中药抗肿瘤作用及其作用机制研究进展

中药因具有活血化瘀、清热解毒、扶正固本等功效而发挥抗肿瘤作用,可作用于肿瘤发生、发展的多个环节,具有多靶点、多环节、多效应的特点。主要从中药诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、逆转肿瘤细胞多药耐药、抑制肿瘤细胞侵袭转移等方面对中药抗肿瘤作用及其机制研究现状进行综述。

优化中药复方“松友饮”的基础研究

目的:研究中药复方"松友饮"的体内药效物质基础并重新配伍设计,为其组方优化提供理论基础。方法:应用高转移人肝细胞癌细胞株MHCC97H构建裸鼠原位移植瘤模型,24只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤1 d开始1次/d灌胃给药("松友饮"3.6 g/kg,对照组予以等量蒸馏水)。灌胃5周,脱颈处死裸鼠收集血样,用于进一步分析"松友饮"体内药效物质基础,采用均匀设计的实验方法重新设计、配伍、优化"松友饮"。结果:裸鼠模型构建过程顺利,灌胃过程中实验组死亡1只裸鼠,有效获取含药血清。结合参考文献及通过比对发现连续给药5周,"松友饮"吸收入血的主峰来自组方药材成分:黄芪甲苷、槲皮素及隐丹参酮、丹参酮IIA(新组复方主要含4种单体,简称HHYD复方),重新配伍为3种新组方。结论:基于5周给药的含药血清药效物质基础新组方的组分更加明确,更易定量和质量控制。

中药“松友饮”对高转移人肝癌侵袭性及小鼠免疫功能的影响

目的:研究"松友饮"对高转移人肝癌MHCC97H细胞侵袭性和小鼠免疫功能的影响及其机制。方法:用不同质量浓度的"松友饮"(2、4、8 mg/mL)分别干预MHCC97H细胞48 h,用明胶酶谱实验及侵袭实验研究基质金属蛋白酶-2(matrixmetalloproteinase-2,MMP-2)活性和侵袭性变化。用高转移人肝癌裸鼠原位移植瘤模型进行体内实验,以检测对"松友饮"对肿瘤的抑制作用。C57BL/6小鼠和昆明种小鼠均随机分为"松友饮"剂量递增的C1、C2和C3组及阴性、阳性对照组,灌胃给药,每天1次,连续7 d,处死小鼠后检测自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)的活性,观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能变化。结果:与对照组相比,"松友饮"4、8 mg/mL组细胞侵袭性下降有统计学意义(P<0.01),对应的MMP-2活性下降。此外,"松友饮"抑制了肝癌细胞生长,C1、C2和C3组的NK细胞特异性抑制百分率分别为24.6%、27.1%和27.7%,巨噬细胞吞噬百分率与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:中药复方"松友饮"可能通过抑制MMP-2活性来抑制肝癌侵袭性,连续7 d"松友饮"灌胃给药能增强小鼠免疫功能。

转移消失蛋白在肿瘤发生发展中的作用

肿瘤转移消失蛋白(missing in metastasis,MIM)是一种新近发现的肌动蛋白结合蛋白,主要参与细胞骨架的重塑、信号转导及转录活化,与肿瘤的生长和侵袭密切相关。近年来,该蛋白在不同肿瘤中作用机制的研究受到广泛关注,有着广阔的研究前景。本文通过综述MIM蛋白与肿瘤发生发展的相关性,从而为MIM蛋白在肿瘤诊断和治疗中的应用提供理论基础及新的策略。

中药复方“松友饮”及其组方药材提取物高效液相指纹图谱研究

目的:分析中药复方"松友饮"及组方药材提取物指纹图谱用于质量控制。方法:采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)研究中药指纹图谱。包括低压四元泵,自动进样器和二极管阵列检测器(DAD),Agilent Zorbax RX-C8色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温25℃,流动相为水-乙腈,进行梯度洗脱(流速,0.5 mL/min;洗脱时间,60 min;检测波长,280nm)。结果:成功构建"松友饮"及组方提取物高效液相指纹图谱,色谱保留时间稳定,各主要色谱峰偏移小于0.1 min。通过比对发现"松友饮"HPLC色谱峰来自组方药材成分。重复HPLC色谱相似度(90%,精密度、稳定性、重复性实验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积RSD(3%。结论:HPLC方法可靠、可行,指纹图谱重复性良好,为"松友饮"质控提供参考。

肝细胞癌切除术标准及其临床意义

目的:阐述肝细胞癌(肝癌)切除术标准,为把握手术指征、指导治疗、提高疗效提供依据。方法:使用CNKI、NCBI生物信息学数据库,以"肝切除/liver resection、肝癌/hepatocellular carcinoma(HCC)"为关键词,检索已发表的文章,排除重复研究和与本研究无关文献后精选纳入分析。总结肝切除标准分类,陈述其关键因素和争议焦点,比较不同标准肝切除患者预后,讨论预后差异的可能原因。结果:HCC切除术标准的主流分法为二分法,即根治性和姑息性切除,其关键因素包括外科、肿瘤及随访因素,肝切缘大小是否影响根治效果曾是外科因素中争论热点。近年,随着肿瘤分子生物学技术的进步,学者们对HCC切除术标准的分法有所改变,在三分法(病理根治、临床根治和姑息切除)基础上提出HCC切除术五分法,将病理根治划分为绝对根治(无潜在转移)和相对根治(有潜在转移),临床根治划分为有反应切除(短期内相关指标下降,如甲胎蛋白)、无反应切除(指标持续异常)和姑息性切除。根治性切除患者预后好于姑息性切除。研究显示,肝切除促进肿瘤侵袭转移潜能可能与HCC早期播散有关,也可能与术后残余HCC生物学特性改变相关,目前缺乏有效的干预措施。结论:根治性肝切除是目前公认的治疗HCC患者最有效的方法之一;确定HCC切除术标准有利于总结、分析临床资料,也有利于评估患者预后,对选择有效的治疗策略具有重要的临床意义。

中药复方“松友饮”诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究中药复方"松友饮"对人肝癌细胞凋亡的影响及可能的分子机制,为临床应用提供理论依据。方法:采用流式细胞术、Caspase-3活性实验及Real Time PCR技术,观察2、4、8、10、20、30及40 mg/mL"松友饮"(c1、c2、c3、c4、c5、c6及c7组)对体外培养的人肝癌细胞MHCC97H凋亡的影响,并探索可能的分子机制。结果:流式细胞仪检测结果显示,同对照组相比,干预组细胞凋亡率呈时间依赖性增加,"松友饮"(c4,10 mg/mL)干预72 h后MHCC97H细胞凋亡率增加超过3倍。干预48 h后Caspase-3显著激活,Caspase-3活化呈时间依赖性。"松友饮"浓度增加,转移抑制基因1(Metastasis suppressor 1,MTSS1)抑制效果越明显,"松友饮"(c4,10mg/mL)干预48 h,MTSS1基因表达抑制率为39.0%。结论:"松友饮"诱导肝癌细胞凋亡可能与MTSS1基因表达抑制、Caspase-3活化相关。

多b值DWI评价抗肿瘤血管药物早期反应的应用价值

目的:探讨多b值DWI技术中各定量参数无创性反映抗肿瘤血管药物早期变化的应用价值。方法:30只结肠癌皮下移植瘤分为抗肿瘤血管药物组、细胞毒性药物组和对照组,每组各10只。药物治疗前及治疗后1h、24h、48h行DWI检查,动态观察各类表观扩散系数值(ADC3b、ADC10b、ADClow、ADChigh、ADCperf)的变化,治疗后48h MRI检查结束后处死载瘤裸鼠行免疫组化染色,上述DWI各定量参数与免疫组化结果行相关性分析。结果:ADC3b、ADC10b、ADChigh值在三组间具有统计学差异(P﹤0.01),ADClow及ADCperf值在三组间无统计学差异。各观察指标不同观察时相的变化趋势是不同的(P﹤0.01)。两组药物治疗后1h,各参数均明显下降;治疗后24h,ADClow及ADCperf值在抗肿瘤血管药物组持续下降,而细胞毒性药物组有所恢复。ADC3b、ADC10b值与免疫组化结果呈负相关,ADChigh值与PCNA计分呈负相关,ADCperf值与免疫组化染色呈正相关。结论:多b值DWI各定量参数可作为影像学生物标记物反映抗肿瘤药物治疗后组织水分子扩散能力及肿瘤血流灌注的早期变化,且可成为评估抗肿瘤血管药物治疗后血管关闭及细胞代谢情况的辅助参考指标。

卒中后抑郁的研究现状

卒中后抑郁是卒中后最常见并发症之一,是一种以情绪低落、自罪自责、睡眠紊乱等为主要表现的情感障碍性疾病,妨碍患者日常生活能力和神经功能缺损恢复,严重影响卒中后患者生活质量。本文就卒中后抑郁的定义、发病机制、相关因素、诊断与治疗等问题做一简要回顾。

中药复方“松友饮”联用干扰素α影响姑息性肝切除术后残癌生长转移的实验观察

目的研究中药"松友饮"联用干扰素(IFN)α对高转移人肝细胞癌(HCC)裸鼠原位移植瘤姑息性肝切除模型残癌生长、转移和生存期的影响。方法以高转移人肝癌MHCC97H细胞建立裸鼠原位移植瘤姑息性肝切除模型,72只成模裸鼠随机分成对照组、"松友饮"组、IFNα组及"松友饮"+IFNα组(每组18只),姑息性肝切除术后24 h开始每天1次灌胃给药及皮下注射,连续5周测量裸鼠体质量。最后一次处理结束48 h后每组随机处死6只裸鼠,计算肿瘤体积及转移情况;剩余裸鼠用于观察生存期。结果对照组、"松友饮"组、IFNα组及"松友饮"+IFNα组肿瘤体积分别为(1205.2±581.3)、(724.9±337.6)、(507.6±367.0)、(245.3±181.2)mm3(F=6.410,P<0.05);肺转移结节数(n)分别为13.8±3.5、12.1±3.8、7.4±2.8、4.5±1.9(F=22.930,P<0.05);生存期分别为(62.1±2.0)、(76.2±3.2)、(81.1±2.5)、(88.3±2.5)d(Chi-Square=45.704,P<0.05)。联合用药组同单药组比较,疗效差异有统计学意义。结论连续5周联用"松友饮"增强IFNα抑制姑息性肝切除术后残癌生长、转移并延长荷瘤裸鼠生存期,对HCC患者有潜在临床应用价值。

中药复方“松友饮”含药血清体外抑制高转移人肝癌MHCC97H细胞的实验研究

目的:研究中药复方"松友饮"含药血清对体外培养的人肝癌MHCC97H细胞增殖、侵袭潜能的影响。方法:以MHCC97H细胞构建裸鼠原位移植瘤模型,84只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤24 h内开始1次/天灌胃给药。在第1、4、7、14、21、28、35次灌胃结束后2h,每组分别处死6只裸鼠收集血样。应用含药血清体外干预MHCC97H细胞,检测细胞增殖、侵袭潜能变化。结果:"松友饮"灌胃给药1、4、7天的荷HCC裸鼠含药血清体外抑制HCC作用逐渐增强,给药7、14、21、28、35天的含药血清抑制作用无统计学差异。灌胃7天的"松友饮"含药血清抑制HCC增殖的作用与中剂量卡培他滨作用近似,抑瘤率分别为37.4%、41.1%。给药7天的含药血清抑制HCC侵袭潜能达到最强,"松友饮"组穿膜细胞数明显少于对照组,为26.0±3.6和37.3±2.8。结论:给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对MHCC97H细胞的体外抑制作用达到最强。

中药复方“松友饮”体内药效物质基础研究

目的:研究中药复方"松友饮"的体内药效物质基础。方法:以MHCC97H细胞构建裸鼠原位移植瘤模型,12只成模裸鼠随机平均分成对照组和"松友饮"组,肝脏接种肿瘤24 h内开始1次/d灌胃给药。在第7次灌胃结束后2 h,脱颈处死裸鼠收集血样。应用ABI 4000 Q-TRAP仪器和TIC总离子扫描方式进一步研究、分析含药血清的药效物质基础。结果:成功构建裸鼠原位移植瘤模型,获取有效的含药血清。发现体内有两个主要的吸收入血峰,分别为RT=29.61,m/z为213.3;RT=53.69,m/z为523.8。通过比对发现"松友饮"吸收入血峰来自组方药材成分。结论:给药7 d的含药血清药效物质基础主要为吸收入血的丹参酮IIA和黄芪甲苷,其分子基础尚需进一步研究。

自主研发小动物专用磁共振显微线圈的研究应用

目的探讨临床磁共振成像系统应用自主研发小动物专用磁共振显微线圈在啮齿小动物实验研究中的价值。方法采用Siemens Avanto 1.5T超导临床磁共振成像扫描仪和25mm实验动物专用磁共振显微线圈,分别进行基因敲除小鼠脑TSE序列T2WI解剖结构成像、裸鼠皮下种植人型结肠肿瘤模型TSE序列T1WI和T2WI横断位扫描、水分子弥散加权成像和造影剂动态增强扫描(DCE)和肥胖小鼠模型肝内脂肪化学位移成像检测及腹部脂肪波谱分析。结果基因敲除小鼠脑T2WI图像高分辨清晰显示脑皮层厚度、皮髓质分界及丘脑和脑室结构;裸鼠皮下种植人型结肠肿瘤模型清晰显示其肿瘤组织解剖结构和信号、水分子弥散影像,同时通过DCE扫描可获取肿瘤血管的通透性检测指标;肥胖小鼠模型化学位移成像显示肝内脂肪浸润,而且波谱可定量分析腹部脂肪。结论临床1.5T超导磁共振成像扫描仪结合25mm实验小动物专用显微线圈可清晰地显示小鼠脑部、裸鼠皮下肿瘤模型肿瘤解剖组织结构,而且还可进行分子、功能成像和脂肪的检测和波谱定量分析,为基础实验提供准确可靠的影像学信息。

中药复方“松友饮”体内外药效研究结果的初步总结

目的:分析中药复方"松友饮"体内、外抑癌作用。方法:明确"松友饮"的组方成份,总结前期相关研究结果,提出尚需进一步研究内容。结果:"松友饮"为5味中药提取物,已分析获得高效液相指纹图谱,为"松友饮"提供质控参考。"松友饮"通过抑制MMP2抑制肝癌(HCC)侵袭性;连续7天灌胃给药增强小鼠免疫功能。连续5周灌胃抑制术后残癌组织IL–1β和PCNA表达,抑制裸鼠模型HCC生长、转移,延缓裸鼠体重下降,延长生存期,增强干扰素(抑制HCC。给药7天的含药血清达到稳态血药浓度,对HCC体外抑制作用最强。该复方已开展临床研究,但药效物质基础仍需深入研究。结论:"松友饮"具有体内、外抑制HCC生长、转移作用,具有潜在临床应用价值。

MAPK／ERK1／2信号转导途径与记忆关系

MAPK／ERK1／2（mitogen—activated protein kinase）信号转导途径是一条可被多种细胞外刺激因素广泛激活的有丝分裂原活化蛋白激酶通路，介导了细胞的增殖、分化和死亡多种病理生理过程。是一条关键的细胞信号转导途径，还和认知学习记忆密切相关，本文综述了MAPK／ERK1／2信号转导途径与学习、记忆的关系。

DCE-MRI联合DWI评价肿瘤血管生成的实验研究

目的:在结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型中探讨磁共振动态增强扫描(DCE-MRI)联合扩散加权成像(DWI)技术无创性评价肿瘤血管生成的应用价值。方法:20只结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型连续4d行DCE-MRI、DWI及常规MRI扫描,动态观察信号最大上升斜率(MSI)、微血管转运常数(K^(trans))、反流速率常数(K^(ep))及各类表观扩散系数值等参数的变化,分别于第3、4天MRI扫描结束后各处死10只行病理免疫组化染色,并与MRI各参数行相关性分析。结果:随着观察时间的延长,K^(trans)及K_(ep)值逐渐增加,ADC_(3b)及ADC_(10b)值逐渐减低(P<0.05)。K^(trans)、K_(ep)、MSI及ADC_(perf) 4个参数间相互存在正相关性;而K^(trans)分别与ADC_(3b)及ADC_(10b)之间存在负相关性。K^(trans)、K_(ep)MSI及ADC_(perf)直分别与MVD计数及VEGF强度表达间具有很好的正相关性,其中以K^(trans)与MVD计数相关性最强(r=0.715,P=0.000)。结论:DCE-MRI及DWI技术获得的定量及半定量参数可以作为影像生物标记物无创性的评价肿瘤血管的生长,其中DCE-MRI中定量参数K^(trans)、K_(ep)更具有应用价值。

磁敏感加权成像脑铁含量感兴趣区选择及测量研究

目的探讨苍白球区异常矿物质沉积时,选取不同感兴趣区(region of interest,ROI)(整个苍白球或局部矿物质沉积区域)对铁含量测值的影响,从而为脑组织铁含量测定感兴趣区选择及其测量的便捷性提供依据。材料与方法采用常规磁共振成像和磁敏感加权成像扫描94例健康志愿者,其中苍白球区存在明显矿物质沉积10例,分别选取苍白球整体(A1组)及局部矿物质沉积区域(A2组)为ROI测量灰度值。另外选取性别和年龄相匹配的苍白球区无异常铁含量沉积10例作为对照组(B组)。通过Pearson线性相关分析比较苍白球区有无异常铁含量沉积时的信号值对苍白球区铁含量测量的影响。结果 A1组和A2组灰度值测量相关系数r=0.827(P<0.05),整个苍白球区灰度值测量与局部区域灰度值测量具有显著一致性;A1组和B组相关系数r=0.183(P>0.05),A2组和B组间相关系数r=0.344(P>0.05),说明苍白球区内有无矿物质沉积对灰度值测量影响具有统计学意义。结论通过SWI技术分析含有异常矿物质沉积的苍白球区,选取整个苍白球区作为ROI与只将异常的矿物质沉积区作为ROI反映矿物质沉积趋势具有一致性,对脑铁测量影响不大,因此可以直接选取苍白球整体区域作为ROI测量脑铁含量,方法便捷,值得临床推广应用。

T_(2)WI高信号子宫肌瘤信号强度比值和纹理分析预测聚焦超声消融疗效

目的探讨T_(2)WI信号强度比值(SIR)联合扩散加权成像表观扩散系数(ADC)直方图纹理参数在预测T_(2)WI高信号子宫肌瘤聚焦超声消融疗效中的应用价值。方法选择2012年3月至2016年10月接受高强度聚焦超声(HIFU)消融治疗的患者,55例共有T_(2)WI高信号子宫肌瘤59个,根据体积消融率(消融率≥70%、消融率≤50%)分组,27例患者28个肌瘤入组高消融组,24例患者27个肌瘤入组低消融组。采用独立样本t检验比较两组T_(2)WI-SIR和ADC直方图纹理参数,使用受试者工作特征曲线下面积(AUC)评价各参数在预测T_(2)WI高信号子宫肌瘤聚焦超声消融疗效中的诊断效能。结果高消融组的T_(2)WI-SIR低于低消融组(P<0.05),AUC为0.886,最佳临界值为2.16,敏感度为88.9%,特异度为75%;ADC直方图纹理参数中ADC_(均值)、ADC_(方差)、ADC_(90%)、ADC_(99%)的AUC分别为0.632、0.640、0.651、0.647,最佳临界值分别为696.529、545569.085、1621.5、2839.5,敏感度分别为29.6%、92.6%、88.9%、92.6%,特异度分别为96.4%、50%、46.4%、31.3%。T_(2)WI-SIR联合ADC90%和ADC_(均值)的AUC值分别为0.914和0.906,敏感度均为92.6%,特异度均为78.6%。结论T_(2)WI-SIR和ADC直方图纹理参数可成为T_(2)WI高信号肌瘤术前预判疗效因子,T_(2)WI-SIR联合ADC直方图纹理参数可加强预测效能,为后期临床选择可治性T_(2)WI高信号肌瘤及术前评估疗效提供影像学依据。