miR-299-5p靶向KLF3对肝癌细胞增殖、迁移的影响

目的:探究miR-299-5p对肝癌细胞增殖、迁移的影响及相关机制。方法:qRT-PCR测定人正常肝细胞株HL-7702、人肝癌细胞株Hep3B、HuH-7、HepG2、SMMC-7721、MHCC97-L中miR-299-5p表达差异;将HepG2肝癌细胞分为空白对照组、阴性对照组、miR-299-5p组、miR-299-5p+pc-人类Krüppel样因子3(KLF3)组;比较各组HepG2细胞中miR-299-5p表达及KLF3蛋白表达情况;双荧光素酶报告实验验证miR-299-5p与KLF3的靶向关系,CCK-8试剂盒检测各组肝癌细胞增殖情况,流式细胞术检测各组肝癌细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测HepG2细胞侵袭能力,划痕实验检测HepG2细胞迁移能力,Western blot检测各组HepG2细胞凋亡及迁移相关蛋白表达。结果:与人正常肝细胞相比,肝癌细胞株中miR-299-5p表达水平显著降低(P<0.05),HepG2细胞株中表达最低;与空白对照组相比,miR-299-5p组及miR-299-5p+pc-KLF3组HepG2细胞中miR-299-5p表达水平、凋亡能力显著提高(P<0.05),KLF3蛋白表达水平、增殖能力、侵袭、迁移能力显著降低(P<0.05);与miR-299-5p组相比,miR-299-5p+pc-KLF3组HepG2细胞中miR-299-5p表达水平、凋亡能力显著降低(P<0.05),KLF3蛋白表达水平、增殖能力、侵袭、迁移能力显著提高(P<0.05);荧光素酶报告实验显示,与KLF3 WT+阴性对照组相比,KLF3 WT+miR-299-5p组HepG2细胞荧光素酶活性显著降低(P<0.05),KLF3 MUT+阴性对照组与KLF3 MUT+miR-299-5p组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:过表达miR-299-5p可显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移,可能通过下调KLF3发挥作用。