60%。4年间产ESBLs大肠埃希菌株阳性率为49.4%,变化趋势不大(P>0.05);产ESBLs菌株对17种抗菌药物的耐药率显著高于非产ESBLs菌株。结论:尿路感染患者病原菌以大肠埃希菌为主,并对临床经验治疗的氟喹诺酮类和磺胺类药物高耐药,应引起临床的高度重视。

奈替米星等对老年人肺部感染菌株的敏感性

对２４０株老年人肺部感染临床分离菌用常规纸片法做定性药敏试验及Ｅ－ｔｅｓｔ法检测ＭＩＣ值定量药敏试验，两种方法结果基本一致。数据表明奈替米星（ｎｅｔｉｌｍｉｃｉｎ，ＮＴＬ）对革兰氏阴性杆菌的抗菌活性接近阿米卡星和头孢他啶，优于庆大霉素、妥布霉素与广谱青霉素；ＮＴＬ对葡萄球菌的作用为氨基糖苷类中最强的，也优于氟喹诺酮类与第三代头孢菌素。提示ＮＴＬ可用于老年人肺部革兰氏阴性杆菌与部分葡萄球菌感染。

老年人嗜麦芽窄食单胞菌感染66例耐药特征分析

目的 :探讨嗜麦芽窄食单胞菌感染的易感因素和耐药特征 ,为临床提供预防和治疗依据。方法 :对临床分离的 66株嗜麦芽窄食单胞菌进行分析 ,采用法国梅里埃公司VITEK -60系统进行菌种鉴定及药物敏感试验。结果 :嗜麦芽窄食单胞菌多出现于年长、伴有多种基础疾病和大量使用抗生素的患者。该菌感染以呼吸道感染为主 ,且以混合感染多见。嗜麦芽窄食单胞菌对多种抗生素耐药 ,体外抗菌活性较高的抗生素有复方新诺明、替卡西林 /棒酸、奈替米星 ,耐药率分别为 2 7 8% ,3 3 3 % ,45 5 % ;亚胺培能、氨曲南、头孢噻吩、头孢胺噻肟、头孢西丁、氨苄西林、阿莫西林 /棒酸和呋喃坦啶耐药率超过 90 %。结论 :对于嗜麦芽窄食单胞菌的易感人群 ,在积极治疗基础疾病的同时 ,更应合理使用抗生素 。

老年感染患者中肠杆菌科细菌和非发酵菌菌种分布及其耐药性

目的 :探讨引起老年感染的肠杆菌科细菌和非发酵菌的菌种分布及耐药谱 ,为临床治疗提供依据。方法 :采用法国生物梅里埃公司的全自动细菌分析系统VITEK 6 0进行菌种鉴定及药敏试验 ,对从住院老年患者分离而来的 831株肠杆菌科细菌和 6 70株非发酵菌进行比较分析。结果 :老年人革兰阴性杆菌感染以呼吸道感染最常见。肠杆菌科细菌和非发酵菌是主要病原菌。肠杆菌科细菌以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌为多 ,较多引起泌尿道感染 ;非发酵菌以铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌较多见 ,大多引起呼吸道感染。所测定菌株的耐药程度均较高。结论 :对老年人肠杆菌科细菌和非发酵菌感染 ,应积极开展病原学检查 ,指导合理使用抗菌药。

老年患者葡萄球菌耐药性监测和用药对策

目的 分析老年患者葡萄球菌感染的特点 ,以指导其治疗。方法 利用全自动细菌分析系统鉴定菌种和测定抗生素体外抗菌活性。结果 老年患者葡萄球菌感染以金葡球菌为主 ,占 89.0 % ;98.0 %菌株产 β-内酰胺酶 ,91.7%菌株是耐甲氧西林葡萄球菌 ,85 .9%菌株耐三种以上不同种类抗生素。万古霉素敏感率为 10 0 % ,呋喃妥因为 98.8% ,其他抗生素体外抗菌活性不高。结论 :老年患者预防耐甲氧西林葡萄球菌比治疗有更积极的意义 。

广东省耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型研究

目的分析本地区分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄球菌盒染色体mec(SCCmec)类型。方法利用3套多重PCR体系扩增耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec型特异性位点、共同位点、鉴别位点、内参照位点以及mec基因复合物和ccr基因复合物进行SCCmec分型。结果分离的156株MRSA中,6株MRSA不能分型,可分型率为96.2%。其中,Ⅲ型SCCmec 125株,占83.3%,Ⅱ型SCCmec 11株,占7.3%,Ⅳ、Ⅴ型SCCmec各7株,占4.7%。结论本地区分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌流行携带最多耐药基因的Ⅲ型SCCmec。

毛霉目病原真菌的实验室鉴定及体外抗真菌药物敏感性分析

目的以分子测序为参考,评估形态学、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对毛霉目真菌的鉴定能力,分析毛霉目真菌对两性霉素B、泊沙康唑的体外药敏特点。方法收集2018年1月—2022年2月广东省人民医院25例毛霉病住院患者标本,进行镜检并对培养的菌落行形态学鉴定、质谱鉴定、分子测序和体外药敏试验。结果KOH湿片法阳性率(76%)高于革兰染色法(32%),差异有统计学意义(P<0.05);形态学鉴定可将68%的菌株鉴定到属水平,3株鉴定错误,2株无法鉴定;将所有菌株进行质谱鉴定,单用IVD和RUO数据库鉴定率分别为56%和44%,两库联合可将鉴定率提高为64%。毛霉目真菌对两性霉素B的抑制50%菌株生长的最小抑菌浓度(MIC_(50))为1μg/mL,根霉属相比其他属对两性霉素B表现出较高的MIC值,其中2株MIC>32μg/mL,另2株MIC为8μg/mL;根霉属对泊沙康唑的MIC_(50)为0.5μg/mL,横梗霉属MIC_(50)为4μg/mL,小克银汉霉属MIC_(50)为2μg/mL,有部分菌株表现出较低MIC值,同样亦有部分菌株对泊沙康唑表现出较高的MIC值。结论将传统镜检、培养与质谱技术和分子技术相结合,尽量将毛霉目真菌准确鉴定到种,并积极开展毛霉体外药敏试验,可为临床治疗提供参考依据。

218株肠球菌分离率及体外抗菌活性耐药性分析

目的了解医院感染肠球菌的分离率及耐药性现状。方法采用Pnoehix100全自动细菌分析仪鉴定细菌,药敏试验采用K-B纸片扩散法。结果肠球菌的分离率以呼吸道、尿液及伤口分泌物为主,占总分离率的73.3%,218株肠球菌中以粪肠球菌、屎肠球菌为主,占总分离率的81.2%,其中粪肠球菌占55.5%,屎肠球菌占25.7%。肠球菌对红霉素的耐药率为83.0%;高浓度庆大霉素耐药率为68.3%;氯霉素耐药率为56.9%;对万古霉素、替考拉宁、呋哺妥因敏感率分别为99.7%、99.7%、64.2%。结论肠球菌仍是临床感染标本中的重要致病菌。特别是粪肠球菌和屎肠球菌为主,屎肠球菌在肠球菌群中的耐药率明显高于其它群。万古霉素、替考拉宁对肠球菌的体外抗菌活性最好,但必须合理使用,防止新耐药菌株产生。

老年感染中非发酵菌的重要地位和AMS鉴定、药敏分析

从６１５例老年感染患者的临床标本中分离出４属１２种１９４株非发酵菌，其中假单胞菌株占２／３，绿脓杆菌和不动杆菌为主要病菌。７３．２％的非发酵菌从老年人呼吸道分离，其诱发的感染例数占老年人呼吸道感染者的第２位；泌尿系也分离出非发酵菌，占老年人该系统细菌感染的第４位。药敏分析显示，非发酵菌分离株对丁胺卡那霉素、妥布霉素、复达欣基本敏感，可为首选用药，而对头孢类抗生素耐药株较多。