肝炎肝硬化中医证型与肝纤维化指标及病理改变相关性分析

有关慢性肝炎中医分型与病理的研究已有报道[1].但关于肝纤维化及肝硬化的中医辨证分型的量化研究及肝脏病理分级的相关性报道甚少.

HGF/cMet系统与肝癌细胞侵袭转移关系的实验研究

目的:探讨HGF/cMet基因表达与肝癌细胞侵袭转移能力的关系。方法:采用荧光定量PCR和WesternBlot检测5株肝癌细胞系MHCC-1、HepG2、Huh7、SMCC-7721、Hep3B和永生化肝细胞株L02以及26份肝组织中cMetmRNA和蛋白质表达水平,同时采用免疫组化法检测26份肝组织中cMet蛋白质的表达。结果:6株肝癌细胞cMetmRNA分别为7.9×106,3.4×106,2.1×106,6.5×105,3.8×105和5.8×103(copies/ml),5株肝癌细胞系cMetmRNA显著高于L02细胞系(P<0.01),其中以转移能力较强的MHCC-1细胞系的cMetmRNA表达量最高;肝癌组织、癌旁组织及周围正常组织的cMetRNA分别为2.28×107、6.80×105、5.68×105,肝癌组织的cMet基因表达明显高于癌旁及周围正常组织(P<0.01);在肝癌组织中,T1、T2、T3/T4期及NO、N1/N2的cMetmRNA分别为4.88×104、6.98×105、1.72×106、4.67×105、8.73×105,cMet的表达与肿瘤的大小及其侵袭能力明显正相关;WesternBlot和免疫组化也显示不同肝细胞系蛋白质表达水平与cMetmRNA表达一致。结论:HGF/cMet系统参与了肝癌的形成,并且在肝癌细胞的侵袭和转移的过程中起重要作用。

HEV ORF3真核表达载体的构建、鉴定和真核表达

目的构建表达戊型肝炎病毒(HEV)ORF3-pXF2RH融合蛋白的真核表达载体;获得重组质粒稳定转染的L02细胞系。方法利用PCR技术从HEV基因组中扩增出ORF3基因片断,HindⅢ/EcolⅠ双酶切后连接到经同样酶切的pXF2RH真核表达载体,转化DH5α菌株感受态细胞,获得阳性重组质粒ORF3-pXF2RH。将阳性克隆用脂质体法转染L02细胞系,G418筛选抗性克隆,SDS-PAGE、Western blot分析鉴定ORF3-pXF2RH融合蛋白的表达。结果真核表达质粒转染L02细胞,SDS-PAGE显示在28.5kD左右蛋白表达量明显高于对照组,Western blot在28.5kD左右有一条强的棕色条带。结论成功构建ORF3-pXF2RH真核表达质粒,在L02细胞表达融合蛋白,为进一步研究该蛋白生物学功能奠定了基础。

肝细胞生长因子受体靶向shRNA真核表达载体的构建和鉴定

目的:构建和鉴定人肝细胞生长因子受体(cM et)的shRNA的真核表达载体。方法:人工合成针对cM et的4对shRNA序列并定向克隆到siRNA(sm all interference RNA)真核表达载体RNA i-Ready pSIREN-DNA-D sRed-Express Vector上;采用双酶切和测序法鉴定。结果:酶切及测序鉴定得到的产物与预期的目的基因一致。结论:成功构建肝细胞生长因子受体靶向shRNA的真核表达载体。

中医药治疗肝硬化难治性腹水的研究进展

腹水是肝硬化失代偿期的主要症状,肝硬化难治性腹水的治疗十分棘手,目前西医治疗效果局限,是肝病科临床治疗的一大难题。基于近年来的文献研究,许多临床中医生运用中医药结合西医治疗本病,均取得了不错的疗效。基于此,本文将从中医内治法、中医外治法两个方面去论述中医药治疗肝硬化难治性腹水临床案例,以期为临床者的治疗提供参考及新思路。

非酒精性脂肪性肝病患者胰岛素抵抗、炎性因子与代谢综合征的相关性分析

目的探讨我国成年非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)、炎性因子与代谢综合征(metabolism syndrome,MS)之间的关系。方法选取2017年1月至2018年12月至我院(广东省中西医结合医院)就诊的100例成年NAFLD患者作为研究对象,分别将其分为研究1组52例(单纯NAFLD)、研究2组48例(NAFLD合并MS),并选取同期于我院行健康检查的40例成年民众作为对照组。结果3组的FBG、FINS、hs-CRP、IL-6水平,组间两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05);其中研究2组四项指标均明显高于研究1组(均P<0.05),研究1组四项指标均明显高于对照组(均P<0.05);点二列相关分析提示,NAFLD患者合并MS与FBG、FINS、hs-CRP、IL-6呈显著正相关(r值分别为0.315、0.295、0.321、0.287,均P<0.05);同时,多因素Logistic回归分析提示,NAFLD患者的胰岛素抵抗程度越重(HOMA-IR越高),炎性因子(hs-CRP、IL-6)水平越高,其合并MS的风险越大。结论NAFLD患者是否合并MS,与胰岛素抵抗程度以及炎性因子水平存在相关性,有可能通过监测上述指标以预测NAFLD患者合并MS的风险,从而及早实行临床干预。

广东佛山地区HCV感染对FibroScan测量脂肪肝受控衰减参数的影响

目的:结合广东佛山地区慢性丙型肝炎(CHC)以及非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的流行病学情况,研究丙肝病毒(HCV)感染对瞬时弹性成像技术设备Fibro Scan测量非酒精性脂肪肝患者的受控衰减参数(CAP)的影响。方法:对15例单纯CHC(无合并NAFLD)患者、20例单纯NAFLD(无合并CHC)患者以及30例CHC合并NAFLD患者,应用Fibro Scan测定其CAP值,比较各组间的CAP值;对CHC合并NAFLD组再分别按照丙肝基因型以及丙肝病毒RNA水平进行划分亚组,比较各亚组间的CAP值。结果:3组患者的CAP值均与身体质量指数(BMI)呈正相关,CHC(无合并NAFLD)组的CAP值低于NAFLD(无合并CHC)组、CHC合并NAFLD组,差异具有统计学意义(P <0. 05); CHC合并NAFLD组中,各HCV基因型亚组(1b、6a)之间、各HCV RNA水平亚组之间的CAP值差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:结合广东佛山地区HCV感染的流行病学情况,在有限样本的研究中,未发现Fibro Scan对NAFLD患者测定的CAP值受HCV感染影响,但更准确、细致的情况依赖于大样本量的随机、多中心观察研究。

基于Fibroscan技术的柴胡疏肝散对非酒精性脂肪肝患者临床疗效分析

[目的]基于肝脏瞬时弹性硬度检测(Fibroscan)技术,研究柴胡疏肝散对肝郁脾虚型非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患者的临床疗效,并初步探讨柴胡疏肝散的治疗机制。[方法]选取符合标准的NAFLD患者40例,随机分为两组,实验组和对照组各20例。实验组20例,给予柴胡疏肝散+阿拓莫兰+维生素E治疗;对照组20例,给予阿拓莫兰+维生素E治疗。观察两组疗效并分析总结。[结果]实验组和对照组两组各项参数对比,两组谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、总胆汁酸(TBA)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)等指标均较治疗前显著下降,差异有统计学意义(p<0.01),其中实验组较对照组下降更显著,差异有统计学意义(p<0.01)。治疗后两组空腹C肽均无显著变化(p﹥0.05)。基于Fibroscan技术,对患者进行测量受控衰减参数(CAP)以评估两组疗效,其中实验组的总有效率(100%),高于对照组的总有效率(50%),两组间差距具有统计学意义(p<0.01)。[结论]基于Fibroscan技术检查发现,柴胡疏肝散治疗肝郁脾虚型NAFLD患者具有显著的临床效果。

拉米夫定治疗慢性乙型肝炎耐药发生率与中医证型的关系

目的:观察拉米夫定治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎耐药发生率与中医证型的关系。方法:选择慢性乙型肝炎210例,按中医辨证分湿热中阻型、肝郁脾虚型、肝肾阴虚型、脾肾阳虚型、瘀血阻络型,分别服用拉米夫定治疗2年,观察不同证型的拉米夫定对HBeAg及HBV-DNA的转阴以及耐药发生与中医分型之间的关系。结果:湿热中阻型HBeAg及HBV-DNA的转阴率最高,而耐药发生率最低,与其他证型比较有统计学意义。结论:拉米夫定的抗乙肝病毒的疗效及耐药率与中医辨证分型有一定关系。

人工肝血浆置换对慢性重型乙型肝炎肝纤维化指标的影响

目的:探讨人工肝血浆置换对重型乙型肝炎患者治疗前后肝脏生化功能及肝纤指标的影响。方法:60慢性重型乙型肝炎患者随机分为两组,每组各30例,对照组给以常规内科治疗;治疗组在对照组基础上给以人工肝血浆置换法治疗,疗程均为两周,分别检测治疗前后肝脏生化(ALT、AST、TBil、CHE、Alb、PTA)及肝纤维化指标(PCⅢ、Ⅳ-C、LN、HA)。结果:两组治疗后,肝脏生化及肝纤维化指标均有不同程度改善,其中治疗组改善更为显著,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:人工肝血浆置换能更好地改善患者肝脏生化功能、逆转肝脏纤维化。

头孢哌酮/舒巴坦联合多西环素对多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎治疗效果观察

目的:研究头孢哌酮/舒巴坦联合多西环素在多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的治疗效果。方法:将30例多重耐药鲍曼不动杆菌致肺部感染患者随机分为对照组和观察组各15例,对照组患者进行头孢哌酮/舒巴坦注射液治疗,观察组患者进行头孢哌酮/舒巴坦联合多西环素治疗,比较两组患者治疗前、后的炎性反应指标、内毒素(革兰阴性菌脂多糖)定量、APACHEⅡ评分变化,观察治疗期间体温、临床疗效等。结果:治疗后观察组患者的WBC、CRP、PCT水平、内毒素定量及APACHEⅡ评分改善效果明显优于对照组,体温下降至正常体温的时间显著短于对照组,治疗总有效率高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:头孢哌酮/舒巴坦联合多西环素治疗多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎中能有效改善患者的炎性反应指标、毒素定量及APACHEⅡ评分,还能尽快促使患者的体温恢复正常,提升整体治疗效果,值得推广。

佛山地区散发性戊型肝炎的流行特征研究

目的研究佛山地区散发性急性戊型肝炎的流行病学特征,为制定佛山地区预防控制措施提供依据。方法回顾分析87例散发性戊型肝炎患者的流行病学资料、临床特点、实验室检查及预后。结果戊型肝炎全年散发,以第二季度为高发,占30.8%%;中青年患者占71.3%;单纯抗-HEV-Ig M阳性者25例(26.7%),单纯抗-HEV-Ig G阳性29例(33.3%),两者同时阳性33例(37.9%);甲戊型肝炎病毒重叠感染1例,乙戊型肝炎病毒重叠感染1例。结论散发性戊型肝炎预后较好,乙、戊型肝炎病毒重叠感染及老年患者肝功能损害严重。

中药联合血浆置换对慢性乙型重型肝炎患者临床观察

目的观察中药联合血浆置换治疗慢性乙型重型肝炎的临床疗效。方法65例患者随机分为治疗组和对照组,对照组采用血浆置换及西药药物治疗,治疗组在对照组基础上加用中药汤剂口服,以肝功能、凝血功能、血氨等指标观察二组的临床疗效。结果治疗组在上述指标的改善上优于对照组(P<0.05)。结论血浆置换联合中药能提高慢性乙型重型肝炎的疗效。

中药结肠透析对肝硬化难治性腹水的疗效观察

目的:探讨中药结肠透析对肝硬化难治性腹水的疗效。方法:将64例确诊为肝硬化难治性腹水的患者随机分成两组,每组患者32例。对照组患者给予西医常规内科治疗;治疗组患者除了对照组治疗方法之外,给予中药结肠透析,隔天1次,观察时间为两周,观察两组患者腹水消退时间,ALT,TBil,PTA,血清钠的变化。结果:治疗组患者在腹水消退、ALT,TBil,PTA改善等方面均优于对照组,差异具有显著性意义(P<0.05);而血清钠的变化则与对照组比较无显著性意义(P>0.05)。结论:常规西医内科治疗联合中药结肠透析方法,能提高肝硬化难治性腹水的临床疗效。

温经开郁法治疗慢性乙型肝炎的随机平行对照研究

目的:探究温经开郁法对慢性乙型肝炎(CHB)的疗效。方法:选取2016年6月至2019年1月广东省中西医结合医院收治的CHB患者26例作为研究对象,按照就诊顺序编号随机分为对照组和观察组,每组13例。对照组予恩替卡韦治疗,观察组在对照组基础上加用温经开郁颗粒,均同时治疗24周。观察2组患者治疗前、完成治疗后淋巴细胞亚群、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、ALT/AST比值、谷氨酰转移酶(GGT)、透明质酸酶(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)、慢性肝病问卷(CLDQ)评分变化并比较,并进行疗效评价。结果:1)对照组治疗前、完成治疗后CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+比较,差异无统计学意义(P>0.05),完成治疗后观察组CD4^+、CD4^+/CD8^+较治疗前均显著升高,CD8+较治疗前显著下降(P<0.05),完成治疗后观察组CD4^+、CD4^+/CD8^+显著高于对照组,CD8^+显著低于对照组(P<0.05)。2)完成治疗后2组患者ALT、AST、ALT/AST比值、GGT较治疗前均显著下降(P<0.05),且观察组以上指标下降均显著低于对照组(P<0.05)。3)完成治疗后2组患者HA、LN、PⅢNP、CⅣ较治疗前均显著下降(P<0.05),完成治疗后观察组以上指标均显著低于对照组(P<0.05)。4)完成治疗后2组患者腹部症状、困乏、系统症状、活动能力、情感、焦虑积分较治疗前均显著升高(P<0.05),完成治疗后观察组以上积分均显著高于对照组(P<0.05)。5)完成治疗后观察组显效率、总有效率均显著高于对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:温经开郁法能提高CHB免疫功能,改善肝功能和肝纤维化,提高生命质量。

海珠益肝胶囊对HepG 2215细胞Fas、Bax、Bcl-2的影响

目的应用2215细胞株作为体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的实验模型,在观察海珠益肝胶囊对乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg),表面抗原(HBsAg)抑制作用的基础上,从细胞凋亡和凋亡相关基因表达影响的角度,探讨该药抗HBV的药物作用机制。方法 细胞染色采用S—P免疫组化法,通过图像分析仪测定阳性细胞染色的平均光密度,并应用流式细胞仪检测药物诱导细胞凋亡情况,观察药物对2215细胞调控蛋白Fas、Bax、Bcl-2以及对2215细胞本身凋亡诱导的影响。结果(1)海珠益肝胶囊对Fas、Bax基因蛋白的表达与正常对照组相比有显著性差异(P<0.05),即能诱导Fas、Bax的高表达;同时能下调bcl-2的表达,与正常对照组比亦有显著性差异(P<0.05)。(2)用海珠益肝胶囊处理过的2215细胞的单细胞悬液,经流式细胞仪检测其DNA含量,呈现典型的凋亡图谱。结论海珠益肝胶囊通过调节肝细胞凋亡、调控蛋白基因表达,并诱导被感染的肝细胞凋亡是其抗病毒机制之一。

补肾健脾方联合拉米夫定治疗慢乙肝YMDD变异36例

目的观察补肾健脾方联合对拉米夫定治疗慢乙肝YMDD变异的临床疗效。方法选择符合拉米夫定治疗慢乙肝YMDD变异的患者80例,随机分为治疗组及对照组各40例,其中治疗组予补肾健脾方联合拉米夫定治疗,对照组予安慰剂联合拉米夫定治疗,2组疗程均为1 a。观察治疗前后2组肝功能、乙肝两对半定量、血清HBV DNA定量和细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4及IL-10水平的变化。结果治疗后,治疗组血清HBV DNA下降>2 log10、HBV DNA阴转率患者比例明显高于对照组(P<0.05);与治疗前比较,治疗组仅ALT升高(P<0.05),对照组ALT、AST、TBIL均显著性升高(P<0.05);治疗组Th1细胞因子IL-2和IFNγ水平明显升高(P<0.05),Th2细胞因子IL-4和IL-10水平明显下降(P<0.05),对照组细胞因子水平未见明显变化,2组治疗前后比较差异显著(P<0.05)。结论补肾健脾方联合拉米夫定治疗慢乙肝YMDD变异有良好的抑制病毒复制的作用,可能通过恢复特异性T细胞免疫功能而实现。

苦参素对不同载量DNA的慢性HBV携带者疗效观察

目的观察苦参素对不同DNA载量的慢性HBV携带者的疗效。方法将86例不同DNA栽量的HBV携带者分为3组：低载量组（HBV DNA 10^2～10^4）27例，中载量组（HBV DNA 10^5-10^6）36例．高载量组（HBV DNA≥10^7）23例，分别给予苦参素片0．3g口服，每日3次，疗程1a。期间每3个月分别检测各组患者HBV DNA、ALT和乙肝两对半定量。结果治疗至48周时，3组HBV DNA均明显下降（P〈0．05），低载量组HBV DNA下降尤为明显（P〈0．01）；低载量组累积HBeAg血清转阴／转换率为40．74％．高载量及中载量组未见HBeAg血清转阴／转换。3组均未见HBsAg转阴／转换；高载量组与中载量组HBsAg及HBeAg滴度无明显变化（P〉0．05）；而低载量组HBsAg滴度显著降低（P〈0．01）。肝功能方面，高载量组与中载量组有轻度ALT升高，而低载量组未见ALT升高。结论苦参素片能抑制HBVDNA的复制，降低血清HBsAg及HBeAg滴度。尤其是对低载量HBVDNA疗效最佳。