人偏肺病毒基因型双重逆转录PCR检测方法的建立

目的建立一种鉴别不同基因型hMPV的RT—PCR方法。方法根据不同基因型的hMPVG蛋白基因序列设计合成A、B基因型的特异性引物，在一次双重PCR反应中根据扩增产物大小鉴别不同基因型。用该方法鉴别37份hMPV阳性的临床标本的基因型。结果用hMPVG蛋白编码基因的分型引物进行PCR反应，对已知的hMPV阳性标本直接进行分型得到的扩增产物大小易于区分；对常见的呼吸道病毒无非特异扩增，显示引物特异性良好。对37份临床标本进行基因分型结果显示，20份A基因型分型结果与M基因测序分型结果一致，17份经M基因测序分型为B基因型的阳性标本中有14份与M基因测序分型结果一致，3份未得到扩增产物从而不能分型，总符合率为91．9％[（20＋14）／37]。结论成功建立了一种可以鉴别不同基因型的hMPV的RT—PCR方法。