miR-21通过PTEN/AKT通路抑制白血病细胞K562的迁移和增殖

目的 miR-21在多种肿瘤中的研究已有大量文献报道,但其对白血病细胞迁移和增殖的影响及其可能机制尚未完全阐明,文中旨在探讨抑制miR-21对白血病K562细胞迁移和增殖能力的影响及可能的作用机制。方法将miR-21 inhibitor用LipofectamineTM2000转染K562细胞,荧光定量PCR检测miR-21的表达水平;Transwell迁移实验和Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测细胞迁移和增殖变化;Western blot检测PTEN、AKT、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达变化。结果抑制miR-21表达后K562细胞的迁移和增殖能力均受到明显抑制;抑制miR-21能明显增强PTEN蛋白和减低p-AKT蛋白表达水平,对AKT蛋白水平无明显影响。结论抑制miR-21表达可能通过调控PTEN/AKT通路抑制白血病K562细胞迁移和增殖。

高低频探头联合应用诊断急性阑尾炎的价值

【目的】探讨高、低频探头联合应用在急性阑尾炎诊断中的临床价值。【方法】对105例经B超高、低频探头联合应用诊断的急性阑尾炎与病理结果对照后进行回顾性探讨。【结果】联合高、低频探头对急性阑尾炎的诊断,病理图像与超声图像有一定的对应性。【结论】高、低频探头对诊断急性阑尾炎有优势互补的特点,联合应用能明显提高诊断符合率。

吡非尼酮对大鼠角膜基质细胞增殖的影响

目的:探讨吡非尼酮(Pirfenidone,PFD)对体外培养大鼠角膜基质细胞增殖的抑制效果及其对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响。方法:分离培养大鼠角膜基质细胞,根据PFD用药的不同浓度分为对照组(0mg/m L)、实验组Ⅰ(0.15mg/m L)、实验组Ⅱ(0.3mg/m L)、实验组Ⅲ(1mg/m L),加药48h后应用CCK-8法检测其对角膜基质细胞增殖能力的影响,免疫细胞化学和Western-blot分别检测ki-67和TGF-β1表达的变化。结果:CCK-8结果显示,相比对照组,各实验组对角膜基质细胞的增殖均有明显的抑制作用,且随浓度的增大其抑制作用明显增强(均P<0.05);免疫细胞化学显示PFD能明显降低ki-67阳性指数(P<0.05);Western-blot结果显示,PFD能降低TGF-β1的表达,且呈剂量依赖关系(P<0.05)。结论:PFD对大鼠角膜基质细胞的增殖具有明显抑制作用,抑制机制与下调TGF-β1表达密切相关,在减轻角膜创伤愈合方面具有潜在的运用前景。

吡非尼酮抑制转化生长因子β1诱导的大鼠角膜基质细胞纤维化

目的观察吡非尼酮(PFD)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠角膜基质细胞向成纤维细胞转化过程的影响,探讨PFD抗角膜基质纤维化的作用。方法分离培养大鼠角膜基质细胞,免疫细胞化学法检测波形蛋白(Vimentin)进行细胞鉴定。实验分为对照组(DMEM+10%FBS)、TGF-β1组(2 ng/mL TGF-β1+DMEM+10%FBS)和PFD组(1 mg/mL PFD+2 ng/mL TGF-β1+DMEM+10%FBS)。CCK-8法检测细胞增殖能力,Western blot检测细胞CollagenⅠ、CollagenⅢ、Keratocan和CD90蛋白表达。结果大鼠角膜基质细胞呈Vimentin胞浆阳性。与对照组及TGF-β1组比较,PFD组细胞的增殖OD值显著减低(P<0.05)。Western blot显示PFD组的细胞CollagenⅠ、Keratocan蛋白表达增强而CollagenⅢ和CD90蛋白表达减弱(P<0.05)。PFD组的CollagenⅢ/CollagenⅠ比值在3组中最低(P<0.05)。结论 PFD抗角膜基质细胞纤维化是通过抑制TGF-β分子途径,从而影响胶原合成和Keratocan、CD90蛋白表达实现的。

幽门螺旋杆菌感染者胃GPX1和SOD1表达的免疫组织化学研究

目的探讨幽门螺旋杆菌(Hp)感染时胃谷胱甘肽过氧化物酶1(Glutathione peroxidase 1,GPX1)和超氧化物岐化酶1(Super Oxide Dismutase 1,SOD1)的表达,了解Hp的致病机制。方法免疫组织化学方法检测各30例Hp阳性和Hp阴性胃黏膜的GPX1和SOD1的表达情况,分析Hp的可能致病机制。结果 30例Hp阳性患者的胃黏膜的GPXl和SODl蛋白高表达例数分别是29例和30例,相应地30例Hp阴性的胃黏膜的高表达分别为2例和1例,差异具有统计学意义(分别Z=-6.917,P=0.000;Z=-7.429,P=0.000),Pearson相关分析显示胃Hp感染与GPXl和SODl表达均具有密切正相关关系(分别r=0.901,P=0.000;r=0.967,P=0.000)。结论感染Hp后胃黏膜GPXl和SODl表达增强,Hp感染与GPXl和SODl表达增强密切相关,这可能是机体对抗Hp所诱发的氧化应激状态的一种反应。

Galectin-3和上皮-间质转化相关标志物在卵巢癌中的表达及与淋巴结转移的关系

目的研究卵巢癌中半乳糖凝集素-3(galectin-3)和上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关标记物的表达及与淋巴结转移之间的关系。方法免疫组织化学检测57例卵巢癌组织及13例淋巴结转移癌galectin-3和EMT标记物E-cadherin与vimenitn的表达,并分析其与临床病理的关系。结果 galectin-3在卵巢癌的阳性表达率为70.2%,其中Ⅲ+Ⅳ期的表达显著高于Ⅰ+Ⅱ期,有淋巴结转移者显著高于无淋巴结转移者;E-cadherin在卵巢癌的阳性表达率为75.4%,其中Ⅰ+Ⅱ期的表达显著高于Ⅲ+Ⅳ期,无淋巴结转移的表达显著高于有淋巴结转移者。Vimentin的阳性表达率为49.1%,其中Ⅲ+Ⅳ期的表达显著高于Ⅰ+Ⅱ期,高级别肿瘤的表达显著高于低级别,有淋巴结转移的表达显著高于无淋巴结转移者。Pearson相关分析显示,卵巢癌中galectin-3表达与E-cadherin表达呈负相关,而与vimentin呈正相关。结论卵巢癌中出现galectin-3表达和发生EMT的病例容易出现淋巴结转移,galectin-3和EMT标志物改变具有相关性,galectin-3可能通过EMT途径促进卵巢癌进展。

生长分化因子15蛋白在宫颈上皮内瘤变和鳞癌中的表达及意义

目的:探讨生长分化因子-15(growth differentiation factor-15,GDF-15)蛋白在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和鳞癌中的表达及其在宫颈鳞癌发生和发展中的意义。方法 :采用免疫组织化学法分别检测45例宫颈癌(宫颈癌组),90例CIN(CIN1、CIN2、CIN3各30例),30例正常宫颈组织(对照组)的GDF-15的表达情况。结果 :GDF-15在对照组、CIN组、宫颈癌组的阳性率分别为10.0%(3/30)、45.6%(41/90)和80.0%(36/45),CIN组中,阳性率CIN1组为26.7%(8/30),CIN2组为53.3%(16/30),CIN3组为56.7%(17/30)。统计发现GDF-15在CIN组中阳性表达率明显高于对照组中的表达(Z=870.0,P=0.000),CIN2和CIN3的阳性表达率均明显高于CIN1(分别Z=330.0,P=0.037;Z=315.0,P=0.019),宫颈癌组中的阳性率明显高于CIN3组(Z=-2.16,P=0.031)。结论:GDF-15蛋白在正常宫颈组织、CIN、宫颈鳞癌中随着宫颈病变的进展其阳性表达率呈明显上升趋势,检测GDF-15表达可能有助于预测宫颈高度病变的转归。

细胞块在宫颈液基细胞学疑难病例中的应用价值

目的:探讨细胞块在宫颈细胞疑难病例中的应用价值。方法:宫颈细胞标本应用液基细胞学技术(TCT)制片诊断,疑难病例制备细胞块并行HE染色及p16INK4A、Ki67染色,将单纯TCT(TCT组)与TCT结合细胞块HE和免疫细胞化学诊断(联合组)进行比较。结果:p16INK4A、Ki67在26例反应性不成熟鳞状化生细胞中均无表达,在22例HSIL阳性表达分别为81.8%(18/22)、90.9%(20/22);在30例绝经的萎缩上皮中均不表达,萎缩背景中的19例HSIL/SCC均阳性表达。TCT组和联合组的符合率分别为70.1%和95.9%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:疑难宫颈TCT病例行细胞块制作、HE染色及p16INK4A和Ki67染色,可提高宫颈癌筛查的准确性。

MACC1在大肠癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的探讨结肠癌转移相关基因-1(MACC1)在大肠癌患者癌组织、癌旁正常黏膜组织以及不同转移潜能大肠癌细胞系中的表达情况,探讨MACC1表达与大肠癌侵袭转移的关系。方法采用免疫组织化学法检测77例大肠癌患者癌组织及其癌旁正常黏膜组织中的MACC1的表达情况,分析大肠癌患者癌组织的MACC1表达与淋巴结转移、神经侵犯和临床分期等的关系;采用免疫细胞化学法检测不同转移潜能大肠癌细胞株中的MACC1的表达情况。结果大肠癌患者癌组织的MACC1阳性表达率显著高于癌旁正常黏膜组织,差异有统计学意义(P <0. 05)。发生淋巴结转移的大肠癌患者其癌组织的MACC1阳性表达率(97. 3%)显著高于无淋巴结转移患者(55. 0%),有神经侵犯的患者其癌组织的MACC1的阳性表达率(100. 0%)显著高于无神经侵犯的患者(60. 4%),Ⅲ期患者其癌组织的MACC1的阳性表达率(90. 0%)显著高于Ⅰ、Ⅱ期患者(60. 0%,50. 0%),差异均有统计学意义(P <0. 05)。患者癌组织MACC1的表达与其性别、年龄、肿瘤大小、组织学分级、浸润深度无关(P> 0. 05)。MACC1在高侵袭转移潜能SW620细胞中的表达明显强于在低侵袭转移潜能SW480细胞中的表达(P <0. 05)。结论大肠癌患者癌组织MACC1高表达,发生淋巴结转移、神经侵犯和高级别临床分期患者癌组织MACC1高表达,MACC1在高侵袭转移潜能SW620细胞中的表达较强,MACC1的表达情况与癌细胞的侵袭和转移能力密切相关。

吡非尼酮滴眼液对大鼠角膜急性碱烧伤后瘢痕的作用研究

目的:通过吡非尼酮(pirfenidone,PFD)滴眼液对大鼠角膜急性碱烧伤模型的实验研究,探讨PFD对角膜损伤后瘢痕形成的作用。方法:30只健康SD大鼠,随机挑选10只作为对照组。20只于左眼制作急性碱烧伤模型,模型制作成功后随机平均分为PFD组和PBS组,PFD组给予3mg/m L PFD滴眼液,PBS组给予磷酸盐缓冲液,每组左眼给予滴眼液处理,每天4次连续14 d。在第14天观察角膜混浊情况,然后处死大鼠取下左眼角膜,HE染色观察角膜组织结构,免疫组化CD34染色观察角膜组织新生血管情况,Western blot检测TGF-β1的表达。结果:PFD组的角膜混浊评分为0.30±0.48,显著低于PBS组的3.40±0.52(P<0.05)。PBS组角膜基质纤维组织增生合并大量炎症细胞浸润,PFD组炎症细胞数量极少,基质排列较规则。PFD组的血管密度为3.17±1.17,显著低于PBS组的10.83±2.48(P<0.05)。PFD组的TGF-β1蛋白表达量显著低于PBS组(P<0.05)。结论:PFD能抑制大鼠角膜急性碱烧伤模型中的角膜瘢痕形成,其机制与抑制TGF-β1表达和减少新生血管形成有关。

NLRP3炎症小体和氧化应激在新生儿缺氧缺血性脑病患者胎盘组织中的表达及其临床意义

目的研究新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患者胎盘组织中NLRP3炎性小体表达和氧化应激状态,探讨NLRP3炎性小体和氧化应激在HIE中的临床意义。方法选择广州市增城区人民医院2010年7月~2019年5月HIE患者胎盘组织(HIE组)及正常胎盘组织(正常组)各30例,免疫组化法检测两组NLRP3表达。取两组新鲜胎盘组织各10例,测定丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)浓度。并对两组胎盘组织进行病理学评估。结果HIE组胎盘组织中有合体滋养叶细胞结节和有细胞滋养叶细胞的绒毛数量均高于正常组(P<0.05),而具有血管合体细胞膜的绒毛数少于正常组(P<0.05)。HIE组胎盘组织中的NLRP3表达量明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。HIE组的SOD活力低于正常组(P<0.05),MDA含量高于正常组(P<0.05)。NLRP3与SOD活力呈负相关(r=-0.63,P=0.00),而与MDA含量呈正相关(r=0.74,P=0.00)。结论HIE新生儿胎盘组织中NLRP3炎症小体表达明显增加并存在异常氧化应激,两者存在相关性,其可能是新生儿HIE发生的原因。

简易细胞块和细胞芯片的制作方法及应用价值

目的介绍一种石蜡包埋细胞块及细胞芯片的简易制作方法及验证其应用价值。方法收集临床送检细胞学标本,采用简易方法制作成石蜡包埋的细胞块及细胞芯片,HE染色、免疫细胞化学染色及TUNEL检测法验证其应用价值。结果此方法能简易制作出细胞块及60个点阵左右的细胞芯片,经HE染色、免疫组化染色及TUNEL凋亡染色证实,染色效果良好,结果可靠。结论本方法制作的石蜡包埋细胞块及细胞芯片的操作容易,设备简单,细胞形态和抗原保持良好,值得推广应用。

石蜡包埋细胞芯片的手工制备方法及其应用价值

目的介绍一种石蜡包埋细胞芯片的简易制备方法及验证其应用价值。方法收集科研培养细胞或临床细胞学标本,手工法制作石蜡包埋的细胞芯片,并进行HE染色、免疫组织化学法及TUNEL检测法验证细胞芯片的应用价值。结果此法熟练掌握后能制备出60个点阵左右的细胞芯片,肉眼观察点阵完整,排列均一,经HE染色、免疫组化染色及TUNEL凋亡染色证实,染色效果良好,结果可靠。结论简易手工法制备的石蜡包埋细胞芯片的操作容易,设备简单,能够迅速成型制备出多种不同类型的细胞芯片,值得推广应用。

p16^(INK4A)、Ki-67检测在宫颈液基细胞学疑难病例鉴别诊断中的应用

目的探讨p16INK4A、Ki-67检测在宫颈液基细胞学疑难病例鉴别诊断中的临床应用价值。方法宫颈细胞学诊断疑难病例54例,其中绝经25例;液基细胞学技术(TCT)初诊后制片,进行p16INK4A、Ki-67免疫细胞化学检测。结果反应性不成熟鳞状化生18例,p16INK4A、Ki-67均为阴性表达,组织活检或TCT复查均未见上皮内病变;ACS-H或HSIL 11例,p16INK4A、Ki-67阳性表达分别为11例和10例,病理活检证实为CINⅡ或CINⅢ。25例绝经患者中上皮萎缩鳞状7例,p16INK4A、Ki-67均阴性,活检结果或TCT复查未见上皮内病变或恶性病变;HSIL 12例,p16INK4A、Ki-67均阳性,病理活检CINⅢ8例、鳞癌4例;鳞癌6例,p16INK4A、Ki-67均阳性,病理活检结果均为鳞癌。结论 TCT结合免疫细胞化学在诊断疑难宫颈细胞学病例中具有重要临床意义,p16INK4A、Ki-67对非上皮内病变和上皮内瘤变有鉴别诊断价值。

结直肠癌中MACC1的表达及与淋巴结转移的相关性

目的研究结肠癌转移相关基因-1(MACC1)在结直肠癌(CRC)中的表达及与淋巴结转移的相关性。方法免疫组化检测MACC1在77例CRC及其癌旁正常黏膜组织中的表达,免疫细胞化学检测不同转移潜能CRC细胞株的MACC1表达。结果 MACC1在CRC的阳性率为76.62%,显著高于癌旁黏膜的11.69%(χ2=65.83,P=0.00)。对无淋巴结和有淋巴结转移行单因素分析,分化程度、肿瘤大小、浸润深度、MACC1表达、神经侵犯和临床分期与淋巴结转移有关(P <0.05)。Logistic回归分析示MACC1表达、神经侵犯、浸润深度和临床分期是淋巴结转移的独立危险因素(P <0.05)。免疫细胞化学示MACC1在高淋巴结转移潜能的SW620中高表达,在低淋巴结转移潜能的SW480中低表达。结论 MACC1的异常高表达参与了CRC的恶性进展,是淋巴结转移的独立危险因素,具有重要临床价值。

结直肠癌微血管、淋巴管以及血管生成拟态与其临床病理特征的关系

目的研究结直肠癌中微血管密度(MVD)、淋巴管密度(LVD)和血管生成拟态(VM)与其临床病理特征的关系。方法选取广州市增城区人民医院2015年3月至2017年12月期间手术切除的结直肠癌标本77例作为研究对象,用免疫组织化学CD34染色检测MVD,免疫组织化学D2-40染色检测LVD,利用CD34和PAS双重染色检测VM,分析MVD、LVD和VM与结直肠癌临床病理特征之间的关系。结果结直肠癌浸润边缘的MVD为45.1±19.7,明显高于正常结直肠组织的30.4±11.2;结直肠癌浸润边缘的LVD为42.5±15.6,明显高于正常结直肠组织的21.6±12.3,差异均有统计学意义(P<0.05);结直肠癌浸润边缘的MVD平均值在不同肿瘤大小、肿瘤分化程度、临床分期以及有无神经侵犯间的两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移者的肿瘤浸润边缘的LVD为52.5±21.8,明显高于无淋巴结转移者的30.1±16.4,差异有统计学意义(P<0.05);LVD在不同年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期患者中比较,差异均无统计学意义(P>0.05);结直肠癌组织中出现VM的例数在不同肿瘤大小、肿瘤分化程度、临床分期以及有无神经侵犯者间比较差异均有统计学意义(P<0.05);相关性分析结果显示,MVD、LVD与VM呈显著密切正相关(r均>0.5,P<0.01)。结论结直肠癌中MVD、LVD和VM与其不良临床病理特征有密切关系,对判断结直肠癌侵袭、转移乃至预后可能有重要意义。

基于免疫组织化学、组织芯片和RNA测序数据分析MACC1在结直肠癌的临床病理学意义

目的探讨结肠癌转移相关基因-1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)在结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)的表达及临床病理意义。方法免疫组织化学检测MACC1在77例CRC及其正常黏膜组织的表达及分析其临床病理意义。HPA和GEPIA数据库分析MACC1在CRC的mRNA和蛋白表达以及与预后的关系,GEPIA数据库分析MACC1表达与错配修复基因的相关性及与CRC临床分期的关系。结果MACC1在CRC的阳性表达率为75.32%,显著高于癌旁正常黏膜的11.69%。MACC1的表达与CRC的淋巴结转移、神经侵犯和临床分期有关,而与患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、侵犯深度和部位无关。公共数据库分析证实MACC1在CRC表达增加。GEPIA数据库分析显示在不同的临床分期各组间MACC1表达差异具有统计学意义,MACC1基因的表达与错配修复基因MSH2、MSH6、MLH1和PMS2的表达均呈显著相关性。两个数据库分析均显示高表达MACC1的CRC患者生存预后差。结论MACC1 mRNA和蛋白在结直肠癌均高表达,并与结直肠癌侵袭、转移、预后和错配修复基因密切相关,MACC1在结直肠癌恶性进展中起到致瘤作用,具有重要临床价值。

乙状结肠锯齿状腺癌伴异位骨化生1例临床病理特征及文献复习

目的探讨乙状结肠锯齿状腺癌伴异位骨化生l例的临床病理特征及意义。方法回顾性分析1例乙状结肠锯齿状腺癌伴有异位骨化生的病例并复习文献。结果病理巨检见肠腔内菜花样肿物,大小4.7cm×3.4cm×3.1cm,切面灰白色、质地偏硬。镜下中分化腺癌具有锯齿状结构,胞浆丰富、呈嗜酸性或嗜中性,有黏液、筛状、花边状和小梁状区域,侵犯深度达浆膜层。肿瘤间质中可见岛状化生骨,周边被覆骨母细胞,骨岛周围见明显成纤维细胞增生及玻璃样变,与成骨细胞移行的现象。肿瘤与相对正常黏膜交界处可见锯齿状腺瘤结构。肿瘤未见出血或坏死,间质中较多淋巴细胞浸润,可见少数淋巴管癌栓,肠系膜淋巴结未见癌转移。免疫组织化学染色显示CEA、CK8/18、CK19、β-catenin和E-cadherin均阳性表达,CK20部分阳性表达,CK7、CDX-2、Vimentin、bcl-2、S-100、CD56、p16均为阴性,Ki-67约为80%阳性。结论肠锯齿状腺癌中异位骨化生只是一个组织学现象,没有临床预后意义,发生的机制尚无确切定论。

改良巴氏分级分类法与TBS描述性分类法的对比研究

①目的改进传统巴氏细胞学取材方法,对改良巴氏分级分类与TBS描述性诊断在宫颈癌及癌前病变筛查中的应用进行对比。②方法以手术后未固定的全子宫标本和锥切宫颈标本为研究对象,一组行改良巴氏涂片/改良巴氏分级分类细胞学检查;一组行液基细胞学涂片/TBS报告系统细胞学检查,以组织病理学诊断结果作为对照,以灵敏度、特异度、准确性等作为评价指标。③结果灵敏度:液基细胞学涂片/TBS描述性诊断系统为93.12%,改良巴氏涂片/改良巴氏分级分类法为90.00%(χ2=2.46,P>0.05),统计学无显著差异。特异度:液基细胞学涂片为/TBS描述性诊断系统为85.59%,改良巴氏涂片/改良巴氏分级分类法为88.53%(χ2=1.30,P>0.05),统计学无显著差异。准确性:液基细胞学涂片/TBS描述性诊断系统为89.58%,改良巴氏涂片/改良巴氏分级分类法为90.14%(χ2=2.82,P>0.05),统计学无显著差异。④结论液基细胞学只是制片技术的改进,不能代替人工经验的判读。建议对经济欠发达的基层单位妇女进行改良巴氏涂片细胞学检查,并推广TBS描述性诊断报告系统。

B超高低频探头联合应用诊断急性阑尾炎的价值

目的探讨高、低频探头联合应用在急性阑尾炎诊断中的价值。方法对105例经B超高、低频探头联合应用诊断的急性阑尾炎与病理结果对照后进行回顾性分析。结果联合高、低频探头对急性阑尾炎的诊断,病理图像与超声图像有一定的对应性。结论高、低频探头对诊断急性阑尾炎有优势互补的特点,联合应用能明显提高诊断符合率。