黑线毛足仓鼠实验动物化及部分生物学特性观察

目的将宠物黑线毛足仓鼠实验动物化，扩大实验仓鼠的种质资源。方法按啮齿动物分类鉴别方法鉴定属种；按照实验动物标准化要求进行人工繁育，观察个体生长发育、繁殖、解剖学特点，称重测定主要脏器、检测血液学和血液生化学指标。结果经外形、头骨测定和染色体检查，符合仓鼠亚科毛足属的黑线毛足仓鼠的特征。黑线毛足仓鼠在普通级环境中饲喂全价营养颗粒饲料能长期同居繁殖，生长发育良好。血液学和血液生化学检测除少数指标外，两性间差异无显著意义。结论经过人工繁育和标准化，黑线毛足仓鼠已初步达到实验动物化。生长发育、繁殖的观察和主要脏器称重、血液学和血液生化学指标检测为其在生物医学研究领域里的应用提供参考。

雄黄对大鼠和兔的胚胎/胎仔的发育毒性

目的 研究雄黄对孕大鼠和孕兔胚胎/胎仔发育的影响，探讨雄黄的生殖毒性。方法 孕大鼠于妊娠第6~第15天ig给予雄黄125，250和550 mg·kg-1，每天1次，共10 d。阳性对照组孕大鼠于妊娠第10天im给予环磷酰胺10 mg·kg-1，正常对照组大鼠给予等容量的0.5%羧甲基纤维素钠，第20天处死解剖；孕兔于妊娠第6~18天ig给予雄黄31.3，62.5和125 mg·kg-1，阳性对照组孕兔从妊娠第6天~第18天ig给予沙利度胺200 mg·kg-1，每天1次，共13 d，第29天处死解剖。观察给药前后临床表现和毒性症状，处死后称体质量及各雄黄组子宫、胎仔和胎盘总质量，观察并记录胎仔外观、着床数和活胎数，测量胎仔顶臀长和尾长，并计算晚期胚胎流失率。胎仔用茜素红染色观察骨骼，用Bouin液固定检查内脏。结果孕大鼠雄黄125，250和550 mg·kg-1组没有明显的母体毒性反应；与正常对照组比较，雄黄550 mg·kg-1组胎仔体质量、尾长和顶臀长有显著差异（P〈0.05），子宫连胎质量、子宫净质量、胎仔总质量、胎盘总质量、平均胎仔数、活胎率和晚期胚胎流失率等无显著差异；胎仔外观、骨骼和内脏均未见畸形。孕兔雄黄62.5和125 mg·kg-1表现明显临床毒性反应，孕兔31.3，62.5和125 mg·kg-1组子宫连胎质量、子宫净质量、胎仔总质量、胎盘总质量、活胎率、胎仔体质量、尾长和顶臀长均随着雄黄剂量的增加而降低，晚期胚胎流失率随着雄黄剂量的增加而上升，其中雄黄125和62.5 mg·kg-1组活胎率分别为45.76%和72.73%，与正常对照组活胎率（90.90%）比较，有显著差异（P〈0.01）。但在兔胎仔的外观、骨骼和内脏检查中未发现有畸形。结论 兔比大鼠对雄黄的毒性更敏感，表现为母体的毒性反应、活胎率下降和晚期胚胎流失率上升。未发现雄黄对大鼠和兔有致畸作用。

悬液芯片技术在实验兔病原体检测中的应用

目的 应用悬液芯片技术实验兔几种病原体的自然感染情况.方法 从8家实验兔生产单位采购80只实验兔（7家普通级,1家清洁级）,运用悬液芯片技术进行微量、快速、高通量的血清学检测.结果 各单位实验兔病原体感染较为普遍,其中轮状病毒（ROTA）和呼吸道鞭毛杆菌（CARB）的抗体阳性率分别高达72.5％和80％、;呼肠弧III型病毒-（REO-3）、脑胞内原虫（ECUN）和泰泽氏病原体（CPIL）的抗体阳性率为21.25％、17.5％和10％;而清洁级实验兔只存在脑胞内原虫（ECUN）和泰泽氏病原体（CPIL）的感染,所有动物均不存在淋巴脉络丛脑膜炎病毒（LCMV）和弓形虫（TOXO）感染.结论 应用悬液芯片技术可以快速检测实验兔病原体.

雄黄遗传毒性的研究

目的评价雄黄的急性毒性和遗传毒性,为临床提供毒理学依据。方法急性毒性:设3.50、2.98、2.53、2.15、1.83、1.55g/kg剂量组灌胃,对照组给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠溶液(Sodium Carboxymethyl Cellulose,CMC)。Ames试验:设雄黄浸出液原液、1:1、3:1、7:1和15:1稀释作为中、低、次低和最低剂量组,各剂量组均加不同浓度的雄黄浸出液0.5ml,观察加或不加S9混合物对TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535菌株的影响。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验:设1、0.5、0.25g/kg三个剂量组,2次灌胃后,24h制片,镜检。CHL细胞染色体畸形试验:设雄黄浸出液1:15、1:31、1:63稀释液三个剂量,加药后将细胞放入CO2培养箱中37℃培养24-48小时。终止培养前4小时,每只细胞培养皿中加入秋水仙素溶液0.1ml,收获细胞,制染色体标本、镜检。结果急性毒性试验表明:本次实验雄黄的LD50为2.069g/kg。Ames试验:为阴性结果,雄黄有抑制细菌生长的作用。雄黄对小鼠骨髓嗜多染红细胞有致突变作用和对CHL细胞染色体有致畸变作用。结论本次试验中该批次的雄黄有一定的遗传毒性。

雄黄遗传毒性的研究

目的评价雄黄的急性毒性和遗传毒性，为临床提供毒理学依据。方法急性毒性：设350、2．98、253、2．15：1．83、1．55g／kg剂量组灌胃，对照组给予等体积的0．5％羧甲基纤维素钠溶液（Sodium Carboxymethyl Cellulose，CMC）。Ames试验：设雄黄浸出液原液、1：1、3．1、7：1和15：1稀释作为中、低、次低和最低剂量组，各剂量组均加不同浓度的雄黄浸出液0．5ml，观察加或不加S9混合物对TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535菌株的影响。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：设1、0．5、0．25g／kg三个剂量组，2次灌胃后，24h制片，镜检。CHL细胞染色体畸形试验：设雄黄浸出液1：15、1：31、1：63稀释液三个剂量，加药后将细胞放入C02培养箱中37℃培养24-48h。终止培养前4h，每只细胞培养皿中加入秋水仙素溶液0．1ml，收获细胞，制染色体标本、镜检。结果急性毒性试验表明：本次实验雄黄的LD50为2069g／kg。Ames试验：为阴性结果，雄黄有抑制细菌生长的作用。雄黄对小鼠骨髓嗜多染红细胞有致突变作用和对CHL细胞染色体有致畸变作用。结论：本次试验中该批次的雄黄有一定的遗传毒性。

健脾消渴方改善2型糖尿病大鼠药效学研究

目的评价健脾消渴方对2型糖尿病大鼠的药效,并探讨其可能的作用机制。方法40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、健脾消渴方组及盐酸二甲双胍组,每组10只,STZ+高脂饮食建立2型糖尿病大鼠模型,给予相应药物,持续4周。实验结束后取材,考察大鼠空腹血糖变化情况;ELISA法检测大鼠血清中白细胞介素-1(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、D-氨基酸氧化酶(D-amino acid oxidase,DAO)、D-乳酸含量;考察血清血脂四项[甘油三酯(triglycerides,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)]含量;HE染色法观察各组大鼠胰腺及回肠的组织形态学改变;免疫荧光法检测大鼠回肠L细胞的免疫荧光法检测大鼠回肠L细胞的胰高糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)阳性表达;Western blotting法检测大鼠结肠组织中紧密连接蛋白(occludin)、闭锁小带蛋白-1(zonula occludens-1,ZO-1)、黏蛋白2(Muc2)蛋白相对表达。结果健脾消渴方可有效降低2型糖尿病大鼠的空腹血糖,下调血清中IL-1β、TNF-α含量,上调IL-10含量,抑制DAO、D-乳酸含量;同时,显著性下调TG、TC、LDL-C含量,但在提高HDL-C含量方面上仅具有趋势性;此外,健脾消渴方可改善大鼠胰腺及回肠损伤,提高GLP-1阳性表达,并有效降低2型糖尿病大鼠结肠occludin、ZO-1、Muc2蛋白相对表达。结论健脾消渴方对2型糖尿病大鼠具有较好的治疗效果,其作用可能与改善血清炎症、调节血脂,减轻肠道功能损伤,改善肠道屏障通透性与保护肠道屏障生理结构等作用有关。

健脾消渴方干预2型糖尿病大鼠的生物学基础研究

目的研究健脾消渴方干预2型糖尿病大鼠尿液的内源性代谢特征及潜在生物学基础。方法利用链脲佐菌素+高脂饮食复制2型糖尿病大鼠模型,健脾消渴方干预4周后,采用LC-MS分析系统进行尿液差异代谢物的挖掘及生物信息学分析。结果健脾消渴方干预2型糖尿病主要包括二十二碳六烯酸、色氨酸、亮氨酸、硫酸去甲肾上腺素、12-epi-LTB4等60个潜在生物标志物,涉及了多种氨基酸代谢、甘油磷脂代谢、脂肪酸代谢等多条核心通路。结论基于LC-MS技术的代谢组学研究发现60个潜在生物标志物及对应通路,为健脾消渴方干预2型糖尿病研究提供物质基础及可能分子机制。

高泽斯莉化妆品消费者市场分析与实现探讨

近些年来随着社会整体水平的提高,中等收入人群的大量增加,使得人们日益追求高质量的生活水平,越发注重自身的现象与打扮.本文从背景与意义分析高泽斯莉化妆品品牌的消费者市场,旨在促进高泽斯莉品牌的发展,创新营销模式,针对不同需求的消费者提供不同的服务,发展市场,提高市场占有率.

雄黄灌胃给药对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的研究

目的观察中药雄黄灌胃(ig)给药对大鼠生育力与早期胚胎发育的毒性影响。方法 SD雌雄大鼠分为阴性对照组,雄黄低、中、高剂量组4组,雄性大鼠连续ig给药6周后与连续给药2周的雌鼠交配,每天ig给予批号为H2007052401雄黄250、125和50 mg.kg-13个剂量。雄性给药至交配全部结束,雌性给药至妊娠第6天。雄鼠交配后处死,雌鼠妊娠第15天处死,计算黄体数、着床数、活胎数等,并与阴性对照组比较。结果雄黄各剂量组动物的交配率、受孕率、活胎率、着床前后丢失率、黄体数、着床数以及生殖脏器方面与阴性对照组比较均未有显著差异;病理组织学方面:所有高剂量组及对照组动物的睾丸、附睾、卵巢未见明显异常。结论批号为H2007052401雄黄在本实验中对大鼠生育力和早期胚胎发育没有明显的毒性作用。

雄黄可溶性砷和价态砷与小鼠急性毒性关系的研究

目的:观察单次ig给药不同批号的雄黄混悬液后小鼠的中毒反应及死亡情况,用于初步评价受试物毒性,探讨不同批号的雄黄中可溶性砷和价态砷与小鼠急性毒性间的关系。方法:对3个不同批号的雄黄进行总砷含量、可溶性砷和价态砷的测定,根据预试验结果确定不同批号雄黄的最高剂量。将不同批号的雄黄混悬液分别按0.85依次递减的比例单次ig给药,观察给药后各组小鼠中毒反应及死亡情况,连续观察14 d,通过SPSS统计软件分析得半数致死量(LD50)及其95%的可信区间。结果:3个批号的雄黄总砷含量分别为95.5%,96.0%,94.8%,可溶性砷分别为3.32%,5.23%,6.73%,价态砷分别为1.39%,3.26%,4.36%,测得LD50分别为2.069 g·kg-1,1.319 g·kg-1,1.100 g·kg-1。用2倍LD50的雄黄上清液给药,结果小鼠全部死亡。结论:雄黄的毒性存在于可溶性部分,可溶性砷和价态砷含量与小鼠急性毒性间呈高度相关关系,LD50与可溶性砷和价态砷呈负相关关系,即可溶性砷和价态砷含量越高毒性越大,与总砷含量的相关性差。

小鼠胚胎毒性试验方法的建立及在评价中药早期胚胎毒性中的应用

目的建立一种快速、早期的中药胚胎毒性的快速检测技术,用于中药的早期胚胎毒性筛选。方法 (1)血清制备:SD大鼠随机分为阳性对照组4只,正常组4只,雄黄组、朱砂组各3只。阳性对照组给予环磷酰胺10 mg/kg,正常组用0.5%CMC-Na灌胃给药,雄黄组和朱砂组分别将雄黄和朱砂(用0.5%CMC-Na稀释)按1.0 ml/100 g灌胃给药。末次给药后1 h,无菌取血并取上清血清;(2)细胞采集:4～6周雌性C57小鼠,用妊娠孕马血清(PMSG)腹腔注射,48 h后腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(h CG),合笼交配。第2天检查阴栓,用M2培养液将2细胞胚胎从输卵管中冲出,用M16培养液进行培养;(3)毒性试验:在胚胎2细胞阶段加入正常组、阳性对照组、雄黄组及朱砂组不同稀释比血清,观察囊胚成活率。结果在1∶4、1∶16、1∶32的稀释比下,正常组的囊胚率为60.00%、73.33%、93.33%,高于阳性对照组的46.67%、60.00%、66.67%;朱砂组血清各个稀释比的囊胚率均未达到80%;除1∶512这个稀释比外,雄黄组血清各个稀释比2细胞胚胎的囊胚率均未达到80%。结论 (1)朱砂和雄黄的大鼠含药血清在一定浓度时,对小鼠2细胞胚胎的生长发育有一定的影响,呈现中药的胚胎毒性;(2)小鼠胚胎2细胞用于中药的早期胚胎毒性筛选方法是可行的。

泽漆汤对肺癌原位模型小鼠的抑制作用

目的:建立小鼠肺癌原位模型,用泽漆汤干预模型小鼠以观其抑瘤功效,并探索潜在作用机制。方法:通过肺内注射1×10^5个LLC-luc细胞建立非小细胞肺癌原位小鼠模型,用泽漆汤(0. 171 g·m L^-1)或生理盐水对模型小鼠进行每日灌胃,连续35 d,观察小鼠的外观表现(精神、毛发、食欲等),生存期及泽漆汤抑瘤效果;每周活体成像检测小鼠肺内荧光信号强弱。流式细胞术检测模型小鼠脾脏中NK细胞数量,CD107α实验检测泽漆汤用药后小鼠脾脏中NK细胞脱颗粒情况。采用Kromasil 1005 C18色谱柱,以0. 025%磷酸-乙腈梯度洗脱,流速1. 0 m L·min^-1,柱温35℃,检测波长265 nm,建立泽漆汤指纹图谱并采用中国药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012版)对10批样品指纹图谱进行评价以完成对泽漆汤的质量控制。结果:泽漆汤能够明显抑制肺癌原位模型小鼠肺部荧光信号(P <0. 05,P <0. 01),延长小鼠生存期(P <0. 01);泽漆汤干预后小鼠体内肿瘤中NK细胞显著增多(P <0. 01),CD107α脱颗粒也显著增加(P <0. 01)。并且,对泽漆汤指纹图谱的相似度评价结果显示,10批泽漆汤水提液的指纹图谱相似度均≥0. 9,表明不同批次间差异较小。结论:泽漆汤可能通过上调小鼠体内NK细胞数量,增强其脱颗粒能力,从而达到抑制小鼠体内肿瘤生长,延长其生存期的作用。泽漆汤HPLC指纹图谱相似度评价可反映泽漆汤质量的稳定性,为后续研究提供用药基础。

芦荟苦素对非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究芦荟苦素诱导人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) A549细胞发生凋亡,从而抑制其增殖的作用机制。方法:取对数生长期的A549细胞,用细胞计数试剂(cell counting kit,CCK-8)检测考察不同浓度的芦荟苦素(0,2,4,8,16,32,64,128μmol·L^-1)对A549细胞增殖的影响,5μmol·L-1的顺铂作为阳性对照。用结晶紫染色测定芦荟苦素(0,16μmol·L^-1)对A549细胞克隆形成的数目以及克隆形成的大小的作用;磷脂酰丝氨酸结合蛋白V/碘化丙啶(annexin V/propidium iodide,PI)凋亡试剂盒染色检测芦荟苦素对A549细胞凋亡的影响;赫斯特(Hoechst)染色检测细胞凋亡核固缩现象;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测芦荟苦素对A549细胞中的B细胞淋巴瘤-特大型蛋白(B-cell lymphoma-extra large,Bclxl),B细胞淋巴瘤-特大型/B细胞淋巴瘤-2联合死亡促体(Bcl-xl/Bcl-2 associated death promoter,Bad),裂解半胱天冬酶-3[cleaved-Caspase3,cl-Caspase-3(Asp175)],半胱天冬酶-3(Caspase-3),裂解核糖聚合酶(cleaved-poly ADP-ribose polymerase,clPARP),核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)凋亡相关蛋白表达的影响。体内实验将5周龄裸鼠皮下接种2×10^6个A549细胞,并随机分为用药组和空白组,连续4周每天分别进行芦荟苦素或生理盐水腹腔注射,每周测量裸鼠肿瘤体积和小鼠体质量,并观察裸鼠的外观表现(精神、毛发、食欲、睡眠等)。结果:芦荟苦素呈浓度依赖性抑制A549细胞增殖及克隆形成的数量和大小(P <0. 05)。经芦荟苦素处理后,A549细胞凋亡的数量以及细胞发生核固缩的现象明显增加(P <0. 01),同时,芦荟苦素还明显下调了凋亡相关蛋白Bcl-xl的表达(P <0. 05),增加Bad蛋白表达(P <0. 01),同时还明显升高了cl-PARP(P <0. 01)和cl-Caspase-3(P <0. 05)表达水平。此外,在体内,芦荟苦素可明显缩小小鼠皮下肿瘤的体积,减轻肿瘤质量,并且小鼠外观表现优于空白组。结论:芦荟苦素可能通过诱导A549细胞凋亡从而达到抑制NSCLC的作用,并且用药安全。

高泽斯莉化妆品营销模式分析与选择

近年来,中国经济发展迅速,化妆品市场消费潜力巨大,中国化妆品消费量也迅速增加。 文章从营销模式切入,对高泽斯莉的营销模式进行分析与选择,提出相应的品牌发展对策,旨在推动高泽斯莉品牌进入市场的步伐。