辣椒碱通过TRPV1诱导结肠癌SW480细胞凋亡

目的:探讨辣椒碱通过瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)对人结肠癌SW480细胞的影响及可能的分子机制。方法:设立辣椒碱组及空白组,通过细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)法检测辣椒碱(50,100,200,300,400,500,600,800,1 000μmol·L^(-1))处理SW480细胞12,24,48 h后的细胞活性,选取有效抑制增殖的辣椒碱浓度;采用流式细胞术检测辣椒碱干预(200,400,800μmol·L^(-1))后细胞凋亡及细胞周期的变化;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测辣椒碱(200,400μmol·L^(-1))干预后TRPV1,肿瘤抑制蛋白p53,磷酸化p53(p-p53),抑癌基因[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)],活化的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3),cleaved Caspase-8,活化的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)的蛋白表达的影响;此外,利用微小RNA(mRNA)沉默技术作用TRPV1,观察200μmol·L^(-1)辣椒碱处理沉默TRPV1的SW480细胞凋亡率的变化,以及上述蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,辣椒碱50,100μmol·L^(-1)作用对细胞活性未出现显著影响,浓度在200μmol·L^(-1)以上时,随浓度增加细胞活性逐渐降低(P<0.01),呈剂量依赖效应;与空白组比较,辣椒碱200,400,800μmol·L^(-1)处理可明显诱导细胞凋亡(P<0.05,P<0.01);200,400μmol·L^(-1)辣椒碱干预下,细胞生长表现为G_(2)/M期阻滞,800μmol·L^(-1)表现为G_(0)/G_(1)期阻滞(P<0.05);与空白组比较,辣椒碱200,400μmol·L^(-1)处理细胞能够明显上调上述凋亡途径中相关蛋白(p53,p-p53,Bax,cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-8,cleaved PARP)的表达(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01);沉默TRPV1能明显抑制辣椒碱诱导的细胞凋亡及凋亡通路蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论:辣椒碱可能通过TRPV1受体抑制SW480细胞增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡。

蝇蛆制品对衰老小鼠肠道菌群调节作用的研究

目的探讨经药渣饲养的蝇蛆制品对衰老模型小鼠肠道菌群的影响。方法将48只小鼠分为蝇蛆低、中、高剂量组、空白对照组、衰老对照组、金双歧对照组,灌胃30 d后处死,对小鼠肠道内容物进行细菌培养,采用琼脂板计数法及生化鉴定检测小鼠肠道内菌群的变化,通过病理组织切片观察小鼠空肠、回肠病理变化。结果各组双歧杆菌、乳酸杆菌数量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。蝇蛆低、中、高剂量组肠球菌与肠杆菌数量均高于金双歧对照组,而低于衰老对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中蝇蛆低剂量组肠球菌、肠杆菌的数量低于蝇蛆中、高剂量组。空白对照组及衰老对照组小鼠回肠病理切片发现有炎性渗出与组织坏死,而蝇蛆低剂量组发现杯状细胞增生,淋巴组织丰富。小鼠空肠病理切片未见明显异常。结论经药渣饲养的蝇蛆制品可干预衰老小鼠的肠道菌群,起到类似肠道调节剂的作用。