RNA荧光定量标准品制备新方法的探讨

目的以丙型肝炎病毒(HCV)为例,介绍一种简便快速的RNA定量标准品的制备方法。方法RT-PCR扩增目的片段,产物以pGEM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH 5α,经筛选和测序鉴定,阳性质粒体外转录合成cRNA,准确定量后作为标准品。结果RNA标准品具有较大的线性范围(109cop ies/m l^10 cop ies/m l),批内和批间重复性也较好,CV分别为1.68%~5.97%和6.40%~10.58%。结论此法制备的RNA标准品具有较好的检测灵敏度和特异性,适合临床推广应用。

荧光定量两探针法检测HCV RNA的研究

目的建立荧光定量两探针检测HCVRNA方法。方法对105例抗HCV抗体阳性和220例阴性样本,用荧光定量两探针法和2种商品荧光定量试剂进行检测,并对检测结果进行比较。结果荧光定量两探针法阳性率分别为89.5((94/105)和2.3((5/220)。两种商品荧光定量试剂阳性率分别为71.4((75/105)和0.45((1/220);69.5((73/105)和1.8((4/220)。结论荧光定量两探针法检测HCVRNA有较高的敏感性和特异性。

冠心病与血管紧张素转换酶基因多态性的相关性分析

目的 探讨冠心病与血管紧张素转换酶 (AngiotensinConvertingEnzymeACE)基因多态性的相关性。方法 以人基因组DNA为模板 ,用PCR的方法扩增ACE基因 16内含子上 2 87bp插入 /缺失片段 ,根据电泳产生的片段 ,将ACE基因分为 3个基因型 :II型仅有 4 90bp片段 ,DD型仅有 190bp片段 ,ID型含有 4 90bp和 190bp 2种片段。 结果 通过冠心病组和正常对照组的ACE基因多态性的比较发现 ,ACE的DD基因型频率和D等位基因频率在冠心病组中显著增加 (P <0 .0 1)。结论 冠心病与ACE基因多态性有一定相关性 。

医院内念珠菌感染20例分析

医院内念珠菌感染２０例分析黄竺筠（南通市第二人民医院检验科２２６００２）近年来，医院内感染率明显增加，据卫生部通知［１］，１９９３年１～６月我国医院内感染率达９．１０％，其感染的病原物除了细菌外，真菌感染率也有所增加，其中尤以白色念珠菌最为常见。它直...

心肌肌钙蛋白Ⅰ定量检测对病毒性心肌炎的诊断价值

目的 :探讨心肌肌钙蛋白 (c Tn )对病毒性心肌炎 (VMC)的诊断价值。方法 :对 VMC186例和对照组 30例进行 c Tn 定量检测。结果 :c Tn 值在 VMC组和对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 5 )结论 :c Tn 定量检测可作为诊断 VMC的重要指标。

70株绿脓杆菌国际抗原分型及其抗生素敏感试验

绿脓杆菌目前已成为临床上重要的致病菌,据文献报道其引起医院内感染占9～10％,个别高达20％。同时,由于此菌对多种抗生素有较强的耐药性,难以治愈,病死率较高,已引起临床的重视。本文对我院分离的70株绿脓杆菌进行血清学分型和抗生素敏感试验,以探明绿脓杆菌在我院感染的分布状况。

双探针实时荧光定量法检测HCV RNA的临床意义

目的建立双探针荧光定量HCV RNA检测方法,探讨解决HCV RNA定量灵敏度和特异性问题。方法对89例抗HCV抗体阳性和220例阴性样本用双探针荧光定量法和两种商品荧光定量试剂方法进行检测。结果双探针荧光定量法阳性率分别为91.0%(81例)和2.72%(6例)。两种商品荧光定量试剂方法阳性率分别为82.0%(73例)和0.9%(2例);79.7%(71例)和2.27%(5例)。结论双探针荧光定量提高了HCV RNA检测的灵敏度和特异性。

HCV-RNA荧光定量标准品制备的研究

目的介绍一种简便快速的丙型肝炎病毒(HCV)RNA定量标准品的制备方法。方法 RT-PCR扩增目的片段,产物与pGEM-T载体连接并转化感受态大肠杆菌DH5α,经筛选和测序鉴定,阳性质粒体外转录合成cRNA,准确定量后作为标准品。结果 RNA标准品具有较大的线性范围(109copies/ml-101copies/ml),批内和批间重复性也较好,cv分别为3.68%和8.40%。结论本法制备的RNA标准品具有较好的检测灵敏度和特异性,适合临床推广应用。

超声生物显微镜斑点追踪成像评价EP3基因敲除小鼠心脏的功能

目的:应用超声生物显微镜(ultrasound biomicroscopy,UBM)及斑点追踪(speckle tracking echocardiography,STE)技术探讨野生型(wild type,WT)、EP3基因敲除(EP3-/-)小鼠心肌结构功能的改变,了解EP3受体在扩张性心肌病发病病程以及心肌结构功能改变中的重要作用。方法:用Visual Sonics Vevo 2100 Imaging System对两组雄性的C57BL/6小鼠进行检测,获得了清晰的二维(two-dimensional,2D)图像,如胸骨旁左室长轴、左室短轴、主动脉短轴以及2D图像引导的M型超声。彩色多普勒图像常规超声心动图测量包括:心率(heart rate,HR)、左心室收缩末内径(left ventricular end systolic diameter,LVIDs)、左心室舒张末内径(left ventricular diastolic diameter,LVIDd)、左心室收缩末前壁厚度(left ventricular end systolic anterior wall thickness,LVAWs)、左心室舒张末前壁厚度(left ventricular end diastolic anterior wall thickness,LVAWd)、左心室收缩末后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness,LVPWs)、左心室舒张末后壁厚度(left ventricular diastolic posterior wall thickness,LVPWd)、左心室容积(left ventricular volume,LV Vols)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、短轴缩短率(fractional shortening,FS)、左心室质量(left ventricular mass,LV mass)、二尖瓣E/A(mitral E/A,MV E/A)、左室等容舒张期时间(isovolumic relaxation time,IVRT)。并用UBM STE成像评价小鼠左心室内外膜心肌应变,脱机分析两个不同切面左心室内、外膜的纵向应变、圆周应变及径向应变的峰值应变(peak systolic strain,PK)、达峰时间(time to peak,TPK)、室壁最大达峰延迟时间(maximum peak delay time of ventricular wall,MOWD)等指标。对各组超声结果进行统计分析,研究EP3受体与小鼠心脏形态及功能之间的关系。结果:2D和M型超声检查小鼠心功能EP3-/-小鼠明显差于WT小鼠。UBM STE成像分析小鼠左心室内外膜心肌应变结果显示EP3-/-小鼠左心室内膜下和外膜下心肌纵向、圆周及径向PK均呈逐渐减小的趋势。结论:UBM可以检测小鼠发生扩张型心肌病病程以及心肌结构的改变,EP3受体亚型在维持心脏功能中具有重要的作用。