四川地区健康人群快速血栓弹力图参考区间的建立

目的测定四川地区健康人群快速血栓弹力图(r-TEG)数据,确立符合该地区特点的正常值参考范围,并与试剂厂家提供的正常值进行比较。方法收录2017年8-10月在四川大学华西医院体检的健康成年人群,进行r-TEG检测,并对凝血反应时间(ACT和R)、凝血形成时间(K)、凝固角(Angle)、最大振幅(MA)、纤维蛋白溶解率(LY30和EPL)等参数进行分析。结果共纳入153名成人体检健康者,使用r-TEG方法分析得出各参数正常参考值分别为ACT:89~121s,R:25~45s,K:50~155s,Angle:64~81deg,MA:51~71mm,LY30:0~3.7,EPL:0~3.7。9.2%(14/153)的健康成人至少1项参数超出厂家提供的正常范围。男女性别间分组比较,男性参考范围:ACT:89~126s,R:25~48s,K:50~171s,Angle:59~81deg,MA:47~70mm,LY30:0~3.7;EPL:0~3.7,女性参考范围:ACT:89~121s,R:25~45s,K:50~111s,Angle:70~81deg,MA:55~71mm,LY30:0~4.3,EPL:0~4.3,除了LY30和EPL外,其余各项参数间的差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论实验室有必要建立符合本地区人群特点的r-TEG正常参考范围。

两种床旁实验凝血仪在换瓣术后抗凝监测中的临床应用

目的探讨两种床旁实验(POCT)凝血仪(国产qLabs和进口Coagu Chek XS)与常规实验室凝血仪(Sysmex CA7000)间INR结果的可比性及相关性。方法选择146例长期口服抗凝药物的患者,分别应用qLabs和Coagu Chek XS检测手指末梢血INR,Sysmex CA7000检测静脉血,将INR值进行相关性和Bland-Altman分析。结果三种仪器间(qLabs,Coagu Chek XS,Sysmex CA7000)INR结果的相关性均良好,相关系数R均大于0.95(分别为0.977,0.958,0.963);其结果差异较小,INR差值均<0.5 INR,在可接受范围内。结论国产仪器qLabs和进口仪器Coagu Chek XS检测结果一致性较好,可供医院设备科选用。

纤维蛋白(原)降解产物与D-二聚体最适比例可信区间的探讨

目的探讨纤维蛋白(原)降解产物(FDP)与D-二聚体(D-D)最适比例可信区间,以发现干扰FDP和(或)D-D检测的潜在影响因素。方法回顾性分析该院2019年1月至2020年12月凝血七项检测结果中FDP和D-D均在其线性范围内(FDP:2.5~80μg/mL;D-D:0.16~5.16μg/mL FEU)的报告共206879份,作为探索FDP/D-D最适比例可信区间的建立组,根据D-D水平分为以下3个组别:<0.5μg/mL FEU组、0.5~<2.5μg/mL FEU组和≥2.5μg/mL FEU组,建立3个组别FDP/D-D最适比例可信区间。选取该院2021年3月进行FDP和D-D检测的样本1022例,作为最适比例可信区间验证组,通过稀释法和更换验证试剂法来定义验证数据中的阳性样本和阴性样本,采用效能指标(灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值)评价该可信区间在验证数据中发现阳性样本和阴性样本的能力。结果当D-D<0.5μg/mL FEU时,FDP/D-D的最适比例可信区间为10.40~40.00;当D-D为0.5~<2.5μg/mL FEU时,FDP/D-D的最适比例可信区间为1.82~7.25;当D-D≥2.5μg/mL FEU时,FDP/D-D的最适比例可信区间为1.47~3.94。验证组中位于线性范围以内的样本共767例,根据各组别FDP/D-D可信区间进行判断,3个组中分别有60.00%(3/5)、4.37%(25/572)和8.95%(17/190)样本FDP/D-D异常,其中分别有100.00%(3/3)、24.00%(6/25)和29.41%(5/17)样本为阳性样本。线性范围以内数据总体灵敏度为73.68%(14/19),特异度为95.86%(717/748),阳性预测值为31.11%(14/45),阴性预测值为99.31%(717/722)。验证组中有255例样本超过检测范围,根据D-D≥2.5μg/mL FEU时的FDP/D-D最适比例可信区间,该群样本中有26.27%(67/255)样本FDP/D-D异常,异常的样本中有83.58%(56/67)的阳性样本,16.42%(11/67)阴性样本;对于线性范围以外的结果即使FDP/D-D正常,仍有35.11%(66/188)的阳性样本漏检。结论联合检测FDP和D-D,同时结合FDP/D-D更有利于辨别两者检测结果的准确性。

凝血相关的实验室指标对急性胰腺炎患者的病情和预后有较高预测价值

目的探讨凝血功能相关指标与急性胰腺炎患者病情严重程度和预后相关性,寻找可以用于早期预测和/或动态监测急性胰腺炎预后的实验室指标。方法回顾分析2017年12月1日~2018年11月30日在四川大学华西医院就诊的急性胰腺炎患者(入院距发病时间<72 h)的临床资料,分析患者入院时和住院期间的凝血功能相关指标的变化与急性胰腺炎预后的相关性。结果共收录1260例急性胰腺炎患者,根据纳入和排除标准,最终有175例纳入本研究,其中52例为重症急性胰腺炎,12例患者死亡。Logistic回归分析提示,入院时检测vWF:Ag、PT、PC、ATⅢ和D-dimer指标可作为预测重症急性胰腺炎和/或死亡的独立危险因素;但是动态监测病程中的各指标能提高预测价值,尤其是vWF:Ag_(max)、PT_(max)、APTT_(max)、TT_(max)、FIB_(min)、D-dimer_(max)、PLT_(min)、PC_(min)、PLG_(min)、ATⅢ_(min)以及以上各指标的变化值(△)是预测重症急性胰腺炎和/或死亡的独立危险因素。ROC分析提示,动态监测各指标的变化值,尤其是△vWF:Ag、△PT、△APTT、△FIB、△TT、△D-dimer、△PLT、△PC、△ATⅢ、△PLG可作为预测重症急性胰腺炎和/或死亡的有效实验室指标(AUC0.63-0.84)。结论急性胰腺炎患者存在血管内皮损伤、凝血功能紊乱。入院时检测vWF:Ag、PT、PC、ATⅢ和D-dimer指标可作为预测重症急性胰腺炎和/或死亡的独立危险因素,在患者病情中动态监测vWF:Ag、PT、APTT、TT、FIB、D-dimer、PLT、PC、ATⅢ、PLG以及各指标的变化情况会进一步提高预测价值。

尿液分析系统复检规则的建立及流程优化

目的建立尿液分析流水线的复检规则并优化检验流程。方法通过由UF-1000i尿沉渣分析仪、AX-4280干化学分析仪和R/S-500尿沉渣分析工作站组成的尿液分析系统检测3 579例门诊和住院尿液标本,根据UF-1000i分析仪的白细胞计数、红细胞计数、管型结果及AX-4280分析仪的白细胞、隐血、蛋白质定性结果建立复检规则,再通过与R/S-500工作站的镜检结果制订优化措施。结果共制定64条复检规则,其中"建议镜检"规则38条,"无需镜检"规则26条。用R/S-500工作站进行镜检的复检率为29.0%,假阴性率为4.7%,假阳性率为27.2%;29.0%复检标本中,共优化了16.0%(571/3 579),仅13.0%(467/3 579)标本需用R/S-500计数复检。结论建立了尿液分析系统的复检规则,优化了流程,提高了工作效率。

构建基于互联网的临床基础检验学多元化教学体系

《临床基础检验学》是医学检验技术专业学生重要的专业课。这门学科的传统教学和考核方式存在较多弊端,学生课堂参与性较差,无法将理论知识和临床实际有机结合,造成学习效果、分析问题能力较差。构建以互联网为依托的多元化教学模式,采用以互联网和移动设备为载体的教学和考核模式,提高学生学习积极性,增强学生临床思维和科研能力,培养真正能够胜任检验工作、更好服务于临床的实用型人才。

抗凝血酶Ⅲ评价HBV感染相关慢加急性肝衰竭患者疾病进展和28天死亡率的应用价值

目的探讨抗凝血酶Ⅲ(antithrombinⅢ,ATⅢ)在评价HBV感染相关急性失代偿肝硬化(acute decompensated cirrhosis,AD)患者和慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure,ACLF)患者疾病进展多器官系统衰竭和28 d死亡率中的临床应用价值。方法回顾性收集2011年1月至2018年7月于四川大学华西医院就诊的447例未使用人工肝治疗的HBV感染患者,其中ACLF患者269例、AD患者178例,收集患者临床信息及实验室指标,采用Sysmex CS5100血凝仪发色底物法检测ATⅢ活性。结果AD组中住院进展为ACLF的患者基线ATⅢ活性显著低于未进展组[36.2%(22.7%,49.3%)vs 47.8%(38.3%,61.4%),P=0.021],ATⅢ活性用于鉴别诊断ACLF与AD的ROC曲线下面积(AUC ROC)为0.906。ACLF患者中,ATⅢ活性与MELD评分(rs=-0.344,P=0.000)、CLIF-C ACLF评分(rs=-0.311,P=0.000)和CLIF-C OF评分(r s=-0.315,P=0.000)呈负相关;ATⅢ活性在凝血功能衰竭及肾衰竭患者中显著降低;Kaplan-Meier生存分析显示,ATⅢ活性≥20.1%组患者的平均生存时间明显高于ATⅢ<20.1%组患者(22 d vs 17 d,P=0.001)。治疗5 d后28 d死亡组患者ATⅢ活性也较存活组明显降低[17.8%(12.6%,25.2%)vs 22.6%(18.1%,30.9%),P=0.020]。结论基线ATⅢ活性水平可作为临床医生鉴别诊断ACLF和失代偿性肝硬化的重要指标,同时也可作为评估ACLF患者短期死亡风险的重要指标之一,密切监测血浆ATⅢ活性有助于准确评估AD和ACLF患者疾病状态。

芦山与汶川地震中伤员血浆纤维蛋白原水平的研究

目的探讨芦山与汶川地震所致伤员及不同救治时间伤员血浆纤维蛋白原(Fbg)水平的变化。方法选择2013年4月20日-24日入院治疗的276例芦山地震伤员和2008年5月13日-17日入院治疗的503例汶川地震伤员为研究对象,按灾后入院时间分别分为5组,检测患者血浆Fbg水平,分析血浆Fbg水平变化以及不同入院时间的患者血浆Fbg水平变化,分别对芦山地震和汶川地震各组间Fbg水平进行两两比较;将91例芦山地震骨折伤员和130例汶川地震骨折伤员分为肢体多处骨折组和肢体单处骨折组,分层分析两次地震Fbg水平的差异。结果芦山地震伤员的Fbg整体水平[(2.70±1.15)g/L]低于汶川地震伤员[(4.47±1.94)g/L],相同入院时间芦山地震伤员Fbg水平均低于汶川地震伤员,差异有统计学意义(P<0.01);地震后48 h以内入院的伤员Fbg水平与48 h以后入院的伤员Fbg水平差异有统计学意义(P<0.01);芦山地震中肢体多处骨折伤员与肢体单处骨折伤员Fbg水平[分别为(2.21±0.76)、(1.98±0.85)g/L]均低于汶川地震[分别为(3.35±1.48)、(3.11±1.05)g/L],差异有统计学意义(P<0.01)。结论在突发事件等引起的急性应激损伤中患者血浆Fbg水平有不同程度的变化,不同入院时间患者Fbg水平的变化也有所差异,应针对此采取相应防治措施。

凝血检验结果自动审核规则建立与验证的多中心研究

目的建立多中心凝血检验结果的自动审核规则,在保证检验质量的同时减轻人工审核及复检工作负荷,缩短周转时间(TAT)时间。方法收集来自14家医院检验科2019年12月至2020年3月期间凝血标本共14394份:规则建立组11230份(含Delta check 1182份),规则验证组3164份(含Delta check 487份);临床试应用77269份。应用Sysmex CS系列全自动凝血分析仪检测凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、国际标准化比值(INR)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FBG)、D-二聚体(DD)、血浆纤维蛋白(原)降解产物(FDP)同时将临床信息、仪器参数、检测结果、临床诊断、抗凝药物使用和HCT、TG、TBIL、DBIL等相关信息汇总;根据历史数据从小到大排序后累积第2.5和97.5百分位数,根据临床建议、危急值、特殊用药史和相关指南确定自动审核拦截条件及限值;进行一期和二期验证,分别计算阳性符合率、阴性符合率、假阴性、假阳性、自动审核通过率、通过正确率(与人工审核一致率)和TAT时间。结果(1)自动审核规则33条,涉及TT、PT/INR、APTT、FBG、DD、FDP、Delta check、反应曲线及性状异常;(2)规则建立组自动审核通过率为68.42%(7684/11230),假阴性为0(0/11230),与人工审核一致率为98.51%(11063/11230),其中阳性符合率为30.09%(3379/11230),阴性符合率为68.42%(7684/11230);规则验证组自动审核通过率为60.37%(1910/3164),假阴性为0(0/11230),与人工审核一致率为97.79%(3094/3164),其中阳性符合率为37.42%(1184/3164),阴性符合率为60.37%(1910/3164);(3)自动审核规则试应用,77269份凝血检测标本,检验结果报告平均TAT缩短分别为8.5~83.1 min。结论本研究建立了凝血检验结果自动审核规则33条,验证显示能够在保证检验准确性的同时缩短TAT,提高凝血检验效率。

中国四川地区汉族及藏族人群地中海贫血基因分型调查

目的调查四川地区汉族和藏族人群地中海贫血(地贫)基因的携带率及基因分型,分析地贫患者地贫基因分型的分子流行病学特点。方法采用SYSMEX XE-2100全自动血细胞分析仪检测1 147例汉族成人和613例藏族成人的红细胞参数,对平均红细胞体积(mean corpuscular volume,MCV)<85fL和平均红细胞血红蛋白量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)<27pg的标本进行α-地贫和β-地贫基因分析。分别采用多重连接依赖式探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)和反向斑点杂交技术(reverse dot blot assays)检测α珠蛋白的缺失型突变和α珠蛋、β珠蛋白的非缺失型基因突变。结果汉族人群中,α-地贫基因携带率为1.48%(17/1 147),基因型以--SEA/αα为主;β-地贫基因携带率为1.39%(16/1 147),基因型以CD17和IVS-Ⅱ-654为主;αβ复合型地贫检出2例。33例地贫基因阳性标本的MCH均<27pg,有5例样本的MCV>80fL,最大为83.7fL。613例藏族中仅有1例为地贫基因携带者。结论四川地区汉族人群地贫基因携带率较高,存在有多种致病基因突变类型和基因型,应进一步加强地贫基因的筛查力度,尤其需要特别重视MCV<84fL、MCH<27pg人群的地贫筛查,而四川藏族人群不推荐常规进行地贫筛查。基因检测技术在指导遗传咨询工作中具有不可或缺的地位。

胱抑素C估算肾小球滤过率对人工肝治疗HBV相关性慢加急性肝衰竭短期预后的预测价值

目的探讨胱抑素C估算肾小球滤过率(cystatin C-based estimated glomerular filtration rate,eGFR-CysC)对人工肝治疗的乙型肝炎病毒相关性慢加急性肝功能衰竭(hepatitis B virus-related acute-on-chronic liver failure,HBVACLF)预后的预测价值。方法回顾性收集我院364例人工肝治疗的HBV-ACLF住院患者,根据28 d死亡率将患者分为存活组269例和死亡组95例,分析临床资料和实验室数据对患者短期预后的价值。结果多因素Cox回归分析显示,基线eGFR-CysC水平低是HBV-ACLF患者28 d死亡率的独立风险因素之一(风险比=0.987;95%置信区间:0.979~0.996,P=0.003)。基线eGFR-CysC水平与终末期肝病模型评分(the model for end-stage liver disease,MELD)(r=-0.439,P<0.001)、MELD联合血清钠评分(r=-0.481,P<0.001)和慢性肝衰竭联盟-慢加急性肝衰竭预后评分(Chronic Liver Failure Consortium ACLF,CLIF-C ACLF)(r=-0.340,P<0.001)呈负相关。受试者工作特性(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析示基线值,第一次、第二次、第三次使用人工肝治疗后的eGFR-CysC值判断患者28 d死亡与否的曲线下面积分别为0.639、0.697、0.716、0.749(P<0.001),eGFR-CysC最佳临界值分别为70.620、67.525、61.725、64.685 mL/(min·1.73 m^(2))。结论eGFR-CysC水平能辅助评价人工肝治疗HBV-ACLF患者短期死亡率,动态监测的临床应用价值更高。

活化部分凝血活酶时间延长混合血浆纠正试验“灰区”解决方案探究

目的探索解决APTT纠正试验Rosener指数"灰区"的方法,建立APTT纠正试验结果判断的临床应用路径。方法收录2018年1月1日至2019年12月31日就诊于四川大学华西医院的APTT单独延长的患者样本,借助ROC曲线探索不同方案的最佳判断界值,建立联合应用1∶1和4∶1混合解决"灰区"问题的方案和结果判断的临床应用路径;收录2020年1月1日至12月31日的同类样本验证该方案和路径的诊断效能。结果传统Rosener指数判断标准对因子缺乏和抑制物的区分效能较低,建立组和验证组共49例(15%)样本位于"灰区";建立1∶1混合纠正试验Rosner指数判断因子缺乏的最佳界值为5.0%,判断抑制物的最佳界值为9.1%,对于5.0%~9.1%的样本进行4∶1混合纠正试验能明显提高低滴度抑制物的检出率;借鉴Rosner指数建立孵育后延长时间百分比-P(1∶1混合时>10.8%和4∶1混合时>13.5%)用于判断抑制物具有时间依赖性较共识推荐的2种方案诊断效能更高。联合1∶1和4∶1混合纠正试验对于因子缺乏和抑制物判断的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值均>90%,将抑制物误判为因子缺乏的比例从20.9%(9/43)下降到7.0%(3/43),将判断时间依赖性抑制物的特异性由54.2%提高至100%,准确度由63.3%提高至97.4%。结论1∶1和4∶1混合纠正试验联合应用可较好地解决"灰区"问题,建立的APTT纠正试验结果判断路径,有助于APTT纠正试验的进一步推广和临床应用。