异基因造血干细胞移植术后血小板减少研究进展

血小板减少是异基因造血干细胞移植术(allo-HSCT)后常见的并发症。此类患者较无血小板减少患者的总生存(OS)率及无病生存(DFS)率降低,死亡率明显增高,与预处理前较低血小板计数、移植物抗宿主病(GVHD)、巨细胞病毒(CMV)感染等因素显著相关,其发病机制涉及骨髓微环境的异常,治疗采用促血小板生成素、间充质干细胞输注等方案。本文将从移植后血小板减少的定义、对预后的影响、相关危险因素、发病机制及治疗方案等最新研究进展作一综述。

离体大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流与利多卡因的影响

目的:研究利多卡因对大鼠心室肌瞬时外向钾电流的影响,探讨利多卡因抗心律失常是否与影响瞬时外向钾电流有关。方法:酶消化法急性分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度利多卡因对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响并做出量效曲线,求得其半数抑制浓度。结果:钳制电压-80mV,刺激电压+70mV条件下,临床相关浓度的利多卡因10μmol/L使瞬时外向钾电流的电流幅值降低(17.9±6.4)%(t=7.986,P<0.01),冲洗后,瞬时外向钾电流能够完全恢复。10,50,100,500,1000,5000μmol/L的利多卡因抑制瞬时外向钾电流呈浓度依赖性,电流抑制率分别为(17.9±6.4)%,(25.2±4.4)%,(30.6±8.6)%,(53.2±4.5)%,(71.8±8.9)%,(94.1±2.2)%,其半数抑制浓度为672μmol/L。结论:利多卡因可以明显阻滞大鼠心室肌的瞬时外向钾电流。

氯胺酮对离体大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

目的研究氯胺酮对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响。方法酶解法分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录Ito,观察50μmol/L氯胺酮对Ito电流-电压曲线以及不同浓度氯胺酮对Ito的影响,并研究氯胺酮对Ito通道动力学的影响。结果钳制电压-40mV,刺激电压+70mV条件下,临床相关浓度的氯胺酮50μmol/L使Ito的电流峰值降低23·4%(P<0·01),冲洗后,Ito能够完全恢复。5、10、50、100、500、1000、5000μmol/L的氯胺酮抑制Ito呈浓度依赖性,电流抑制率分别为(13·8±9·7)%、(17·5±6·7)%、(23·4±8·8)%、(31·5±6·7)%、(63·3±5·5)%、(79·7±2·7)%、(88·9±4·4)%,其半数有效浓度(IC50)为299μmol/L。100μmol/L的氯胺酮对激活曲线没有影响;使Ito的失活曲线明显右移,半数失活电压(V1/2)在给药前后数值分别为(-28·27±0·20)mV和(-25·34±0·27)mV(P<0·01),斜率因子(k)值分别为(3·23±0·46)mV和(3·40±0·55)mV(P>0·05)。结论氯胺酮可明显阻滞大鼠心室肌的Ito,这是氯胺酮延长大鼠心室肌动作电位的机理之一,同时氯胺酮使Ito的失活曲线右移。

盐酸关附甲素对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道(J_(Ca-L))的影响

目的:研究盐酸关附甲素对正常大鼠心室肌细胞L型钙离子通道(I_(Ca-L))的影响。方法:应用膜片钳全细胞记录法,记录关附甲素对I_(Ca-L)的作用并对通道动力学进行初步评价。结果:关附甲素呈浓度依赖性阻滞I_(Ca-L),在25,125,250和1000μmol·L^(-1)时I_(Ca-L)峰值电流密度(去极化至0mV时)分别减少为用药前的81．76%, 77．54%,76．46%和64．77%(P＜0．05)。关附甲素使I_(Ca-L)的I-V曲线上移,但不改变其激活电位、峰值电位。关附甲素呈轻度使用依赖性阻滞I_(Ca-L),对I_(Ca-L)静息态有阻滞作用。关附甲素对I_(Ca-L)激活曲线无明显影响,但使I_(Ca-L)失活后再激活的恢复时间常数(τ)延长,有作用于I_(Ca-L)的失活态的可能。结论:因为关附甲素产生明显I_(Ca-L)阻滞的浓度远大于临床浓度,其对I_(Ca-L)的阻滞作用可能不是抗心律失常的主要作用机制。关附甲素呈浓度依赖性阻滞I_(Ca-L),其作用于L型钙通道的静息态,也有可能作用于失活态。

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的药理作用机制。方法用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录L型钙电流(ICa-L)。结果心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg.L-1使豚鼠心室肌细胞ICa-L分别增加(5±4)%、(21±5)%、(30±5)%、(55±8)%、(76±11)%、(80±9)%,半最大效应浓度(EC50)为(18±6)mg.L-1。心肌肽素50 mg.L-1使ICa-L激活时间(TTP)从(6.7±0.9)m s缩短为(5.9±0.7)m s(P<0.01);使ICa-L电流密度-电压曲线下移,但激活电压、峰电压和I-V曲线的形状不变;激活曲线向负电压方向变化,半数激活电压从(-4.3±0.4)mV减少至(-8.6±0.4)mV(P<0.05);不影响稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。结论心肌肽素浓度依赖性增强豚鼠心室肌细胞ICa-L。

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的:研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的作用机制。方法:用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞,标准全细胞膜片钳技术记录钠电流(INa)。结果:心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg/L使豚鼠心室肌细胞INa分别减少(0±1)%、(6±2)%、(10±2)%、(15±1)%、(22±9)%、(30±6)%,呈浓度依赖性抑制INa。心肌肽素50 mg/L使INa激活时间(TTP)从(2.8±0.7)m s延长至(3.0±0.8)m s(P<0.05);使INa电流密度-电压曲线上移,但不改变激活电位、峰电位、反转电位和I-V曲线的形状;不影响稳态激活曲线、稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。结论:心肌肽素浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞INa,可能是其抗心律失常作用的机制之一。

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞内向整流钾电流(IK1)的影响,探讨心肌肽素抗心律失常的作用机制。方法用急性酶解法分离豚鼠心室肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的心肌肽素对内向整流钾电流的影响。结果在测试电压100mV的条件下,观察豚鼠心室肌细胞IK1内向电流对心肌肽素的影响。10μg/ml心肌肽素使IK1从给药前21.0±6.3pA/pF降低到给药后18.4±5.4pA/pF(P<0.05),抑制率为(20±3)%。50μg/ml心肌肽素使IK1从给药前22.8±5.5pA/pF降低到给药后16.0±3.8pA/pF(P<0.01),抑制率为(32±6)%。50μg/ml心肌肽素没有改变IK1的电流密度电压曲线形态。结论心肌肽素抑制豚鼠心室肌细胞IK1,可能是其抗心律失常作用的机理之一。

高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液对失血性休克大鼠凝血功能的影响

目的观察高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液（高渗晶胶液）对失血性休克大鼠复苏过程中凝血功能的影响。方法16只SD大鼠随机均分为高渗晶胶液复苏组（H组）和复方乳酸钠复苏组（L组），将16只SD大鼠制成失血性休克模型后，分别使用高渗晶胶液和复方乳酸钠各6ml／kg进行复苏，在休克前（T1）、休克后60min（复苏前，T2）及复苏后5min（T3）、30min（T4）、60min（T5）时记录血压，取血浆分别测定出血时间（BT）、凝血时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、白陶土部分凝血活酶时间（KPTT）和纤维蛋白原（Fib）。结果两组在T2～T5时BT、TT、PT、KPTT均明显长于T1时（P〈0．05），Fib明显低于T1时（P〈0．05）；H组在T3～T5时BT、TT、PT、KPTT均明显短于L组（P〈0．05）；两组之间Fib在各时点差异无统计学意义。结论高渗晶胶液对失血性休克凝血功能有影响，使BT、TT、PT、KPTT延长，Fib降低，但尚未超过机体的代偿范围。应用高渗晶胶液进行液体复苏时应在临床推荐剂量内，同时加强凝血功能的监测和控制。

不同时机应用格拉司琼对预防全身麻醉术后恶心呕吐的影响

目的探讨不同时机应用格拉司琼对预防全身麻醉术后恶心呕吐的影响。方法选择择期气管插管全身麻醉手术的患者48例,按应用格拉司琼的不同时间将患者随机分为三组:A组:麻醉诱导完毕即刻;B组:麻醉诱导完毕后1h;C组:术毕拔出气管导管后。记录术后24h内恶心呕吐的发生情况。结果术后恶心发生率及术后呕吐发生率在A组与B组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。C组的术后恶心发生率及术后呕吐发生率明显低于A组与B组(P<0.05)。结论格拉司琼在预防术后恶心呕吐时,建议在术毕应用。

罗比卡因对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的观察罗比卡因对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨其心肌负性肌力作用的机制。方法以急性酶解法获得豚鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录L型钙电流(ICa-L)。结果罗比卡因浓度依赖性阻滞豚鼠心室肌细胞ICa-L,其半最大抑制浓度(IC50)为(212±38)μmol/L,Hill常数为1.15±0.18。罗比卡因100μmol/L使钙电流峰值从(-4.6±1.7)pA/pF减小至(-2.9±0.9)pA/pF(P<0.01),抑制率为(37±3)%;使电流密度-电压曲线上移,但不改变激活电压、最大激活电压和曲线的形状;激活曲线也没有明显改变;使稳态失活曲线向左移,半失活电压由给药前(-11.0±1.0)mV降为给药后(-15.0±0.6)mV(P<0.05);使ICa-L稳态失活后再恢复的时间常数(τ)明显延长,由给药前(260±17)ms增加至给药后(346±32)ms(P<0.05)。结论罗比卡因作用于L型钙通道的失活态,从而抑制了心室肌细胞ICa-L,是其产生负性肌力作用的原因之一。

吸入麻醉药发展历程中的哲学思维

从乙醚用于临床麻醉开始,吸入麻醉药经历了160年的发展,哲学思维贯穿于其中。医学实践是吸入麻醉药不断发展的基础;创造性思维推动吸入麻醉药不断研制开发并服务于临床。理想的吸入麻醉药将来一定问世。

心肌肽素抑制大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流

目的研究新药心肌肽素对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)的影响及其在离子通道水平的作用机制。方法用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的心肌肽素对Ito的影响。结果心肌肽素呈浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞Ito,心肌肽素浓度(mg/L)为10、50、100、250和500时分别使Ito降低(%)4、13、22、32和38。心肌肽素50 mg/L使Ito电流密度-电压曲线下移,但不改变曲线的形状,也不改变Ito稳态激活曲线。结论心肌肽素抑制大鼠心室肌细胞Ito,可能是其抗心律失常作用的机制之一。

利多卡因对离体大鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响

目的研究利多卡因对大鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响,探讨局麻药毒性反应中利多卡因导致心率变慢是否与抑制Ikl有关。方法酶消化法急性分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度利多卡因对大鼠心室肌细胞内向整流钾电流的影响并做出浓度效应曲线,求得其半数抑制浓度。结果保持电压-40 mV,钳制电压-120 mV条件下,局麻药毒性反应浓度的利多卡因100μmot／L使Ikl的电流幅值降低(21．1±7．4)％(P<0．05),但不改变Ikl翻转电压以及电流-电压曲线的形状;冲洗后,Ikl能够完全恢复。500,1000,5000μmoL／L的利多卡因抑制Ikl电流呈浓度依赖性,电流抑制率分别为(32．4±5．7)％,(71．8±8．9)％,(84．5±4．9)％,其IC50为1426．4μmoL／L。结论局麻药毒性反应中,利多卡因呈浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞Ikl,可能延长动作电位时程导致心率变慢。

围术期血液管理减少心脏外科手术中输血

目的回顾性分析围术期血液管理应用于心脏外科手术中减少输血的临床效果。方法本研究为回顾性研究,烟台毓璜顶医院2015年7月至2016年5月和2016年8月至2017年4月接受开胸心脏手术的患者106例,2015年7月至2016年5月的患者为对照组(n=49),采用常规管理;2016年8月—2017年4月的患者为研究组(n=57),采用围术期血液管理。比较两组术前基本信息、术中出血量和输血量,评估应用围术期血液管理的临床效果。结果两组术前红细胞、血红蛋白、血小板水平差异无统计学意义。研究组术中出血量明显少于对照组[(565.8±178.6)ml vs(734.1±278.7)ml,P<0.05];研究组输异体红细胞比例明显低于对照组(1.8%vs 28.6%,P<0.05);研究组输血浆比例明显低于对照组(10.5%vs 40.8%,P<0.05);两组血小板和冷沉淀使用比例差异无统计学意义。结论围术期血液管理应用于心脏外科手术可以有效减少术中出血量,降低异体红细胞和血浆使用率。

恶性血液病患者异基因造血干细胞移植后骨髓T淋巴细胞亚群重建的动态观察

目的研究恶性血液病患者经异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后骨髓免疫重建中T淋巴细胞的重建规律及其与外周血中T淋巴细胞重建的差异。方法本研究采用前瞻性研究设计。收集2015年9月至2017年1月在我院血液科行allo-HSCT的41例恶性血液病患者的骨髓及外周血标本,收集同期7名健康供者的骨髓及外周血标本作为对照样本。用流式细胞术分析移植前和移植后15、30、60、90、180 d时的T淋巴细胞亚群分布,包括CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、辅助性T细胞(Th)1、Th2,并用Luminex技术检测Th1相关细胞因子白细胞介素2受体(IL-2R)、白细胞介素18(IL-18)水平。结果恶性血液病患者在移植后15 d和30 d时骨髓中CD4+T淋巴细胞比例均低于对照组(P均<0.05),至移植后180 d仍未见回升;CD8+T淋巴细胞比例在移植后早期(15、30 d)低于对照组(P均<0.01),60 d时恢复至正常水平;骨髓中CD4+和CD8+T淋巴细胞比例整体水平均低于外周血中水平(P=0.001、0.002)。恶性血液病患者在移植后15、30、60、90、180 d时骨髓中Th1比例均高于对照组(P均<0.05),且整体水平高于外周血中水平(P=0.006);骨髓中Th2比例在移植后90 d内均无明显变化,在180 d时高于对照组(P=0.034),但整体水平与外周血中水平无明显差异(P>0.05)。骨髓中CD4+/CD8+T淋巴细胞比值在移植后逐渐下降,至移植后180 d时低于对照组(P=0.040);而骨髓中Th1/Th2比值在移植后90 d内各时间节点(15、30、60、90 d)均高于对照组(P均<0.01),180 d时与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。恶性血液病患者骨髓和外周血中IL-2R水平在移植后15、30、60、90 d均高于对照组(P均<0.05);IL-18水平在移植后15、30、60 d高于对照组(P均<0.05),但移植后90 d时仅外周血中水平与对照组差异有统计学意义(P=0.021);骨髓与外周血中IL-2R和IL-18整体水平均无明显差异(P均>0.05)。结论恶性血液病患者allo-HSCT后,骨髓中各T淋巴细胞亚群的重建规律不同,且与外周血中有所差异。

费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病ABL激酶区突变的特征分析及其临床意义

目的:探讨酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor, TKI)耐药的费城染色体阳性急性淋巴细胞白血病(philadelphia chromosome positive acute lymphoblastic leukemia, Ph +ALL)ABL激酶区突变的特征及其临床意义。方法:回顾性分析99例Ph +ALL患者临床特征、预后、分子遗传学以及ABL激酶区突变的特征。结果: 99例Ph +ALL患者共发生TKI耐药38例,发生耐药的中位时间为治疗后8个月。发生TKI耐药的患者5年总生存率(overall survival, OS)和无复发生存率(relapse free survival, RFS)均较未耐药者低[(34.2±8.0)% vs (61.4±6.7)%, P =0.044;(6.7±4.5)% vs (68.6±6.8)%, P <0.001]。32例患者于移植前发现TKI耐药,13例接受异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, allo-HSCT);移植组与未移植组耐药后1年OS差异有统计学意义[(68.4±13.1)% vs (17.8±9.2)%, P < 0.001 ],RFS差异无统计学意义。38例患者中检测到ABL激酶区10个位点12种突变,突变比例为52.63%(20/38),其中T315I突变比例最高,占突变患者的45.00%(9/20),其次为E255K/V [40.00%(8/20)]和Y253H/F [15.00%(3/20)]。结论: Ph +ALL发生TKI耐药的主要机制为ABL激酶区突变,最常见的突变为T315I突变;发生ABL激酶区突变后,allo-HSCT仍是较为理想的治疗选择。

初中地理培养学生探究能力的有效方法

素质教育理念的提出促使初中地理教学的人才培养目标发生了改变,要求不仅要重视地理知识的传授效率,也要有效培养学生的探究能力,使学生主动学习、学会学习。本文将具体阐述初中地理教师培养学生探究能力的几种方法,并以案例阐述师生之间的新互动形式,即以导学案设计探究任务、以小组合作推进探究活动、以实践拓展提升探究能力。开展探究式教学活动的关键在于激发出学生的学习主动性,教师不能直接告诉学生最终知识结论,而是要支持学生参与问题讨论、解题实践活动,且要支持学生从不同维度寻找解决地理问题的方式方法。

大学生急救复苏知识教育探讨与研究

目的通过调查了解我院大学生对急救复苏这门课的认识以及对急救知识的掌握程度,为进一步加强急救知识的教育、教学提供科学的依据。方法采用自行设计的问卷对我院三年级的医学类与非医学类各240名大学生进行调查,了解他们对急救知识的了解程度及对开设这门课的认识。结果对医学生的调查显示,97.5%的大学生认为应该尽早开设这门重要的课程,但有2.5%的医学生认为急救复苏知识在大学仅可作为了解内容,真正的学习可以在工作的过程中进行;而对非医学生的调查显示,3%的大学生认为自己没必要学习这门课程。另外,从所有被调查学生对急救复苏知识的掌握程度看,许多学生对其掌握有一定的欠缺。结论应大力加强普及大学生急救复苏知识的教育;并对教学方法给以改进。