褪黑素的添加减轻猪精原干细胞的氧化损伤

旨在研究褪黑素(melatonin,MT)对体外培养猪精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)的作用机制。本研究采集3头7日龄健康大白公猪睾丸,利用差速贴壁法获得SSCs。后经形态学观察、碱性磷酸酶染色、标记基因检测及免疫荧光染色鉴定后以SSCs作为试验材料,设置MT浓度梯度(0、50、250、500、1000μmol·mL^(-1))组处理SSCs,每组设3个重复(n=3),空白对照组加入0.1%DMSO处理,分别检测添加MT后猪SSCs的细胞活力、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及凋亡基因表达变化。结果显示:1)分离的克隆团细胞具有SSCs的生长特性,可被碱性磷酸酶染色并表达干细胞标志基因OCT4、SOX2和SSCs标志基因NANOG、PLZF、UCHL1;2)50μmol·mL^(-1)以上的MT在处理48 h后可显著提高SSCs的细胞活力(P<0.05);3)MT可显著降低猪SSCs内ROS水平(P<0.05),极显著增加细胞内GSH含量(P<0.01);4)MT可显著抑制猪SSCs内凋亡蛋白Bax和Caspase3的表达(P<0.05)。MT具有清除猪SSCs中的ROS,提高总GSH含量,抑制凋亡基因表达进而提高细胞活力的作用,可为养殖过程中提高公猪繁殖性能提供参考。

基于透明标本研究巴西红耳龟幼体骨骼系统

巴西红耳龟(Red-eared slider,Trachemys scripta elegans),在动物界属龟鳖目泽龟科滑龟属,是水栖龟,头侧中部的鼓膜上有桔红色或暗红色的椭圆形斑[1]。透明标本是用化学和物理的方法,使软组织的折光率和透明剂的折光率相近,从而使软组织透明,骨组织清晰显现[2]。巴西红耳龟幼体骨块比较小,骨与骨之间的软骨成分比较多,不易于做成骨骼标本,且尚未发现通过制作龟透明标本来研究骨骼系统的报道。故本试验拟采用透明标本制作技术来研究巴西红耳龟幼体的整体骨骼形态结构以及各骨块之间的位置关系,既可建立巴西红耳龟透明标本的制作方法,又可确定其骨骼系统的解剖学特征。