白菜春化相关基因BcFLC的克隆及表达研究

运用同源基因克隆法从‘上海青’白菜(Brassica campestris ssp.chinensis var.communis‘Shanghai Qing’)和‘四九’菜薹(var.parachinensis‘Sijiu’)叶片中分离到FLC的同源基因BcFLC的编码序列、启动子以及内含子1序列;序列比对发现,二者编码的核苷酸序列几乎完全一致,而且启动子及内含子1序列也无实质性差异;对‘上海青’进行人工低温春化处理,BcFLC-1基因在‘上海青’茎尖的表达随着低温处理时间的延长逐渐减弱,低温处理20 d时BcFLC-1基因的表达已经非常弱,低温处理30 d时,表达已检测不到,花芽分化石蜡切片也表明,低温处理20 d,茎尖已开始向生殖状态过渡。BcFLC-2基因在‘四九’菜薹未现蕾之前的叶片中有强表达,而现蕾之后叶片中则检测不到。

白菜离体春化相关基因表达的cDNA-AFLP分析

借助cDNA-AFLP技术分离到15个与白菜离体春化反应相关的表达序列标签(EST)。Blast结果表明:低温春化处理抑制性表达的12个EST,多与异化作用相关基因同源性较高;春化诱导表达的3个EST,分别与编码核糖体蛋白的亚基(或与自主开花途径相关的FAC基因连锁的因子),ATPase的亚基,小G-蛋白亚基的基因同源性较高。