大黄酸对过氧化氢致心肌细胞线粒体损伤的保护作用机制

目的探讨大黄酸是否通过调节线粒体功能保护过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的心肌细胞损伤。方法应用H_(2)O_(2)建立心肌细胞损伤模型,实验分为3组:对照组(不用H_(2)O_(2)处理)、H_(2)O_(2)组(以H_(2)O_(2)诱导心肌细胞H9c2损伤)、大黄酸组(H_(2)O_(2)刺激心肌细胞H9c2造模,1μg/mL大黄酸干预)。采用噻唑蓝法检测细胞活力,电镜检测线粒体超微结构,JC-1检测线粒体膜电位,Western blot检测蛋白p-Drp1、Drp1、OPA1、Bax、Bcl-2及Caspase 3表达水平。结果与对照组相比,H_(2)O_(2)组能明显抑制细胞活力(P<0.05),大黄酸组中3个浓度均能显著增加细胞活力,大黄酸浓度为1μg/mL细胞活力最显著(P<0.01)。对照组线粒体轮廓完整,棱嵴清晰;H_(2)O_(2)组线粒体肿胀,轮廓模糊,棱嵴消失,可见空泡化改变;大黄酸组线粒体与H_(2)O_(2)组相比,形态得到明显改善。与对照组比较,H_(2)O_(2)组细胞浆中绿色荧光增强、线粒体内红色荧光减弱;与H_(2)O_(2)组相比,大黄酸组线粒体内红色荧光增强、细胞浆中绿色荧光减弱。与对照组比较,H_(2)O_(2)组OPA1和Bcl-2表达降低,而p-Drp1、Bax和Caspase 3显著增加(P<0.05);大黄酸组OPA1、Bcl-2明显增加,而p-Drp1、Bax和Caspase 3显著降低(P<0.05)。结论大黄酸能够减轻H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞损伤,其可能是通过保护线粒体形态和功能,调节线粒体动力学蛋白,抑制凋亡而实现。