高光纯D-乳酸生产菌株假肠膜明串珠菌HL64-1的分离鉴定及其发酵特性

从自然界中筛选分离产酸菌是获得高光学纯度乳酸生产菌株有效的途径之一。从腐烂果实中分离获得一株产高光学纯度D-乳酸菌株HL64-1,经形态学、16S rDNA序列分析、序列相似性Blast比对分析鉴定为假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)。在基础发酵培养基中摇瓶发酵24 h,产D-乳酸的量达到62.18 g/L,产酸速率达2.59 g/(L·h),光学纯度达99.90%(ee);在5 L发酵罐中放大培养,通过补加碳源,发酵72 h,D-乳酸产量达到78.74 g/L,平均产酸速率达1.09 g/(L·h)。该菌株可以有效利用农业副产物花生饼粉和棉籽粉作为替代氮源以降低发酵原料成本。该菌还可利用木糖产生D-乳酸,且葡萄糖能显著提高木糖的利用效率,极具工业应用前景。

高光学纯度乳酸菌株的筛选及发酵性能研究

从不同地区的土壤、泡菜中分离筛选出了2株高光学纯度D-乳酸菌株和2株高光学纯度L-乳酸菌株。通过形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA序列分析,确定L-乳酸产生菌HA7-5菌株为屎肠球菌(Enterococcus faecium),HJ57菌株为格氏乳球菌(Lactococcus garvieae);D-乳酸产生菌HB49-2菌株为德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii),HL64-1菌株为假肠膜明串株菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)。经摇瓶发酵产酸培养,菌株HA7-5和HJ57发酵产L-乳酸分别达71.83 g/L和31.89 g/L;菌株HB49-2和HL64-1发酵产D-乳酸分别达73.14 g/L和62.04 g/L,且菌株HL64-1发酵周期仅为24 h,产酸速率快,平均产酸速率为2.58 g/(L·h)。D体和L体光学纯度均达99.8%(ee)以上。以上菌株均为产高光学纯度L-或D-乳酸野生型菌株,可作为后期诱变育种的出发菌株,进行菌株改良及发酵性能提升的研究。

链霉菌中一类同源非典型端粒的克隆及分析

采用自连接-PCR的方法克隆和测序了Streptomyces cattleya DSM46488、Streptomyces mobaraensisDSM40847及Streptomyces davawensisJCM4913的端粒,序列比对发现,这3种端粒具有较高的序列相似性,前60个核苷酸的序列相似性达到了80%以上;在二级结构水平,这些端粒含有多个回文序列,其中,包含相同的回文序列I和II,但并不能通过折返形成超级发夹结构;Streptomyces cattleya DSM46488、StreptomycesmobaraensisDSM40847及Streptomyces davawensis JCM4913的端粒与线性质粒pSHJG1端粒及Streptomyces albus J1074染色体端粒均具有较高的序列相似性;系统发育分析显示它们与典型端粒及其他非典型端粒处于不同的进化分支,S.cattleyaDSM46488、S.mobaraensis DSM40847、S.davawensisJCM4913、S.albus J1074及S.hydroscopicussubsp.Jinggangensis 5008都编码同源的潜在末端蛋白-端粒相关蛋白,暗示了这类同源的非典型端粒系统广泛存在于链霉菌中。

酶法水解文蛤肉的研究

以海产文蛤肉为原料，用酶水解获得复合氨基酸水解液。水解液中含有１８种氨基酸、牛磺酸、多种维生素及微量元素。酶水解的最适条件为：水解时间４～６ｈ、温度５０～５５℃、初始ＰＨ７．０、酶添加量１．５～２．０％。酶解后，游离氨基酸含量可达５４．６２ｍｇ／ｇ鲜文蛤肉，其中必需氨基酸占５０％以上，牛碘酸为２６６ｍｇ／ｇ鲜文蛤肉，蛋白质的水解率为５６．７８％。

酿酒酵母静息细胞转化合成2-苯乙醇

利用酿酒酵母静息细胞转化合成2-苯乙醇,确定了静息细胞转化菌龄、转化液缓冲液体系和辅酶NADH再生辅助底物。在单因子试验基础上,用Plackett-Burm设计从影响转化6个因素中筛选出影响细胞转化的显著因素:辅助底物乙醇质量浓度、转化液pH和转化温度,以BoxBenhnken试验设计结合响应面法分析确定显著因子的最优水平。结果表明,最佳转化条件为乙醇质量浓度16.5 g/L、pH 5.1、转化温度26℃,2-苯乙醇产量为3.49 g/L(转化率58.8%),比优化前提高了49.14%,静息细胞重复使用8次,2-苯乙醇产量无明显下降。转化液中加入10%的大孔吸附树脂对产物进行原位产物吸附,转化40 h,2-苯乙醇总质量浓度达9.34 g/L,L-苯丙氨酸转化率为83.9%,产量比未加入大孔树脂提高了171.5%。

一株高产2-苯乙醇酵母菌的筛选及鉴定

从24株不同来源的酵母菌中分离筛选出一株对2-苯乙醇耐受性强、生物转化合成2-苯乙醇能力高的优良菌株SH003,该菌株能在含有4 g/L的2-苯乙醇培养基中生长,在优化的转化条件下,转化合成2-苯乙醇质量浓度达4.31 g/L,生成速率为0.18 g/(L·h),L-苯丙氨酸摩尔转化率为72.4%,经菌落特征、菌体形态分析、生理生化试验,结合18S r DNA序列分析,由系统发育树表明它与酿酒酵母亲缘关系最近,确定该菌株为Saccharomyces cerevisiae。

酿酒酵母SH003生物转化2-苯乙醇条件的优化

以L-苯丙氨酸为底物,利用酿酒酵母转化合成2-苯乙醇对影响酿酒细胞转化的因素进行考察。确定酵母菌转化的菌龄,通过单因素和正交试验,优化转化培养基组成和培养条件。优化后的培养基组成:葡萄糖120 g/L,酵母粉5 g/L,L-苯丙氨酸8 g/L,MgSO_4 0.2 g/L,KH_2PO_4 0.05 mol/L,K_2HPO_4 0.05 mol/L,28℃200 r/min培养转化24h,2-苯乙醇产率达4.37 g/L,比优化前提高30.1%。

酵母静息细胞耦合原位分离技术连续转化2-苯乙醇

以酵母静息细胞作为酶载体,大孔吸附树脂为分离介质,微滤膜分离菌体,采用原位产物分离技术进行连续转化合成2-苯乙醇(2-phenylethanol,简称2-PE)。在5 L发酵罐中优化了转化条件,通过补料和控制产物浓度实现连续转化合成2-苯乙醇。单罐运行144 h,2-苯乙醇产量达24. 06 g/L,摩尔转化率和平均转化速率分别为79. 34%和0. 166 g/(L·h)。双罐运行144 h,2-苯乙醇产量达29. 86 g/L,比单罐产量提高24. 1%;摩尔转化率和平均转化速率分别达81. 83%和0. 204 6 g/(L·h),静息细胞重复使用10批次,2-PE产量和平均转化速率没有明显下降。

2-苯乙醇及其生物复配保鲜剂对柑橘致腐菌的抑菌作用

为研究2-苯乙醇(2-phenylethanol,2-PE)、纳他霉素、壳聚糖与壳寡糖对意大利青霉(Penicillium italicum)、指状青霉(Penicillium digitatum)、柑橘链格孢霉(Alternaria citri)和芽枝状枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)4种主要柑橘致腐菌的抑菌活性,分别通过单一及复合生物保鲜剂的抑菌率与最低抑菌浓度测定,判断其抑菌效果。结果表明,2-PE与纳他霉素在较低的质量浓度下对4种致腐真菌的抑菌效果明显,在质量浓度分别为2.4、0.3 g/L时可完全抑制致腐菌的生长,而壳聚糖和壳寡糖的抑菌效果较弱,在质量浓度分別为7.5和12.0 g/L时亦不能完全抑制致腐菌的生长。由主效应与交互效应的方差分析得出,影响意大利青霉与芽枝状枝孢霉抑菌率的主要因子为2-苯乙醇和纳他霉素,且二者交互作用显著(0.005<P<0.05),2-苯乙醇与壳聚糖的交互作用不显著(P>0.05)。2-苯乙醇和纳他霉素复合使用抑菌显著(P<0.05)增效,与同一浓度的2-苯乙醇相比,复配后的抑菌效能提升60%以上。

米根霉Fp-6利用红薯发酵生产L-乳酸

以高产淀粉的优质红薯品种为原料,采用生产菌株米根霉Fp-6研究不同的红薯预处理方式对高光学纯度L-乳酸发酵的影响,并进行了50 L发酵罐放大试验。结果表明:用制备的红薯淀粉为原料,产酸和发酵周期均与以玉米淀粉为原料相同。当红薯液化液中的有机N含量高于0.25 g/L时,产乳酸量和糖转化率明显下降,副产物富马酸和甘油浓度明显增加,菌体量显著增加。无机N对发酵产酸有促进作用。用去除红薯中部分有机N的液化液进行发酵,在50 L罐中其产乳酸量达91.3 g/L,糖转化率为81.28%,发酵周期48 h。

微生物及胞外多聚物在颗粒污泥形成中的作用

集中论述了升流式厌氧污泥床（UASB）反应器中的微生物学特性，胞外多聚物（ECP）的组成以及它们在生物膜和颗粒污泥形成中的作用。ECP对颗粒的结构和稳定起重要作用，其含量占颗粒中悬浮性固体含量的0．6％～20％，主要成分为蛋白质和多糖。甲烷毛状菌属和甲烷八叠球菌属是最初颗粒化和颗粒污泥形成的重要的分解乙酸产甲烷的细菌。免疫学方法鉴定出颗粒中有利用氢和甲酸的产甲烷菌，如甲酸甲烷杆菌、嗜热自养甲烷杆菌和甲烷短杆菌属。

利用工业副产物硫酸钙制备建筑石膏的工艺研究

本文介绍了以乳酸发酵生产的工业副产物硫酸钙为原料制备建筑石膏的工艺。研究了制备过程中影响石膏性能和质量的主要因素,对产品质量进行分析,确定制备建筑石膏的工艺条件。

野油菜黄单胞菌X.c-18的选育及发酵条件的研究

通过人工诱变野油菜黄单胞菌，筛选出1株具良好抗变异性的突变株X．c－18。该突变株能很好地利用蔗糖和玉米淀粉为碳源，蛋白脏和黄豆饼粉为氮源。其最佳黄原胶发酵总糖量与总蛋白质量之比为5∶0．5，最适pH值为7．0，温度为28℃。摇瓶发酵72h，黄原胶产量每升发酵液一般可达30g以上，最高产量达32．6g，对碳源转化率为71．54％。

双歧杆菌选择计数方法的研究进展

综述了近年来双歧杆菌选择计数方面的研究进展。介绍了国外报道的几种应用效果较好的选择计数培养基，提出了这方面需要进一步开展的工作与想法。

苯乳酸生产菌的筛选及鉴定

苯乳酸是一种具有宽广抑菌谱的新型生物保鲜剂,为筛选得到苯乳酸高产菌株,采用改良的碳酸钙溶解圈法和抑菌圈法,从自然环境中采集的50个样品中分离筛选得到2株高产苯乳酸的乳酸菌,分别命名为BLPC002和SCPC008,并对其进行了初步鉴定。结果显示,BLPC002和SCPC008在以苯丙氨酸为底物的条件下,摇瓶发酵苯乳酸产量分别为358 mg/L和333 mg/L,较改良前不到100 mg/L有明显的提高,说明改良后的筛选方法更加高效、准确。进一步通过对菌株形态和16S rDNA序列分析初步鉴定,均为植物乳杆菌。

从米根霉中提取壳聚糖的初步研究

采用乳酸发酵后的废菌丝体米根霉(Rhizopus oryzae)为原料提取壳聚糖,研究壳聚糖的最佳提取工艺条件,用酸碱交替处理去除蛋白质;用正交试验确定脱乙酰的最佳条件。脱蛋白条件为在2%NaOH溶液中,于60℃维持4h;脱乙酰基的条件为在30%NaOH溶液中于120℃维持2h。壳聚糖脱乙酰度为87.3%,黏度为81mPa.s,壳聚糖产量占菌丝体干重的9.75%。

卡波姆的性质和应用

卡波姆作为一种新型药用辅料可应用于液体制剂、半固体制剂和固体制剂中。

稀土元素对两歧双歧杆菌生长的影响

目的 :报道不同浓度稀土元素铈和镧 (1～ 10 0 0μg/ ml)对两歧双歧杆菌生长的影响。方法 :试管培养与连续厌氧培养法。结果 :当两种稀土元素浓度大于 30 0μg/ m l时 ,双歧杆菌的生长明显受到抑制 ,当稀土元素浓度在 10 0～ 2 0 0μg/ m l时 ,对双歧杆菌生长有轻微抑制 ,低浓度的稀土元素对双歧杆菌无刺激生长作用。稀土元素 (10 0μg/ ml)对厌氧连续培养的双歧杆菌同样有明显的抑制作用 ,随着稀土元素被洗脱 ,细胞的生长才逐渐缓慢恢复。试管培养中加入一定浓度稀土元素 (10 0μg/ m l) ,连续取样检查 ,也可观察到稀土元素对双歧杆菌的抑制情况。结论 :一定浓度稀土元素钅市和镧对双歧杆菌生长有促进作用。

赣南脐橙致腐菌的分离鉴定及其对2-苯乙醇敏感性分析

从采摘后贮存自然发病的赣南脐橙中分离出4种病原真菌,根据菌株形态学观察和rDNA-ITS序列分析进行鉴定,这4种病原真菌分别为意大利青霉(Penicillium italicum)、指状青霉(Penicillium digitatum)、柑橘链格孢(Alternaria citri)和芽枝状枝孢(Cladosporium cladosporioides)。生物保鲜剂2-苯乙醇(2-PE)可有效地抑制这4种病原真菌的孢子萌发和菌丝生长,但对不同致腐菌抑菌效果差异显著(P<0.05)。2-PE对芽枝状枝孢霉、指状青霉菌、柑橘链格孢和意大利青霉菌菌丝生长的最小抑菌浓度分别为1.4、1.8、2.2和2.4 g/L。