拟南芥光周期开花突变体的筛选和基因的鉴定

以双子叶模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)突变体cry1cry2为实验材料,用含有激活标记质粒pSKI015的农杆菌浸花进行转化,构建了拟南芥T-DNA插入突变体库.通过筛选和观察分析,获得了一些开花时间比cry1cry2明显延迟或明显提早的突变体.采用IPCR(inverse PCR)和TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)等方法,鉴定了这些突变体T-DNA插入位点的基因组旁邻序列,并采用半定量RT-PCR对插入位点两侧基因的mRNA水平进行了分析,初步鉴定了与开花相关的候选基因,为进一步研究其功能,深入研究隐花素调节光周期开花的作用机制奠定了基础.

不同品种黄花菜游离氨基酸组成的主成分分析及聚类分析

为研究不同黄花菜品种游离氨基酸(free amino acid,FAA)含量、组成及其呈味效果差异,以湖南省主栽的10个黄花菜地方特色品种为研究对象,通过氨基酸自动分析仪快速检测游离氨基酸种类及含量,采用味道强度值(taste activity value,TAV)、各指标相关性、主成分分析法及聚类法进行分析及综合评价。结果表明:黄花菜中游离氨基酸含量丰富,含有14～17种氨基酸,总量为13.935 mg/g。不同黄花菜品种之间氨基酸总量(total free amino acid,TFAA)、人体必需氨基酸(essential amino acid,EAA)、呈味氨基酸(taste-active amino acid,DAA)及限制氨基酸(limiting amino acid,LAA)含量均存在较大差异,其中冲天花中FAA、EAA、DAA及LAA的含量均最高。谷氨酸对黄花菜风味的影响最大,TAV在3.53～7.51之间,平均值达到5.66。通过主成分分析提取3个主成分,累计方差贡献率为89.242%,较好地反映黄花菜中FAA的综合信息,综合得分排列前3位的品种是冲天花、驼驼花、八月花。采用聚类分析将10个黄花菜品种分为4类,该聚类结果与主成分分析结果一致,较好地反映出黄花菜不同种质间的差异性。

近红外光谱法结合化学计量学方法用于茶油真伪鉴别分析

采用近红外光谱透反射模式结合化学计量学方法对纯茶油进行真伪鉴别。收集并扫描了163个样品(合格97个,不合格66个),对样本进行光谱数据预处理优化及有效波段筛选。在5750～6000 cm-1波段处,光谱经过平滑,一阶导数以及自归一化后,采用无监督学习算法即主成分分析法(Principal componentanalysis,PCA)进行分类,然后再采用有监督学习算法即判别分析(Discriminant analysis,DA)建立校正模型,进行预测。PCA和DA都能够得到满意的结果,两种方法的分类准确率均达到98.8%。结果表明:近红外光谱可作为一种简单、快速、无损、可靠的方法用于鉴别纯茶油的真伪。

近红外光谱与化学计量学方法用于镉污染稻米的定性鉴别

采用近红外光谱漫反射模式结合化学计量学方法对稻米镉含量是否超标进行可行性鉴别分析。本研究收集了120个样本,测定其镉含量值(合格49个,不合格71个)。对光谱数据预处理方法优化,确定了平滑,一阶导数以及自归一化后的数据作为输入变量。采用竞争性自适应重加权算法筛选了45个关键变量,并对上述变量的光谱吸收带进行归属。比较了主成分分析-判别分析法、偏最小二乘识别分析、线性判别分析、K-最近邻法与簇类独立软模式法5种模式识别方法。确定采用偏最小二乘识别分析建模效果最好,模型训练集与预测集鉴别准确率分别达到98.8%与91.7%。结果表明,近红外光谱作为初筛方法可用于鉴别稻米中镉含量是否超标。

基于感官和气相色谱-离子迁移谱分析油温对辣椒油风味的影响

采用感官评价及气相色谱-离子迁移谱(GC-IMS)分析不同油温制备的辣椒油的风味特征及挥发性有机化合物(VOCs)。感官评价结果表明,不同油温(120,140,160,180,200℃)制备的辣椒油香气差异显著(P<0.05),色泽及滋味差异不显著。GC-IMS分析结果表明,共鉴定出辣椒油中的VOCs 45种,主要有醛类、酮类及萜烯类,油温对辣椒油中VOCs的种类没有影响。随着油温的升高,醛类(己醛、戊醛、2-甲基丁醛、3-甲基丁醛)、萜烯类(月桂烯、柠檬烯、α-蒎烯)、(E)-2-己烯醇、1,8-桉树脑、乙酸、丙酸、1-辛烯-3-酮呈现下降趋势,在180、200℃油温制备的辣椒油中,醛类(壬醛、辛醛、庚二烯醛、E-2-辛烯醛、E-2-庚烯醛、丙醛、糠醛、5-甲基糠醛)、乙酸苯乙酯、二甲基二硫、异丁酸的含量较高。相似度及PCA分析结果显示,不同油温的辣椒油香气特异性明显。

不同品种枣果果实品质分析与评价

试验研究6个品种枣果的理化品质特性,评价指标主要包括可溶固形物(TSS)、可滴定酸、糖酸比、还原糖、可溶性糖、有机酸和游离氨基酸。结果表明:葡萄糖、果糖和蔗糖是其主要可溶性糖,且均以蔗糖含量最高;苹果酸和琥珀酸是其主要有机酸,占有机酸总含量92%以上;脯氨酸是其含量最丰富的氨基酸,占总游离氨基酸68%以上,其次是天冬氨酸。梨枣因含水量高,酸度低、可食率高、糖酸比适中,适合鲜食;哈密大枣和木枣含糖量高、含水量低、酸度较高、糖酸比高,适合干制;金丝小枣与灰枣酸度较高,但TSS与糖含量也较高,可鲜食也可干制。

GA2ox8基因过量表达诱导蓝光下拟南芥光形态建成

检测不同光照强度蓝光下,过量表达GA2ox8基因的转基因植株光形态建成表型的结果表明,突变体比各自的母本的下胚轴短,茎尖角度和子叶张开度较大,花青素和叶绿素的含量较高,并且其差异与GA2ox8基因的表达量呈正相关。RT-PCR检测光调节基因表达水平的结果显示,暗培养条件下其突变体幼苗中的水平比各自的母本高,蓝光下35S::GFP- GA2ox8-1、35S::GFP-GA2ox8-8与母本col-4之间差异不明显,但scc7-D中的水平比母本crylcry2高。这似乎说明,GA2ox8基因过量表达可诱导蓝光下拟南芥幼苗光形态建成。

温敏核不育系水稻株1S及其矮秆突变体SV14茎的蛋白质组学比较

采用双向凝胶电泳对温敏核不育水稻株1S和其矮秆突变体SV14的茎(穗颈下第1节和第2节)蛋白进行了分离,通过银染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.选取了26个蛋白质点采用MAL-DI-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,最终有12个蛋白质点得到了可靠鉴定.其中在SV14中相对于株1S上调的仅有OSJNBa0039C07.13蛋白,其它蛋白均表现为下调.这些差异蛋白按照功能可分为4类:(1)能量代谢相关蛋白;(2)次生代谢相关蛋白;(3)调控蛋白;(4)未知蛋白.对光合系统Ⅱ氧延伸复合物蛋白质前体2,果糖二磷酸醛缩酶,UDP-葡糖醛酸脱羧酶对应的基因进行了半定量RT-PCR分析,发现这几个基因与蛋白质的表达不一致,可能是RNA发生了翻译后修饰而减少了蛋白表达量的结果.这些差异蛋白很可能与水稻矮化有关,为水稻矮秆基因的寻找提供了另一个有效途径.

传统鲊鱼固态发酵过程中细菌群落与挥发性风味物质的相关性

目的:了解传统鲊鱼发酵过程中微生物演替及挥发性风味物质的变化规律。方法:采用传统微生物计数、高通量测序、气相色谱—质谱联用等方法,探究传统鲊鱼固态发酵过程中(0~180 d)微生物菌消长和挥发性风味化合物的变化以及两者的相关性。结果:传统微生物计数和高通量测序两种方法得出葡萄球菌、乳酸菌类是传统发酵鲊鱼发酵过程中的主要优势细菌属。在发酵0~180 d的样品中共检出挥发性化合物69种,主要包括酸类、醇类、醛类、酮类、含N化合物、含苯化合物、芳香烷烃化合物、酯类,其种类和含量随着发酵时间变化而变化。相关性分析发现,葡萄球菌与含N化合物类呈正相关,与醇类化合物负相关;乳酸菌与壬酸、1-辛烯-3-醇、壬醛、肉豆蔻醛、2,4-二甲基苯乙烯、癸烯、己酸乙酯显著正相关(0.01<P<0.05),与庚酸、3-甲基丁酸、2,3-丁二醇、2,6-二叔丁基对甲酚、胡椒烯、肉豆蔻乙酯显著负相关;柠檬酸杆菌、特布尔氏菌属、嗜冷杆菌属、不动杆菌属、海洋螺菌目、黄杆菌目等微生物虽然在整个发酵过程中相对丰度不高,但与风味物质形成也存在明显的相关性。结论:微生物群落与挥发性风味化合物随发酵时间的延长发生一系列的变化,两者之间具有显著相关性。

拟南芥T-DNA插入突变体scc8-D的蛋白质组学研究

采用双向凝胶电泳对拟南芥T-DNA插入突变体scc8-D和对照材料cry1cry2的植株总蛋白进行了分离,通过考染显色,获得了分辨率和重复性较好的双向电泳图谱.然后选取30个差异蛋白质点用MALDI-TOF-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,有22个蛋白质点得到了可靠鉴定.其中在scc8-D突变体中有3个蛋白上调,16个蛋白下调,有3个蛋白仅在cry1cry2中表达.分析发现,这些差异蛋白可能参与了碳水化合物代谢、光合作用、光呼吸、胁迫响应、蛋白质合成和氧化还原平衡等过程.这些蛋白中光合蛋白占32%,说明这些与矮化相关的调节性蛋白和功能性蛋白丰度的表达受到光的调控,从而抑制了植物下胚轴的伸长.

浅谈高中数学探究式教学

近几年，随着改革的不断深入，对教学方式和模式进行了改革，教师将面临一次巨大的挑战，特别是对数学教师来说，新课改要求数学教师要注重培养学生的逻辑思维能力，这也是数学教学的最根本目标．由此看来，进行探究式教学是高中数学教育的必然选择．本文通过对高中数学探究式教学的基本特点、重要性进行了深入探讨和分析。进而又提出高中数学探究式教学方法，希望通过新课改，改变教学方法，使高中教学取得良好的效果．

固态发酵草鱼和鲤鱼的风味差异分析

以草鱼和鲤鱼作为原料制备发酵鲊鱼,采用液相色谱、气相-质谱联用仪和气相-离子迁移谱联用技术测定分析比较发酵草鱼和鲤鱼的呈味核苷酸、游离氨基酸、游离脂肪酸及挥发性风味化合物。结果发现发酵草鱼和鲤鱼中滋味物质差异明显(P<0.05),其中鲜、甜味氨基酸中,发酵鲤鱼中有5种氨基酸TAV大于1,发酵草鱼中只有3种氨基酸TAV大于1,而且发酵鲤鱼的味精当量EUC为2.551 gMSG/100g,远大于发酵草鱼(0.661 gMSG/100g)。发酵鲤鱼不饱和游离脂肪酸总量高于发酵草鱼,尤其是油酸(20.339 mg/100g vs 9.936 mg/100g)和亚油酸含量(13.923 mg/100g vs 5.153 mg/100g)。2种发酵鱼中共鉴定出53种挥发性化合物,其中发酵鲤鱼中检出酸类1种、醛类8种、醇类8种、酮类6种、酯类8种和其他化合物3种,发酵草鱼中检出醛类2种、醇类7种、酮类5种、酯类15种和其他化合物1种,每种化合物的气味特征各异,呈现出独特的风味。

铜元素对籼稻成熟胚组织培养的影响

以杂交水稻5个优势亲本的成熟胚为材料,研究分化培养阶段添加铜元素对籼稻成熟胚组织培养的影响。结果表明:铜元素能够有效地降低愈伤组织褐化率、提高愈伤组织分化频率;不同品种对同一铜元素浓度或同一品种对不同铜元素浓度反应差异很大。

ISSR标记技术在湖南柑橘主要品种亲缘关系研究中的应用

利用ISSR分子标记技术对16个湖南柑橘主要品种进行了分子鉴定和亲缘关系分析。结果表明:9个引物共扩增出72条谱带,其中54条为多态性条带,多态率高达75%,平均每条引物扩增的DNA条带数目为8条。利用Popgene 1.32程序进行了Nei遗传距离和遗传相似性分析,橙类中彭娜和纽荷尔的亲缘关系最近。UPGMA聚类分析结果表明,在遗传距离为0.76的水平上,16个柑橘品种可分为四大类群。

批注式个性化阅读的实践策略

《语文新课程标准》倡导的是一种探究性、个性化、多元化的阅读，让学生与文本真正对话，“珍视学生独特的感受、体验和理解”。为此，本人在多年的教学实践中，积极探索如何让学生进行个性化阅读，发现批注式阅读法，简单易行、操作性强、效率高，能使学生在阅读实践中真正实现个性化阅读，演绎个性，放飞心灵。

浅淡新课程课堂教学的若干特征

通过对优质课的观察与思考,我们可以发现其具有以下特征：提倡情境创设的多样化,反对程序化;提倡课堂多媒体运用的正常化,反对极端化;提倡数学文化、数学建模、数学探究的课堂渗透常规化,反对表面化;提倡教材内容呈现方式的＂二次开发＂,反对照本宣科;提倡课堂知识应用的实际化,反对虚拟化.

C系列南瓜物理性状、质构与感官品质分析

为南瓜选育品种的品质评价和选育新品种提供可靠的数据支撑,本文对15个C系列南瓜品种采用物理方法、质构分析法和感官品尝法分析其物理性状、生熟瓜肉组织质构、熟南瓜感官品质并做相关性分析。结果表明：15个C系列南瓜品种在单果质量、皮质量、囊衣质量和可食率方面均有显著差异;质构指标、物理指标和感官评价指标不同项目之间具有不同的相关性。生南瓜近皮层和近囊衣层的质构压缩值不同,硬度和瓜肉固形物含量之间呈正相关（r=0.711-0.806）;熟南瓜质构各值虽因品种而异,但质构中硬度、断裂性、胶着性和咀嚼性呈正相关（r=0.780-0.946）;感官品尝结果虽不同,但品质评价指标中脆度、粉质、甜度和综合评分之间呈正相关（r=0.673-0.859）。南瓜品种选育应根据物理特性、质构和口感品尝的关键指标建立客观、科学的评价方法。

柑桔鲜果皮中类黄酮含量比较与分析

目的:探明柑桔鲜果皮中柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、橙黄酮、川陈皮素和桔皮素6种主要类黄酮含量。方法:建立柑桔鲜果皮中6种类黄酮检测方法,测定宽皮柑桔、橙类、柚类及杂柑类56个柑桔鲜果皮中类黄酮含量。结果:宽皮柑桔和橙类中橙皮苷含量丰富,最高可达13.00 g/kg;椪柑、砂糖桔、南丰蜜桔、贡柑、瓯柑的多甲氧基黄酮含量较高,平均含量超过1.000 g/kg;胡柚和臭皮柑黄酮组成相对丰富,含所测的6种黄酮组分。对柑桔皮类黄酮含量指标进行主成分分析,选出2个主成分,其较全面地反映柑桔皮类黄酮的主要信息。聚类分析将56个柑桔品种分为6类,果皮类黄酮分布特征与柑桔品种密切相关。结论:研究结果可为柑桔功能性成分的综合利用、相关产品的品种溯源以及柑桔品种分类、杂种初筛等提供技术支撑。

葡萄果实衰老与线粒体内能量和酚类代谢的关系

研究"红地球"葡萄衰老与能量代谢和酚类代谢的关系。采后葡萄经钙联合涂膜处理(在质量分数0.2%Ca Cl2和1%壳聚糖中浸泡20 min),低温(4±0.5)℃贮藏,定期测定果肉的膜透性和丙二醛(MDA)含量,三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、单磷酸腺苷(AMP)含量,能荷(EC),果肉组织的线粒体蛋白含量,线粒体H^+-ATPase酶、线粒体Ca^(2+)-ATPase酶、线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)和线粒体细胞色素氧化酶(CCO)代谢酶活,果肉组织的内源性抗氧化物质总酚、类黄酮、花色苷、单宁、叶绿素a、叶绿素b含量,抗氧化能力,铁还原能力;以清水浸泡处理为对照。结果显示:(1)随贮藏时间的延长,葡萄果肉组织细胞膜透性和丙二醛升高,线粒体蛋白和能量代谢酶活下降,能量水平和能荷下降,内源性抗氧化物质总酚、类黄酮、花色苷、单宁和叶绿素下降,果肉组织细胞的抗氧化能力和铁还原性下降。(2)涂膜处理显著缓解果肉膜透性和MDA含量的上升(P<0.05),显著缓解贮藏中、后期线粒体蛋白含量、H^+-ATPase、Ca^(2+)-ATPase和CCO酶活的下降(P<0.05),显著缓解中期SDH酶活的下降(P<0.05),显著缓解中、后期总酚、单宁和叶绿素a含量(P<0.05)的下降,显著缓解抗氧化能力及铁还原能力的下降(P<0.05)。(3)果实组织MDA含量和膜透性与线粒体蛋白量、能量代谢酶活、能量水平和能荷、酚类物质、抗氧化能力和铁还原性呈极显著负相关(R=-0.987^-0.932,P<0.01)。葡萄果实采后贮藏期的衰老劣变与线粒体蛋白含量,果肉组织能量代谢酶活,能量水平和能荷,内源性抗氧化物质,抗氧化能力的下降密切相关;细胞膜脂过氧化增加,细胞结构被破坏,膜透性增加。涂膜处理能延缓葡萄果实衰老劣变。

金丝小枣在生长成熟过程中理化特性的变化规律

本文研究了6个不同生长成熟期（S1-S6）金丝小枣果实的色泽、叶绿素、可溶性糖及其代谢酶活性、有机酸及氨基酸的动态变化,以明确其代谢规律。研究结果表明：枣果生长成熟过程中,叶绿素含量降低,枣果由绿变红;葡萄糖、果糖均逐步积累,而山梨醇含量逐渐降低,蔗糖则在生长发育初期未被检出,其积累主要发生在枣果成熟后期,且其含量最高,金丝小枣为蔗糖积累型果实,蔗糖磷酸合成酶是蔗糖积累的关键酶;金丝小枣为苹果酸型果实,苹果酸随枣果的成熟而积累,而柠檬酸含量先上升后降低;Pro和Asp在枣果成熟过程中被大量合成,是成熟枣果中最主要的两种氨基酸。全红枣的可溶性总糖、糖酸比以及游离氨基酸总量最高,可作为金丝小枣鲜食的最佳采收时期。