埃博拉假病毒突变体感染性及靶向抗体中和作用评价

目的:利用埃博拉假病毒(EBOV)报告系统,体外评价埃博拉病毒突变体对4种细胞系的相对感染力及3株单抗对突变体的中和能力。方法:构建表达埃博拉假病毒及其突变体GP蛋白的重组质粒GP-pcDNA3.1,与含有萤火虫荧光素酶报告基因的HIV骨架载体pSG3.ΔEnv.CMV.Fluc共转染HEK293T细胞获得假病毒上清。利用Western blot法及HIV p24 ELISA抗原定量试剂盒对假病毒进行鉴定及定量,采用等量的假病毒感染HEK293T、Huh7、A549及THP-1细胞,36 h后,裂解细胞测荧光素酶活性(RLU),计算突变体与母本的相对感染力。将mAb114、ADI-15946、rEBOV-520与EBOV及其突变体假病毒预孵育1 h,将假病毒上清和抗体混合液感染HEK293T细胞,36 h后测RLU值,计算抑制率。结果:相对于母本,所有突变体感染细胞的能力均有不同程度增强。单抗mAb114、ADI-15946能有效中和母本及14株突变体,rEBOV-520对N107D-P330S-G480D中和作用减弱。结论:体外实验证明14株突变体入侵靶细胞能力增强。3株中和抗体对突变体中和作用良好,为应对EBOV突变引发的疫情提供了一定参考。

抗戊型肝炎病毒IgG抗体定量线性标准品的标定及初步应用

目的建立抗戊型肝炎病毒(Anti-HEV)IgG抗体的定量线性标准品,并进行初步应用。方法利用抗-HEV IgG和抗-HEV IgM ELISA检测试剂筛选出1份抗-HEV IgG阳性血清L9,经基因1型和4型的HEV ORF2C-端抗原及239抗原进行Western blot确认后,用WHO定量标准品,由3个实验室协作标定,利用量反应平行线法计算其抗-HEV IgG的含量。考察已标定的L9血清的稳定性,并用所标定的1.5倍系列稀释的血清对国内外6家抗-HEV IgG试剂的灵敏度进行检测。选择一灵敏度较高的试剂,在其线性范围内取L9的5个稀释度作为抗-HEV IgG抗体定量线性标准,对高、中、低浓度的3份临床血清重复检测5次,考察其重复性;对实验感染猴的系列血清中抗-HEV IgG含量进行定量检测,考核该定量线性标准品的应用效果;并对每次定量试验中的线性方程进行分析,确定相关系数r值和斜率k值的范围。结果经国内外试剂检测筛选出的阳性血清L9与基因1型和4型的HEV ORF2 C-端抗原及239抗原均有阳性反应。经协作标定,L9血清抗-HEV IgG含量为16.9U/ml。L9血清在-20℃下保存6、12、18个月,2～8℃保存24、48、96h后,定量结果均在95%置信区间内,且抗-HEV IgG含量均未明显下降。6家抗-HEVIgG检测试剂灵敏度差异较大,范围为0.03～5.00U/ml。确定L9血清从0.42U/ml开始的5个1.5倍系列稀释度,作为某一试剂抗-HEVIgG抗体定量线性标准品。利用该线性定量标准检测高、中、低浓度的3份临床血清,定量结果重复性较好;对实验感染猴系列血清进行定量检测,结果可有效地反映抗体水平变化趋势;94%的定量检测试验,r≥0.98,1.15≥k≥0.95。结论已建立了抗-HEVIgG抗体定量线性标准品,可用于疫苗免疫原性评价和流行病学调查。

腾冲市固东镇江东银杏村银杏生长不良状况调查

采用表格调查法登记到保山市腾冲市固东镇江东银杏村383株生长不良植株,随机抽取47株进行实测调查和访谈调查。结果表明:(1)江东银杏村生长不良银杏植株在逐年增加,古银杏树增加的比例更大;(2)生长不良植株的主要表现包括生长势弱,叶片变小、变薄,早黄,早落,枯菱,叶黄期和落叶期提前30~45天,花变小,花芽少,落花严重,果实变小,落果严重,果实青黄不一,出现实心果、半食果;树干干缩,树皮脱落,树体腐烂,枯枝增多,部分植株出现根腐,这些表现将成为判断银杏树是否健康的重要依据;(3)江东银杏生长不良现象已引起部分群众关注,群众自发采取了重剪(或截干)复壮、施肥、杀虫等抢救措施,但由于缺乏组织性、统一性,没有从根本上改变江东银杏生长不良的现状;(4)银杏树生长不良的原因多且复杂,既有病虫害引发的,也有因缺肥、树体营养消耗过大、受环境因子胁迫、缺乏微量元素等引起的生理性病害,有的植株是多种因素复合影响导致生长不良的;(5)江东银杏村银杏树面临着建设活动、过度生产、外来生物、废弃物影响等方面的风险(6)应及时采取病虫害防治、复壮等抢救性措施,建立长效机制加强江东银杏树的保护管理。

乙型肝炎病毒中国流行株B、C、D/C及A基因型的全基因克隆与序列分析

目的:扩增克隆乙型肝炎病毒(HBV)B,C,D/C及A基因型的全基因组,构建不同基因型的全基因序列克隆.方法:从中国慢性乙型肝炎患者血清提取DNA以L-PCR技术对3.2kb的HBVDNA进行扩增,纯化后克隆到TA载体.对于HBV不同基因型的全基因序列利用Simplot、DNAStar(ClustalW方法的MegAlign和Phylogenetictree)等生物软件进行分析.结果:克隆出我国主要存在的几种HBVDNA全基因序列:B、C、D/C和A基因型,包括:adr、adw、ayw血清型.B基因型(adw血清型)全基因序列长度为3215bp,C基因型(adrq+血清型)为3215bp,D/C基因型(ayw2血清型)为3215bp,A基因型(adw血清型)为3182bp,均递交GenBank.在H3样品中的4个全基因克隆中存在一个同时含有2853-2885nt缺失突变和核心区的1762A-T、1764G-A双位点突变的变异株,表明同一个体中同时存在突变株和野生株,可能是耐抗病毒药物的分子基础.结论:本研究克隆了我国有报道存在的主要基因型、血清型的HBV全基因序列,为全面了解我国HBV基因型和血清型提供了序列资料.

不同人类免疫缺陷病毒感染途径群体中戊型肝炎病毒的流行情况

本研究旨在了解不同人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染途径群体中戊型肝炎病毒（hepatitis E virus，HEV）抗体情况，探讨HEV疫苗接种的必要性。采集HIV感染者的血清或血浆，利用酶联免疫吸附试验（enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA）检测HEVIgG抗体、IgM抗体及抗原，荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）检测HEV核酸，Roche高纯化HIV-1核酸定鼍检测试剂盒（PCR荧光法）检测HIV感染者的HIV载量。比较分析不同HIV感染途径群体中HEV流行率的差别。结果显示，HIV感染者中HEV IgG抗体的阳性率为37．4％，静脉吸毒、成分献血和传播途径不明HIV感染群体的HEVIgG抗体阳性率分别为49．3％、39．5％和30．4％。HEV核酸荧光PCR检测结果均为阴性。3种HIV感染群体之间HEV IgG抗体阳性率差异无统计学意义（x2=2．978，P〉0．05）。HEVIgG阳性与阴性感染者之间HIV载量差异无统计学意义（P〉0．05）。结果提示，为保护HIV感染者免受HEV感染，应考虑接种HFV疫苗。

滇西南地区不同道地树种对蜜环菌生长的影响

目的:筛选滇西南地区最适合天麻蜜环菌生长的道地树种。方法:选用滇西南地区32种常见阔叶树种,制作蜜环菌三级种培养基培养蜜环菌,比较蜜环菌在不同树种中的生长速度及菌索生长状况。结果:白檀培养基中,蜜环菌的生长速度快,菌索发生变异,呈扇形,生长状况良好;蜜环菌在欧洲山毛榉等20种树种配制的培养基中,菌索的生长速度和菌索外部形态特征都正常;紫丁香、木通、木莲、厚皮香、金叶子、辣木树、化香树、团香果、白杜鹃和多花含笑,这11种树种的蜜环菌生长速度和生长状况不理想。结论:白檀是培养蜜环菌三级种的优良树种;欧洲山毛榉等20种树种也可做为蜜环菌三级种培养的培养基成分;紫丁香等11种树不适合蜜环菌的生长,不能作为蜜环菌培养的培养基成分。

肠道病毒71型研究进展

肠道病毒71型是一种具有较强致病性的肠道病毒,主要引起患者手足口病(Hand,foot and mouth disease,HFMD)。已在世界多个地区爆发和流行,主要症状是手、足、口、臀等部位皮疹或疱疹,少数患儿可以并发无菌性脑膜炎、脑炎、急性弛缓性麻痹等严重神经系统并发症,呼吸道感染和心肌炎等,可致残、致死。2007—2008年中国多个地区均有较大规模流行,危害十分严重。近四十年的多次流行中,EV71病毒的基因不断进化,研究其基因变化特点对早期诊断、分型以及了解基因与流行、致病的关系等有着重要的意义。对EV71感染尚缺乏有效的抗病毒药物,研制有效的预防性疫苗迫在眉睫,目前有灭活疫苗、减毒疫苗、多肽或蛋白疫苗、DNA疫苗等多种尝试,但至今尚无EV71疫苗上市。本文对EV71基因、实验室诊断和疫苗方面的研究进展进行了综述。

青海地区乙型肝炎感染者C/D基因型重组分布

目的区分D基因型重组类型,了解青海地区乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者C/D基因型重组情况.方法收集217份青海地区慢性乙型肝炎感染者样品,PCR扩增535-1460 nt和1779-2400 nt2个片段的乙型肝炎病毒基因序列,分2区(593-799 nt、799-1450 nt和1799-2400 nt)构建进化树,确定青海地区HBV基因重组类型.利用INNO-Li PA HBV分型试剂检测青海地区的C/D基因型重组样品,计算符合率.结果青海地区利用HBV不同区域进化树分型,结果显示各基因型比例为CD1(61.9%)、CD2(8.4%)、C(27.0%)和B(2.8%).基因型分布在藏族和汉族乙型肝炎感染者中的差异具有显著的统计学意义(?2=17.9,P<0.01),藏族乙型肝炎感染者中C/D基因型重组和C基因型比例为9 1.5%和8.5%;在汉族中的比例为68.5%和32.3%.C/D基因型重组和C基因型HBV e抗原阴阳性的差异(?2=0.28,P>0.05)以及病毒载量的差异(t=1.125,P>0.05)均没有统计学意义.C/D重组样品INNO-Li PA分型试剂检测结果为D基因型的理论符合率为87.8%.结论青海地区乙型肝炎感染者以CD1(10-799 nt)基因型重组以主,对其临床意义应进一步的研究分析.该地区的HBV分型检测应注意基因重组对分型试剂的影响.

乙型肝炎病毒的分型研究

乙型肝炎病毒(HBV)可按两种方法分型:血清型和基因型,目前国内外分型研究表明HBV的基因型具有一定的地域分布特点,并且临床表现、预后、治疗效果与基因型的关系密切。对HBV分型的研究,有利于了解HBV分布传播的规律、探讨HBV的致病机制、提示预后等,是目前乙肝研究的热点之一,本文将对国内外乙型肝炎病毒的分型研究进行综述。

通用流感疫苗研发进展

流感病毒感染在世界范围内引起较高的发病率和死亡率。接种流感疫苗是预防和控制流感病毒感染及其严重并发症的有效手段,但由于流感病毒抗原的变异性,导致疫苗毒株与当年的流行毒株的抗原性并不完全匹配,造成流感疫苗的有效性降低,不能有效预防季节性和大流行流感,因此研发通用疫苗成为当前的主要趋势。本文综述了流感疫苗的发展及通用流感疫苗的研发平台,为未来新型流感疫苗的设计和开发提供参考。

腾冲县国有林场林下经济发展策略与实践——基于“短板效应”和优势互补合作机制

基于"短板效应",分析了腾冲国有林场发展林下经济的必要性和存在的"短板",从优势互补的角度,提出腾冲国有林场林下经济发展策略:充分发挥自身优势,采取优势互补的合作机制,寻求有资金、有技术、懂管理、会营销的企业合作,走合作共赢的共同发展之路。基于这一策略,介绍了腾冲国有林场合作发展林下经济的实践。

基于自然语言理解的Web敏感信息监控

本文探讨基于自然语言理解对Web信息进行数据挖掘的方法。对敏感信息监控的有效方法应将传统的Web数据挖掘的方法和自然语言理解方法相结合,寻求一种对Web页面进行更高精度的信息分析和数据挖掘,在此基础上实现对敏感信息监控的目的。

刑侦档案文本挖掘系统平台中的文本精炼初探

研究利用文本挖掘技术对已有的刑侦档案进行信息整合和文本挖掘,可以获取大量的有用知识,这些知识不论对刑侦研究,还是对于一线的刑侦工作都有很大的价值。文章对刑侦档案的信息整合和挖掘进行了初步探讨,给出面向刑侦档案文本挖掘的系统框架及文本精炼方法。

乙型肝炎病毒S-preS1-C融合基因在酵母中的表达及抗原性分析

以HBV全基因组质粒为模板,扩增出目的区段:S(1-222AA),preS1(10-50AA)和C(2-30AA),以酶切-PCR的方法进行连接,克隆入表达载体pPIC3.5k,电穿孔转化后利用G418加压筛选出多拷贝整合菌株,诱导表达并对表达产物进行检测。结果显示融合后的基因为ss1c,长度约为906bp。在酵母中成功地进行了表达,表达产物(SSIC)的大小约为31kDa,并形成直径约为22nm的病毒样颗粒。表达产物与HBs抗体、preS1抗体和HBc抗体均有特异反应。为进一步研究治疗性疫苗提供了重要的基础。

一个应用中的多媒体教学网络系统

一种集多种媒体于一身,能对文字、图像、声音等媒体信息进行同步播送、监看和控制的多媒体教学网络系统正在走进教室,并已成为现代计算机教学发展的新趋势.

综述计算机网络面临的威胁

计算机信息网络面临着来自内部和外部的威胁。网络的脆弱性和网络所面临的安全问题对国家和社会安全构成了潜在的威胁。着重分析计算机信息网络系统的脆弱性,所受到的系统内、外部的威胁攻击,以及所引发的信息社会的安全问题。

基于“微笑曲线”理论的腾冲县香叶树产业发展战略研究

基于"微笑曲线"理论对香叶树产业价值链进行分析,结合腾冲县香叶树产业发展现状,提出了重点做好良种培育和产品研发,实施标准化种植管理,扶持附加值低的种植环节,鼓励发展加工业,建设优势品牌和营销网络,全面建成腾冲香叶树优势产业体系的腾冲县香叶树产业发展战略,并在此基础上提出了建设科研开发体系、实施人才发展战略、实施标准化种植管理、扶持附加值低的种植环节、鼓励发展加工业、建设营销网络和强化售后服务、强化品牌意识和建设优势品牌等发展建议。

中文停用词表的自动选取

通过对现有基于统计的停用词选取方法的考察,提出了一种新的停用词选取方法.用该方法分别计算词条在语料库中各个句子内发生的概率和包含该词条的句子在语料库中的概率,在此基础上计算它们的联合熵,依据联合熵选取停用词.将该方法与传统方法选取的停用词表进行了对比,并比较了将各种方法用于文本分类的预处理时对分类效果的影响.实验结果表明,该方法更好地避免了语料的行文格式对停用词选取的影响,比传统方法更适用于文本分类的预处理.

应用IU标准对HBsAg检测试剂的分析

目的应用IU标准对HBsAg检测试剂进行比较分析。方法筛选1份HBsAg阳性血浆，血清学检测证实为HBsAg adr亚型，参照WHO HBsAg标准品稀释方法进行稀释，以IU为单位的HBsAg国际标准品为标准，应用双平行线终点稀释方法对该样品进行定量标定。以标定的IU为单位样品，对国内外13家HBsAg检测试剂进行检测。结果待标定的样品经平行稀释后，测定的浓度值与理论浓度值误差均在11％以内，应用IU标准对国内外HBsAg检测试剂进行检测，国外试剂的最低检出限可达0．02～0．06IU／ml，国产试剂除1家可达0．14IU／ml外，其余试剂均在0．29～0．91IU／ml之间。结论应用IU标准检测HBsAg检测试剂，国外试剂的灵敏度明显高于国内试剂。

献浆员中新型冠状病毒SARS-CoV-2中和抗体检测分析

目的:静注人免疫球蛋白(IVIG)和新冠肺炎恢复者的血浆已被推荐用于重症新冠肺炎患者的治疗。因此,血浆中新型冠状病毒(SARS-CoV-2)中和抗体水平需要得以及时评价。本研究利用不需要在生物安全三级实验室操作的SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法,建立了快速检测中和抗体的策略。方法:采用新型冠状病毒SARS-CoV-2假病毒,对1080份健康献血员血浆及26批次IVIG的SARSCoV-2中和抗体进行检测。初筛采用1∶30倍稀释检测;对初筛阳性(抑制率≥50%为阳性)的样本进行复试,复试采用1∶30、1∶90和1∶270三个梯度;对于复试阳性的样本进行中和特异性分析,进一步检测针对水疱性口炎病毒(VSV)、严重急性呼吸道综合征冠状病毒(SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的中和活性。结果与结论:在1∶30倍稀释时,26批次IVIG的SARS-CoV-2中和抗体均为阴性,1080份献血员血浆中SARS-CoV-2中和抗体阳性率为0.6%(6/1180);对6份阳性血浆的特异性分析显示均为对VSV、SRAS-CoV或MESR-CoV假病毒的非特异中和作用。本研究表明该假病毒中和抗体检测方法和快速检测策略可以用于IVIG、健康献血员和感染者恢复期血浆中的中和抗体检测,发现IVIG针对SARS-CoV-2无特异的中和抗体活性,IVIG在临床重症治疗中发挥的是非病毒特异的辅助治疗作用。