厌氧菌在肿瘤生物治疗中的研究进展

国际癌症研究机构公布的数据显示，每年全球约800万人死于癌症，癌症已成为世界严重的公共卫生问题。我国每年新发肿瘤病例约为312万例，其中50岁以上人群恶性肿瘤发病率占全部发病的80％以上，80岁达到高峰，居民因癌症死亡率是13％〔1〕。肿瘤严重影响老年人的生活质量，威胁着老年人的健康。传统的肿瘤治疗面临着特异性不高、靶向性不强、难以对实体肿瘤的乏氧区发挥作用等方面的挑战，迫切需要新疗法。1813年，Vautier观察到肿瘤患者感染气性坏疽后，患者体内的肿瘤生长减缓甚至消退，这一现象引起了人们对细菌抗肿瘤的关注。 Coley等〔2〕做出了积极的探索，卡介苗（ BCG）已成功用于临床治疗浅表性膀胱癌。随着对厌氧菌的肿瘤特异性靶向定植认识的深入和生物技术的发展，利用厌氧菌治疗肿瘤显示出广阔的应用前景。

成瘾药物滥用、人类免疫缺陷病毒感染及神经艾滋病

成瘾药物滥用主要影响机体的中枢神经系统,产生躯体和（或）精神依赖,引起慢性复发性脑病,严重影响患者的身心健康。获得性免疫缺陷综合征（AIDS）是人感染人类免疫缺陷病毒（HIV）后导致免疫缺陷,并发一系列机会性感染及肿瘤,严重者可导致死亡的综合征。虽然高效抗逆转录病毒疗法已在减轻患者痛苦、延长患者寿命等方面取得了一定的效果,

神经免疫、毒品滥用和神经艾滋病

从人群总体感染和风险来看,毒品滥用人群HIV感染率高。共用注射器、注射器未消毒及不安全性行为[1],这些危险因素均会增加吸毒者感染HIV的风险。冰毒和摇头丸等新型毒品可使人异常兴奋,产生欣快感,增强性欲望,极易发生不安全性行为和群体淫乱,也增加了感染HIV的风险[1]。人们很早就推测,滥用毒品是HIV感染的重要辅助因素,HIV感染和毒品滥用之间可能存在协同效应[2-3]。但由于存在吸毒人群的登记制度不全、

夏枯草体外对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的 探究夏枯草在细胞水平对呼吸道合胞病毒（RSV）的抑制作用及机制。方法 采用细胞培养技术,以利巴韦林为对照,通过观察细胞病变效应（CPE）,测定细胞半数中毒浓度（TC50）、药物半数抑制浓度（IC_（50））和抗病毒指数（TI）,评判夏枯草抗RSV效果。结果 夏枯草对RSV有抑制作用,浓度在0.4~51.2 mg/ml呈量效关系,TC_（50）=3.39 mg/ml、IC_（50）=0.379 mg/ml、TI=8.94。利巴韦林TC_（50）=0.33 mg/ml、IC_（50）=0.041 mg/ml、TI=8.05。夏枯草对细胞的毒性比利巴韦林小,TI比利巴韦林大,安全范围大。结论 夏枯草在Hep-2细胞中对RSV有明显的抑制作用,既能抑制RSV的吸附和生物合成,又能直接杀死病毒,抗RSV作用与利巴韦林相当。

甘草体外抗呼吸道合胞病毒的作用及机制

目的探讨甘草体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用及初步机制。方法采用细胞病变效应(CPE)和MTT法,测定细胞半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC50)和抗病毒指数(TI),以利巴韦林为对照,评价甘草抗RSV的效果。结果甘草在体外既能抑制RSV的增殖,又能直接杀伤RSV,阻断RSV的感染。甘草的TC50=3.21 mg/ml,IC50=0.273 mg/ml,TI=11.76。甘草比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大,抗RSV作用与利巴韦林相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论甘草使用安全,在体外对RSV有明显的抑制作用。

半夏内生菌的分离培养与鉴定

目的从恩施产半夏植株体内分离培养有益的内生细菌,为制备半夏益生菌提供菌株。方法取半夏植株样品经前处理后,接种至牛肉膏蛋白胨固体和液体培养基培养48 h后选择目的菌落,经纯化培养后,涂片革兰氏染色,油镜观察,并进行各种生化反应。结果三类标本的培养特征：在固体培养基上,菌落呈圆形,灰白色,直径3~4 mm,边缘整合,中央凹陷,呈肚脐状;在液体培养基中培养24 h后呈沉淀生长,上液澄清,革兰氏染色阳性,菌体呈直杆状,成链状排列,菌体长5~10μm,宽1~2μm,培养48 h后可见芽胞形成,位于菌体中央,呈柱状,结合生化反应结果,所分离的半夏内生菌菌株符合地衣芽胞杆菌特征。结论半夏内存在多种内生菌,从半夏植株内能分离出地衣芽孢杆菌,对研究制备半夏益生菌制剂提供了重要的理论依据。

车前草对呼吸道合胞病毒体外抑制作用的研究

目的研究车前草醇提液体外对呼吸道合胞病毒（RSV）的作用。方法采用细胞培养技术,以利巴韦林为对照,通过观察细胞病变效应（CPE）,测定细胞半数中毒浓度（TC50）、药物半数抑制浓度（IC50）和抗病毒指数（TI）,评判车前草抗RSV作用。结果车前草体外有抗RSV作用,浓度在0.0625~8.0 g/L呈量效关系。车前草的TC50=4.57 g/L,IC50=0.285 g/L,TI=16.04。车前草与利巴韦林抗RSV作用差异无统计学意义（P〉0.05）,但比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大。结论车前草在Hep-2细胞中对RSV有明显的抑制作用,既能抑制病毒的吸附和增殖,又能直接杀死病毒。

“5+3”人才培养模式下医学微生物学实验考试改革的研究

以实践能力为核心的"5+3"临床医学人才培养模式已成为我国医学教育的主体模式,医学教育改革应遵循医学教育规律和医学人才成长规律,培养适应我国医药卫生事业发展的高水平医学人才。本文分析了医学微生物学实验考试的现状及改革的意义,提出了既能调动学生的主动性,提高医学生教育培养质量,又能与住院医师规范化培训有机衔接,从源头上提高医疗卫生队伍服务能力,适应医药卫生体制改革的总体要求的改革方法。

医学微生物学实验教学的改革与思考

传统的医学微生物学实验教学模式不能适应医学人才培养的需要,从改变教学理念、优化教学内容、丰富教学方法、完善考核体系等方面进行大胆改革,才能调动学生参与实验的积极性,有利于培养学生的思考能力、实践能力和创新能力。

流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg的构建与细胞转染研究

目的设计并构建含分子内佐剂的流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg,初步研究其在HEK293T细胞中的转染效率。方法通过生物信息学软件设计并合成了含分子内佐剂的流感病毒多表位基因CTB-Eg,将其插入真核载体pEGFP-C2中,获得了重组质粒pEGFP-C2/CTB-Eg;用脂质体法转染HEK293T细胞,通过荧光显微镜观察和PCR法检测其转染效率。结果成功构建了真核表达质粒pEGFP-C2/CTB-Eg,且该重组质粒能在HEK293T细胞中瞬时转染,转染效率在50%～70%之间。结论本研究成功设计、构建了CTB-Eg融合基因,其在HEK293T细胞中转染效率较高,为流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg在小鼠体内的抗病毒作用研究奠定了坚实基础。

以肠道菌群为靶点的新型辅助降压模式研究进展

肠道菌群是人体内环境的重要组成部分,参与和调节机体的免疫炎性反应和代谢过程,与高血压的发生、发展存在密切联系,在高血压疾病的研究中已成为焦点。本文总结了肠道菌群与高血压的关系,从炎症和免疫反应、脑-肠-骨髓轴、代谢物等方面阐明肠道菌群对高血压的影响及可能机制,重点从盐、益生菌、多酚类有机化合物三方面探讨饮食干预影响肠道菌群、改善血压的新型辅助降压途径,以期以肠道菌群为靶点,使通过饮食、中草药防治高血压的研究越来越深入。

破坏细菌芽孢高抵抗力的研究进展

芽孢对理化、生物因素具有极强的抵抗力,极易引起食品腐败变质,导致食源性疾病,严重影响食品生产、加工、储藏和人类健康。芽孢抵抗力取决于其结构、2,6-吡啶二羧酸钙盐(Calcium 2,6-pyridyl-dicarboxylate,DPA-Ca)、α/β小分子酸溶性蛋白(Small acid-soluble proteins,SASP)等。目前多采用高温高压杀灭芽孢达到有效灭菌,该方法破坏芽孢的结构是切实可行的。DPA-Ca可以提高所有芽孢的抵抗力,通过破坏它能更容易达到广泛杀菌的目的。芽孢高抵抗力的本质在于其基因,通过调控基因的表达,有望高效、稳定、低条件地杀灭芽孢。

无机多聚磷酸盐在神经变性疾病中的作用、机制及潜在应用

无机多聚磷酸盐(inorganic polyphoshpate,polyP)是由磷酸根通过高能磷酸键连接而成的线状聚合物[1]。在生物出现之前polyP就已经存在于地球。在早期地球的高压和干燥环境中能产生polyP,比如在类似地球早期环境的火山口存在polyP。polyP的广泛存在表明其在生物的起源和生存方面起到非常关键的作用[2]。polyP在细菌中起到多种作用,如细菌的运动性、生物膜形成、毒性和压力抗性等[3]。

传统中药、针法与西药抗病毒治疗带状疱疹的疗效比较

目的系统评价近10年传统中药、针法与西药抗病毒治疗带状疱疹的临床疗效。方法检索Cochrane Library、CNKI、VIP、WanFang Data和Pub Med数据库,搜集2010年1月-2020年5月中医、西药治疗带状疱疹疗效比较的随机对照试验(RCT),采用RevMan 5.3软件分析数据。结果纳入22个RCTs,共1706例患者,结果显示:①在有效率方面,中医组比西药组高[RR=0.25,95%CI(0.19,0.35),P<0.00001];②在结痂时间方面,中医组比西药组短[MD=-1.61,95%CI(-2.01,-1.22),P<0.00001];③在治疗后疼痛评分方面,中医组比西药组低[MD=-1.10,95%CI(-1.41,-0.78),P<0.00001];④在后遗神经痛的发生率方面,中医组比西药组低[RR=0.23,95%CI(0.12,0.45),P<0.00001]。结论相对于西药抗病毒疗法,传统中药、针法等治疗带状疱疹能提高有效率、缩短结痂时间,在减轻疼痛程度的同时降低后遗神经痛发生率,疗效更好。受纳入研究质量和数量所限,需更多高质量的RCT证实。

多酚治疗心血管疾病研究的文献计量学可视化分析

目的对多酚及多酚类化合物治疗心血管疾病相关文献进行文献计量学可视化分析,揭示该领域近11年的研究方向和现状,探索研究热点及前沿方向,分析核心作者及机构,为科研实验及临床诊疗提供新的线索。方法运用文献计量学方法,以Web of Science Core Collection数据库为数据来源,借助CiteSpace软件,采用分类、聚类、突现等方法对2011-2021年多酚治疗心血管疾病的相关研究的发文时间、研究方向分布、作者、国家和机构合作、关键词等进行可视化分析。结果共纳入3604篇文献,发文量最高的国家是中国(488篇);研究方向主要集中在营养与膳食、食品科学技术;发文量最高的机构是巴塞罗那大学(73篇);引文量最高的作者是Del Rio D;该领域主要研究热点是氧化应激导致慢性疾病的发生机制、多酚和黄酮在慢性疾病中的重要作用;研究前沿是以肠道菌群为靶点探索多酚治疗心血管疾病的新型治疗模式。结论近10年来,氧化应激导致慢性疾病的发病机制、多酚及多酚类化合物和黄酮及黄酮类化合物通过抗氧化作用抑制炎症反应,降低心血管疾病的发生风险是多酚治疗心血管疾病领域的研究热点。多酚治疗心血管疾病在近年内得到一定发展,尤其在以肠道菌群为靶点的治疗方面研究广泛,但其具体机制尚未厘清,需要长期、稳定的研究团队进一步挖掘。

桑叶乙醇提取物体外对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的：研究桑叶体外对呼吸道合胞病毒（RSV）的作用。方法：采用细胞培养技术,将51.2 g·L^-1桑叶液（70%乙醇提取物）倍比稀释后与密度为1.0×104/m L Hep-2细胞作用72 h,观察细胞病变效应（CPE）,通过MTT法测定半数中毒浓度（TC50）。不同浓度桑叶液、Hep-2细胞与0.01 m L 100 TCID50RSV作用1,2 h后,测定其半数抑制浓度（IC50）和抗病毒指数（TI）,以利巴韦林为阳性对照,评判桑叶抗RSV效果。结果：桑叶质量浓度在0.01-12.8 g·L^-1,对RSV的抑制率表现出量效关系,TC506.56 g·L^-1,IC501.015 g·L^-1,TI 6.46。桑叶体外有抗RSV作用,比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大（P〈0.05）。结论：桑叶对RSV有明显的抑制作用,既能抑制RSV的吸附和生物合成,又能直接杀死病毒。

重组幽门螺杆菌多表位疫苗工程菌株的构建及其微生物学特性研究

目的构建含有幽门螺杆菌尿素酶(ureI、ureB)及霍乱毒素B亚单位(ctB)融合片段的多表位疫苗工程菌,并研究其微生物学特性。方法通过生物信息学方法从ureI和ureB基因中筛选出T细胞和B细胞优势表位,通过柔性Linker相连,并在其N端加入分子内佐剂序列ctB,按照大肠杆菌BL21(DE3)的密码子偏好性进行密码子优化,即为BIB序列。人工合成之后,插入原核表达质粒pET28a(+)中,构建pET28a(+)/ctB-ureI-ureB〔pET28a(+)/BIB〕重组质粒。经限制性内切酶酶切鉴定及DNA测序鉴定正确后,将质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中。BIB工程菌经乳糖诱导表达后,SDS-PAGE检测重组蛋白BIB的表达情况,并对其N端氨基酸序列和相对分子质量进行测定,Western blot对其进行抗原性鉴定。结果原核表达质粒pET28a(+)/BIB经双酶切和测序鉴定构建正确,SDS-PAGE电泳显示在相对分子质量33×103处有一条明显条带,其N端氨基酸序列和相对分子质量与设计序列100%一致,Western blot结果显示BIB可以与抗幽门螺杆菌悉尼株(SS1株)小鼠血清及鼠抗CTB单抗产生特异性反应。结论成功构建了幽门螺杆菌多表位重组原核表达工程菌,该工程菌表达的BIB蛋白抗原性良好。

自噬和凋亡在甲型流感病毒和肺炎球菌协同感染小鼠模型中作用的初探

目的 建立甲型流感病毒（Influenza A virus,IAV）和肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae,SP）协同感染小鼠模型,在该模型中初步探索自噬和凋亡的发生情况.方法 将IAV和SP以不同顺序感染Balb/c小鼠,观察其体重变化和死亡率,检测其肺部IAV和SP滴度、病理改变情况,建立IAV ～ SP协同感染动物模型.使用免疫组化法检测自噬特征蛋白LC3及凋亡特征蛋白Caspase-3的表达情况.结果 IAV～SP组第二次感染后24 h时小鼠肺部IAV和SP滴度最高,死亡率也明显高于其他各组,48 h病理改变也最为严重.免疫组化结果显示IAV感染早期（24 h～48 h）LC3蛋白表达出现峰值,Caspase-3缓慢上升;晚期（72 h～96 h）Caspase-3蛋白表达出现峰值,而LC3蛋白表达逐渐下降.结论 本研究成功建立了1AV～ SP协同感染动物模型,模型鼠中自噬先于凋亡发生,为进一步研究自噬和凋亡在IAV～ SP协同感染中的作用奠定了基础.

诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑制作用

目的:评估无毒诺维氏梭菌对小鼠移植性肝癌的抑瘤效应,及其在肿瘤和重要器官的定植情况,并确定瘤内注射的最佳剂量。方法:建立H22皮下移植瘤BALB/c小鼠模型后称小鼠重量,测量肿瘤大小,并按随机原则分为生理盐水组、无毒诺维氏梭菌低剂量组(1.0×10^(7)/mL,0.5 mL)、中剂量组(1.0×10^(8)/mL,0.5 mL)和高剂量组(1.0×10^(9)/mL,0.5 mL)。每天观察小鼠的一般情况,每周3次定时测量小鼠重量,每周2次测肿瘤大小,评估细菌的抑瘤效应。采用革兰染色法、细菌培养法、PCR技术,了解肿瘤和重要器官中诺维氏梭菌的定植情况。利用HE染色、脾脏指数、胸腺指数,了解细菌干预后荷瘤鼠炎症反应、免疫功能及肿瘤转移的情况。结果:无毒诺维氏梭菌低、中、高剂量组抑瘤率分别为8.49%、44.59%、14.84%,高剂量组小鼠一般情况最差,中剂量组小鼠一般情况最好。培养结果显示,肿瘤组织中有诺维氏梭菌定植,主要脏器无该菌定植。高剂量组和中剂量组荷瘤鼠脾脏质量明显增大,两组脾脏质量和指数与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<0.05)。高剂量组胸腺显著缩小,但胸腺指数各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:无毒诺维氏梭菌能选择性地定植于肝癌区,中剂量(1.0×10^(8)/mL,0.5 mL)无毒诺维氏梭菌能有效抑制免疫正常小鼠H22皮下移植瘤,可能与抗肿瘤免疫和炎症反应有关。