基于NLRP3/Caspase-1介导细胞焦亡探讨中医药干预肺纤维化的研究进展

细胞焦亡是一种新型细胞程序性死亡,其表现出以NOD样受体蛋白3(NLRP3)为关键靶通路,严重依赖半胱天冬酶(Caspase)家族成员为主要生物学特征,对细胞炎症及免疫调节具有重要意义。肺纤维化是呼吸系统中常见的间质性肺疾病,早期产生不同程度的炎症损伤及修复,后期以肺组织纤维化为主要病理表现。中医药在治疗肺纤维化过程中具有多靶点、多途径等特点。一方面通过阻止细胞炎症介质释放,保护肺组织免受炎症损伤;另一方面,抑制促纤维因子形成,减少细胞外基质及胶原沉积物,阻止肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化。文章就NLRP3/Caspase-1焦亡经典通路机制与PF作用分析,整理、归纳近年来中医药干预细胞焦亡在PF发挥生物活性的研究进展,以期为其深入研究提供参考。

线粒体自噬相关调控通路在慢性阻塞性肺疾病发病机制中的作用研究进展

线粒体自噬是一种选择性自噬,通过清除受损线粒体来维持细胞及代谢的稳态。慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以持续存在的呼吸系统症状和气流受限为特征的常见慢性疾病,其发病机制复杂,至今仍未完全明确。许多研究表明调控线粒体自噬的多条信号通路在COPD进展中发挥重要作用。本文阐述了PINK1/Parkin、FUNDC1和Nix等相关通路通过调控线粒体自噬在COPD中作用的研究现状,并总结了近几年取得的重要研究进展,为进一步研究线粒体自噬在COPD相关通路中的调控作用提供合理的理论基础。

银杏叶提取物防治慢性阻塞性肺疾病的机制研究:基于PI3K/Akt/mTOR信号通路调控肺泡巨噬细胞自噬

背景银杏叶提取物(GBE)能抑制慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道及全身炎性反应,改善气道重塑,但其具体作用机制尚不清楚。目的探讨GBE通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控肺泡巨噬细胞自噬防治COPD的作用机制。方法于2020年11月至2022年3月,选取90只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、COPD模型组、GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组,每组15只。正常对照组第1、14天向气管内注入0.9%氯化钠溶液,其余时间进行正常饲养。COPD模型组、GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组和Taselisib组采用香烟熏吸联合气管内注入脂多糖(LPS)的方法构建COPD大鼠模型。GBE组于实验的第15~28天腹腔注射舒血宁注射液,比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组于实验的第29~42天分别给予Akt抑制剂比卡鲁胺、mTOR抑制剂雷帕霉素、PI3K抑制剂Taselisib进行干预。HE染色观察各组大鼠肺泡病理改变及气道重塑情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠肺泡灌洗液(BALF)与血清白介素6(IL-6)和白介素-8(IL-8)水平;显微镜下计数各组大鼠肺泡巨噬细胞数量;透射电镜观察各组大鼠肺泡巨噬细胞的超微结构;蛋白免疫印迹法(WB)检测各组大鼠肺泡巨噬细胞自噬相关蛋白表达水平并计算微管相关蛋白轻链3(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结果造模结束后各组大鼠数量为:正常对照组12只、COPD模型组11只、GBE组12只、比卡鲁胺组12只、雷帕霉素组12只、Taselisib组11只。HE染色结果显示,GBE组与各抑制剂组大鼠肺泡损伤程度较COPD模型组减轻;GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组肺平均内衬间隔(MLI)与平均肺泡面积(MAA)小于COPD模型组,平均肺泡数(MAN)大于COPD模型组(P<0.05);GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组支气管壁结构较COPD模型组完整。COPD模型组BALF与血清IL-6、IL-8水平高于其他各组(P<0.05)。正常对照组巨噬细胞数量低于其他各组(P<0.05),COPD模型组巨噬细胞数量高于其他各组(P<0.05)。透射电镜观察显示GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组肺泡巨噬细胞的自噬溶酶体较COPD模型组多。正常对照组的PI3Kp110α、Akt、p-Ak、mTOR、p-mTOR表达水平高于其他各组,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值低于其他各组(P<0.05);COPD模型组与GBE组、比卡鲁胺组、雷帕霉素组、Taselisib组比较,PI3Kp110α、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR表达水平升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值降低(P<0.05)。结论GBE能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路,维持COPD大鼠肺泡巨噬细胞的自噬功能,减轻巨噬细胞浸润,抑制炎性反应及肺泡破坏,改善气道重塑。

银杏叶提取物对肺纤维化大鼠Th1/Th2细胞因子和NF-κB p65信号通路的影响

目的探讨银杏叶提取物对肺纤维化大鼠肺组织病理改变及Th1/Th2细胞因子、核转录因子κB(NF-κB)p65表达的影响。方法将72只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、吡非尼酮组及银杏叶提取物高、中、低剂量组,每组12只。除正常组外,其余组大鼠均采用气管内注射博来霉素(5 mg/kg)方法制备肺纤维化模型。于造模后第8天开始,吡非尼酮组给予吡非尼酮溶液50 mg/kg灌胃,银杏叶提取物高、中、低剂量组分别给予银杏叶片混悬液100 mg/kg、50 mg/kg、25 mg/kg灌胃,均1次/d,连续灌胃21 d。于实验第29天处死各组大鼠,HE染色和Masson染色观察肺组织病理学改变及胶原沉积情况,流式细胞技术检测肺组织中干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)表达率,免疫组化法检测肺组织中NF-κB p65阳性表达情况。结果模型组大鼠肺组织呈弥漫性纤维化改变,肺组织炎症及纤维化评分均明显高于正常组(P均<0.05);吡非尼酮组和银杏叶提取物各组大鼠肺组织纤维化程度均较模型组轻,肺组织炎症及纤维化评分均明显低于模型组(P均<0.05);吡非尼酮组大鼠肺组织纤维化程度较银杏叶提取物各组改善明显,肺组织炎症及纤维化评分均明显低于银杏叶提取物各组(P均<0.05),但银杏叶提取物高剂量组肺组织炎症及纤维化评分均明显低于银杏叶提取物中、低剂量组(P均<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠肺组织中IL-4表达率及NF-κB p65表达IOD值均明显升高(P均<0.05),肺组织中IFN-γ表达率明显降低(P<0.05);与模型组比较,吡非尼酮组和银杏叶提取物各组大鼠肺组织中IL-4表达率及NF-κB p65表达IOD值均明显降低(P均<0.05),肺组织中IFN-γ表达率均明显升高(P均<0.05);银杏叶提取物各组大鼠肺组织中IFN-γ和IL-4表达率均明显高于吡非尼酮组(P均<0.05),吡非尼酮组和银杏叶提取物各组间NF-κB p65表达IOD值比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论银杏叶提取物可改善博来霉素诱导的大鼠肺部炎症和纤维化,机制可能与调节Th1/Th2相关细胞因子及NF-κB p65表达有关。

支气管扩张症肺脾同调的治疗思路探讨

支气管扩张症是一种慢性气道疾病,病程长且容易反复发作,其发病与气道炎症、免疫功能降低、营养状况差等有关。中医认为支气管扩张与肺脾两脏关系密切,调节肺脾功能可达到减轻炎症反应、提高免疫功能、改善营养状况及肺功能等作用。本文探讨支气管扩张的中医发病机制及肺脾同调治疗支气管扩张症的临床思路,以期为临床治疗该病提供新的思路。

基于“互联网+教育”模式下PBL教学法在临床医学大一新生教学的应用研究

目的:探索基于"互联网+教育"模式下PBL教学法对临床医学大一新生教学的应用研究。方法:选取广西中医药大学2019级临床医学专业大一新生200名,随机分为对照组(100名)和观察组(100名),对照组采用传统教学法,观察组开展教改课程《临床思维与技能》,并在这门课程中采用"互联网+教育"模式下PBL教学法,其余课程授课方法同对照组,最后根据DREEM量表及人体系统解剖学、生物化学的考试成绩评估两组教学效果及教育环境情况。结果:观察组DREEM量表总分及其中各方面的评分,还有人体系统解剖学、生物化学的成绩均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:基于"互联网+教育"模式下PBL教学法可提高临床医学大一新生的教学效果及改善教育环境,有助于优质型医学人才的培养。

银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠TGF-β_(1)、MMP-9及NF-κB表达的影响

[目的]探讨银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、核转录因子-κB(NF-κB)表达和肺组织病理变化的影响。[方法]选取72只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为正常对照组、肺纤维化模型组、吡非尼酮组、银杏叶提取物高剂量组、银杏叶提取物中剂量组、银杏叶提取物低剂量组,每组各12只。采用气管滴注博来霉素进行肺纤维化造模,于造模后29 d取标本,HE染色和Masson染色法评估肺组织肺泡炎症和纤维化程度,酶联免疫法(ELISA法)测定血清中TGF-β_(1)含量,免疫组化法检测MMP-9、NF-κB表达水平。[结果]肺纤维化模型组肺泡结构紊乱,肺泡壁增厚变形,管腔狭窄,胶原纤维明显增厚;吡非尼酮组及银杏叶提取物组肺泡结构破坏较少,胶原纤维沉积较为缓慢,银杏叶提取物组肺泡炎症积分及纤维化程度均低于肺纤维化模型组,TGF-β_(1)、MMP-9和NF-κB表达水平均低于肺纤维化模型组(P<0.05)。[结论]银杏叶提取物可缓解肺纤维化大鼠的肺泡炎症和纤维化程度,机制可能与其抑制肺组织中TGF-β_(1)、MMP-9与NF-κB表达水平有关。

肺纤维化相关信号通路及中药干预研究进展

肺纤维化(Pulmonary fibrosis,PF)是一种纤维化间质性肺病,呈慢性病程,具有进行性、致命性的特点[1-2]。目前普遍认为肺纤维化的发病机制是肺泡上皮持续性微损伤并伴有异常修复过程[3],以肌成纤维细胞异常活化、细胞外基质过度积聚、肺瘢痕形成为主要特征,最终是肺的结构破坏和功能丧失[4]。近代医家多从“肺痹”“肺痿”来论述肺纤维化,关于中药治疗肺纤维化的相关研究亦越来越多。笔者主要从以下几条信号通路对近年来中药干预肺纤维化的相关信号转导通路的研究综述如下。