柚皮苷通过抑制ERK1/2活化和DRP1表达减轻棕榈酸处理后脂肪细胞炎症

目的探讨柚皮苷(Nar)对棕榈酸(PA)处理后成熟脂肪细胞炎症反应的影响及机制。方法3T3-L1前脂肪细胞经成脂化诱导为成熟脂肪细胞后采用不同浓度(0、25、50、100、200μmol·L^(-1))PA处理细胞48 h,CCK-8检测细胞活力,ELISA检测细胞上清IL-6水平,确定后续实验最佳PA浓度。不同浓度(0、12.5、25、50、100μmol·L^(-1))Nar处理成熟脂肪细胞,CCK-8检测细胞活力,确定后续实验最佳Nar浓度。单独PA处理实验分为2组:Ctrl组、PA组;联合Nar处理实验分为4组:Ctrl组、PA组、Nar组、PA+Nar组;western blotting法检测各组p-ERK1/2和DRP1蛋白表达水平。联合线粒体裂变抑制剂Mdivi-1处理实验分为7组:Ctrl组、PA组、Nar组、Mdivi-1组、PA+Nar组、PA+Mdivi-1组、PA+Nar+Mdivi-1组,ELISA和western blotting法分别检测7组细胞上清IL-6水平和p-ERK1/2、DRP1蛋白表达水平。结果后续实验PA和Nar分别选择50和25μmol·L^(-1)。与Ctrl组比较,PA组p-ERK1/2和DRP1表达水平均升高(P<0.001)。与PA组比较,PA+Nar组、PA+Mdivi-1组、PA+Nar+Mdivi-1组IL-6水平、p-ERK1/2和DRP1表达均更低(P<0.05);与PA+Nar组比较,PA+Nar+Mdivi-1组IL-6水平差异无统计学意义(P>0.05),但p-ERK1/2和DRP1表达水平均降低(P<0.05)。结论Nar可减轻PA处理后成熟脂肪细胞的炎症反应,其机制是通过抑制ERK1/2激活和DRP1表达实现的。

油茶皂苷抗心肌缺血大鼠氧自由基和脂质过氧化作用

目的 以皮下注射异丙肾上腺素 (ISO)诱发大鼠心肌损伤为模型 ,观察油茶皂苷 (SQS)对心肌线粒体MDA含量、SOD、GSH Px活性的影响。方法 实验分生理盐水组 (NS组 )、ISO诱发损伤组 (I/R组 )、SQSⅠ组 (I/R +SQS 0 1mg·kg-1)和SQSⅡ组 (I/R +SQS 0 2mg·kg-1)。从阴茎静脉注射各被试药物或NS ,每天 1次 ,连续 3d。末次给药后取心肌组织行上述指标的测定。结果 I/R组MDA含量明显升高、SOD及GSH Px活性显著降低 ;SQS能对抗ISO所致上述指标的改变 ,且呈剂量依赖关系。

NO介导的油茶皂苷对在体大鼠产生的药理性预适应保护作用

目的 研究油茶皂苷 (SQS)预适应保护作用及 NO的关系。方法 以 ISO诱发大鼠心肌缺血损伤为模型 ,使用特异性 NO合成抑制剂 Methylene blue(MET)测定大鼠 ECG及 CPK活性 ,FFA和腺苷含量。结果 预适应iv SQS能有效地保护 ISO所致大鼠心肌损伤 ;先 iv MET后再给予 SQS,则 SQS对心肌损伤的保护作用明显减弱。结论 SQS对 ISO所致心肌缺血大鼠可产生药理性预适应保护作用 ,该作用由

油茶皂苷对缺氧-复氧诱导的内皮细胞损伤及中性粒细胞黏附的影响

目的研究油茶皂苷(SQS)对缺氧-复氧诱导的内皮细胞损伤及中性粒细胞黏附的作用及可能的机制。方法建立人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧-复氧损伤模型,取培养细胞上清液测定LDH活性,分别测定HU-VEC存活率,中性粒细胞黏附率、线粒体丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。同法检测中性粒细胞黏附。结果缺氧-复氧可导致HUVEC损伤及中性粒细胞黏附的增加,表现为LDH活性、MDA水平及中性粒细胞黏附率显著升高,而SOD和GSH-Px活性显著下降;SQS呈浓度依赖性地对抗上述改变。结论SQS对缺氧-复氧诱导的HUVEC损伤有保护作用,其机制可能与其抗脂质过氧化和抑制白细胞黏附有关。

油茶皂甙对缺血大鼠心肌线粒体Na^+、Ca^(2+)、Mg^(2+)含量及ATPase活性的影响

目的观察大鼠心肌缺血时心肌线粒体Na +、Ca2 +、Mg2 +含量、ATPase活性的变化及油茶皂甙(SQS)对它们的影响。方法以皮下多点注射异丙肾上腺素(ISO4mg·kg-1)诱导心肌缺血损伤为模型 ,测定Na +、Ca2 +、Mg2 +含量及ATPase活性。结果心肌缺血时线粒体Mg2 + 含量明显减少 ,Na+ 、Ca2 + 含量显著增多 ;Na+ _K + _ATPase、Ca2 + _Mg2 +_ATPase活性显著下降。SQS(0 2mg·kg-1,iv)能显著对抗缺血心肌线粒体Na +、Ca2 +、Mg2 + 含量及Na+ _K + _ATPase、Ca2 + _Mg2 + _ATPase活性的上述改变。结论SQS具有抗钠钙超载的心肌细胞保护作用。

K_(ATP)通道介导的油茶皂甙对在体大鼠心肌产生的缺血预适应样保护作用

目的 :研究油茶皂甙 (SQS)对大鼠心肌产生的缺血预适应样保护作用及与KATP通道的关系。方法 :以ISO诱发大鼠心肌缺血损伤为模型 ,使用KATP通道特异性阻断剂gliberclamide (GLI 5mg·kg-1)。实验分为四组 ,分别为生理盐水对照组 (NS组 )、ISO诱发损伤组 (I R组 )、SQS组 (I R +SQS 0 .2mg·kg-1)和GLI组 (I R +GLI +SQS)。在注射ISO前 ,从阴茎静脉预适应注射各被试药物或NS ,每天 1次 ,连续 3d。末次给药后立即皮下多点注射ISO。NS组皮下注射等量NS。分别测定大鼠ECG及末次给药后血清CPK活性 ,FFA和腺苷含量。结果 :预适应ivSQS能有效地保护ISO所致大鼠心肌损伤 ;先ivGLI后再给予SQS ,则SQS对心肌损伤的保护作用明显减弱。结论 :SQS对ISO所致心肌缺血大鼠可产生药理性预适应保护作用 。

油茶皂苷对脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的抑制作用

目的观察油茶皂苷(SQS)对脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)ICAM-1表达的作用并探讨其作用机制。方法建立HUVECs LPS应激模型,以油茶皂苷(10.0,1.0,0.1μmol.L-1)和ERK1/2抑制剂PD98059(10.0μg.L-1)预处理细胞8h,取培养细胞上清液测定LDH活性,HUVECs分别用于测定细胞存活率及ICAM-1 mRNA和蛋白的表达。结果LPS可显著升高LDH活性,上调ICAM-1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。SQS呈浓度依赖性地对抗上述改变,其作用与PD98059的作用相似。结论SQS可抑制LPS诱导的HUVECs ICAM-1表达的上调,其机制可能与MAPK-ERK1/2(MEK1/2)信号转导通路有关。

热应激诱导内皮细胞与白细胞黏附及油茶皂苷的拮抗作用

目的探讨热应激时内皮细胞与白细胞黏附的改变及油茶皂苷对此影响。方法建立人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)热应激损伤模型,以油茶皂苷(10.0,1.0,0.1μmol.L-1)预处理细胞5 h,取培养细胞上清液测定LDH活性,HUVECs分别用于测定细胞存活率,白细胞黏附率及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达。结果热应激可引起LDH活性升高,白细胞黏附率及ICAM-1表达的增加,与对照组比较,差异具有显著性(P<0.01),但细胞存活率无明显下降。油茶皂苷呈浓度依赖性地对抗上述改变,但对细胞存活率无明显影响。结论油茶皂苷可抑制热应激诱导内皮细胞与白细胞黏附的增加,其机制可能是下调ICAM-1的表达。

MEK1/2在脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达中的作用

目的:探讨MEK1/2在脂多糖诱导入脐静脉内皮细胞(HUVECS)ICAM-1表达中的作用。方法:用不同浓度LPS或LPS加MEK1/2特异性抑制剂PD98059和HUVECS孵育不同时间后,分别采用RT-PCR和WESTERN BLOT- TING检测ICAM-1 MRNA和蛋白的表达。结果:LPS呈时间-浓度依赖性地上调HUVECS ICAM-1 MRNA和蛋白的表达。LPS预处理后2 H,HUVECS ICAM-1 MRNA和蛋白的表达即开始升高,LPS(100ΜG·L-1)作用后6 H,ICAM-1 MR- NA和蛋白的表达基本达到高峰;PD98059(10ΜG·L-1)可显著抑制LPS(100ΜG·L-1)诱导6 H的ICAM-1 MRNA和蛋白的表达,抑制率分别为54．4％和44．9％(P<0．01 VS LPS)。结论:调控MEK1/2通路可能为内毒素休克诱导血管内皮损伤的防治提供新的策略。

三种人脐静脉内皮细胞分离方法的比较

目的建立人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分离和培养的方法。方法分别采取“灌注消化法”、“机械刮取法”和“灌注搓揉法”来分离HUVECs。通过苔盼蓝排斥法检测细胞活力并计数,进行免疫荧光法鉴定,比较这3种方法在获取的细胞数目、细胞活力和纯度方面的差异。常规进行细胞的原代培养和传代培养。取第3代培养细胞绘制细胞生长曲线,根据细胞生长特点,形态及表型特征对培养细胞进行鉴定。结果“灌注搓揉法”所分离的细胞无论从细胞数目、细胞活力和纯度方面均优于传统的“灌注消化法”和“机械刮取法”。培养的细胞从形态、生长特点和表型鉴定证实为血管内皮细胞(ECs)。结论“灌注搓揉法”是一种获取血管ECs成功率高,可靠的方法。

油茶皂苷C对脐静脉内皮细胞缺氧及复氧损伤时的影响

目的:研究脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧/复氧损伤(A/R)时,单核细胞与内皮细胞黏附及细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA表达并观察油茶皂苷C(SQS-C)对此的影响。方法:内皮细胞A/R前3h,分别加入终浓度为0.1,1.0和10.0μmol/LSQS-C,再A/R5h,比色法测定内皮细胞与单核细胞的黏附率,RT-PCR法检测内皮细胞ICAM-1mRNA的表达。结果:A/R时,单核细胞与内皮细胞的黏附显著增加(P<0.01);SQS-C能明显降低细胞黏附率,减少内皮细胞ICAM-1mRNA的表达(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论:SQS-C能抑制缺氧/复氧损伤的内皮细胞与单核细胞的黏附,减少内皮细胞ICAM-1mRNA的表达。

银杏竹鼠肌肉成分对小鼠血脂、体液免疫的影响

目的 :观察银杏竹鼠肌肉成分对小鼠血脂、体液免疫的影响。方法 :喂饲银杏竹鼠肌肉干粉予小鼠连续一个月后 ,用酶法和血清凝集法分别测定血清总胆固醇 (T CH) ,甘油三酯 (TG)含量以及小鼠血清中抗SRBC凝集素值。结果 :竹肉各组小鼠与NS组、洋参丸组比较 ,血清总胆固醇 (T CH) ,甘油三酯 (TG)含量差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;与NS组相比 ,竹肉各组均能明显增加小鼠血清中抗SRBC凝集素值 (P <0 .0 5 ) ,且呈剂量依赖关系 ;其中 ,竹肉干粉 1∶4 (A2组 )作用更显著 (P <0 .0 1) ,与洋参丸组作用相当 (P >0 .0 5 )。结论 :口服银杏竹鼠肌肉成分可增强小鼠体质、增强小鼠免疫能力 ,且不会造成血脂升高 ,这一结果也提示银杏竹鼠肌肉成分很有可能成为极有应用前景和开发价值的保健食品。

梅山降糖神茶对四氧嘧啶糖尿病大鼠的降糖作用

目的：研究梅山降糖神茶对四氧嘧啶糖尿病大鼠的降糖作用。方法：给四氧嘧啶糖尿病大鼠连续４周ｉｇ梅山降糖神茶３ｇ／（ｋｇ·ｄ），６ｇ（ｋｇ·ｄ）后，测定其空腹血糖、糖耐量试验以及切片观察胰岛形态。结果：给药２周后，空腹血糖显著降低；４周后糖耐量能力明显增强；病理切片结果提示：胰岛形态、结构明显修复。结论：梅山降糖神茶对四氧嘧啶糖尿病大鼠有标本兼治之功效。

油茶皂苷对缺氧复氧所致大鼠心脏损伤的保护作用及其机制探讨

目的 :通过大鼠离体心脏 L angendoff灌流 ,观察油茶皂苷 (sasanquqsaponin,SQS)对缺氧复氧 (anoxia/reoxygenation,A/ R)损伤的保护作用及其机制。方法 :A/ R为缺氧 40 m in再给氧 30 min;SQS0 .5 mg/ L 或Gliberclam ide30 μmol/ L + SQS0 .5 mg/ L 于缺氧复氧前 15 min灌流 15 m in,分别记录心功能及测量酶活性。结果 :与 A/ R组相比 ,SQS组能增加心肌的收缩功能 ,使氧自由基清除剂超氧化物歧化酶 (SOD) ,谷胱苷肽转移酶(GSH- Px)活性增强 ,脂质过氧化产物丙二醛 (MDA )生成减少 ,降低心肌组织钙含量 ,使肌酸激酶 (CK )生成减少 ,所以 SQS对心肌 A/ R损伤具有保护作用。在加入 KATP通道阻断剂 Gliberclam ide与 SQS同时灌注时 ,发现 SQS的上述作用消失。结论 :SQS的心肌保护与 KATP通道的开放有关。

Lee's指数用于评价成年大鼠肥胖程度的探讨

研究Lee's指数在评价成年大鼠肥胖程度方面的可行性与准确性。方法将成年肥胖大鼠Lee's指数与体重增加率、腹腔脂肪湿重、脂肪细胞大小以及血脂等指标同步测量。结果肥胖模型大鼠较其它各组大鼠Lee's指数明显增加 ,且与上述其它观察指标变化一致 ,高度相关。结论Lee's指数可作为评价成年肥胖模型大鼠肥胖程度的指标。

PPARγ介导卡托普利改善高糖诱导血管内皮细胞胰岛素抵抗的作用

目的研究卡托普利(captopril,Cap)对高糖(high glucose,HG,33 mmol·L-1)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelium cells,HUVECs)胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的作用及机制。方法首先观察Cap对HG(33 mmol·L-1)诱导的HUVECs IR的改善作用。实验随机分为5组,即正常对照(Control)组、IR组、IR+CapⅠ(1×10-6mol·L-1)组、IR+CapⅡ(1×10-5mol·L-1)组、IR+CapⅢ(1×10-4mol·L-1)组。其次证实Cap改善HG(33mmol·L-1)诱导HUVECs IR的作用是由PPARγ介导。实验随机分为6组,即Control组、IR组、IR+Cap(1×10-5mol·L-1)组、PPARγ抑制剂GW9662(PI,1.0μmol·L-1)组、IR+PPARγ抑制剂(IR+PI,1.0μmol·L-1)组、IR+Cap+PPARγ抑制剂(IR+Cap+PI,1.0μmol·L-1)组,除Control组和PI组外,所有各组先用含33 mmol·L-1葡萄糖的DMEM培养48 h,Cap各组再加不同浓度的Cap处理4 h,最后胰岛素(100 nmol·L-1)处理30 min,抑制剂组再加抑制剂(1.0μmol·L-1)处理1 h,最后进行指标检测。结果 IR组NO水平明显降低、ET-1含量明显升高,提示细胞已产生IR,但PPARγmRNA和蛋白表达水平与Control组相比差异无统计学意义(P>0.05);Cap呈浓度依赖性逆转HG诱导NO和ET-1水平的改变,明显增加磷酸化PPARγ(PPPARγ)水平,说明其可明显改善HG诱导的IR,但对PPARγmRNA和蛋白表达水平无明显影响(vs IR,P>0.05);加PI处理后,Cap改善IR的作用完全取消,提示Cap改善IR的作用是由PPARγ介导。结论Cap可通过PPARγ介导改善高糖所致血管内皮细胞IR,其机制可能与PPARγ表达水平无关,而与PPARγ激活有关。

HSP70介导的川芎嗪预处理对大鼠离体心脏的延迟保护作用

目的:研究川芎嗪(TMP)预处理对离体大鼠心脏缺血再灌注(I/R)损伤的延迟保护作用及其可能的机制。方法:大鼠分为对照组(Cont)组、Cont+Act D组、I/R组、I/R+Act D组、TMP组、TMP+Act D组。TMP组、TMP+Act D组大鼠分别静脉注射TMP 10 mg/kg或TMP 10 mg/kg和Act D 7 mg/kg;Cont组、Cont+Act D组、I/R组、I/R+Act D组大鼠分别静脉注射等量生理盐水或等量胜利盐水和Act D 7 mg/kg。25 h后取大鼠心脏行Langendorff逆行灌流、制作I/R损伤模型。检测ECG、LVP、dp/dtmax、心肌梗死面积以及心肌组织中SOD与GSH-Px活性、MDA含量、HSP70的表达。结果:TMP预处理可显著改善大鼠离体心脏I/R损伤时的左心功能,减少梗死面积与心律失常的发生率,提高心肌组织中SOD与GSH-Px活性、降低MDA含量、上调HSP70的表达;TMP预处理的延迟保护作用可被Act D所取消。结论:TMP预处理整体大鼠24 h后,可在其心脏诱导出良好的延迟保护作用;其机制可能与上调HSP70蛋白表达有关。

阿魏酸钠预处理对大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的延迟保护作用

目的:研究阿魏酸钠(SF)预处理对心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤的延迟保护作用。方法:以细胞存活率、LDH活性、SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量、细胞超微结构改变等为观察指标,用终浓度分别为0.84、1.68、3.36、6.72 mmol/L的SF预处理原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞3 h、24 h后观察其对A/R损伤的保护作用及其特异性NO合成酶抑制剂L-NAME、MAPK抑制剂PD98059的影响。结果:SF预处理能显著提高细胞存活率,降低LDH活性,且呈剂量依赖性;SOD活性、GSH-Px活性增加,MDA含量减少,细胞超微结构显著改善。L-NAME和PD98059能部分取消SF预处理的上述延迟保护作用。结论:SF预处理对心肌细胞A/R损伤有明显的延迟保护作用,其机制可能与NO生成、MAPK活化有关。

复方银参颗粒对大鼠脑缺血损伤的保护作用

目的 :研究复方银参颗粒 (FYSG)对大鼠缺血性脑损伤的药理作用。方法 :采用Tamura法建立大鼠大脑中动脉阻断模型 ,观察大鼠脑梗塞面积、卒中行为评级 ,测定脑组织水含量、脑指数。结果 :FYSG (10 0g/kg、5 0g/kg)能明显缩小大脑中动脉阻断大鼠脑梗塞面积 ,改善卒中大鼠神经症状 ,降低脑组织含水量、脑指数。结论 :FYSG对大鼠缺血性脑组织损伤具有保护作用。