虹鳟pmela基因的克隆及其在不同发育阶段和组织中的表达分析

前黑素小体蛋白a (premelanosome protein,pmela)基因是黑色素合成通路中的关键基因之一,对动物的体色有着重要影响。为探讨pmela基因在虹鳟(Oncorhynchus mykiss)体色变异中的作用,本研究利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术对pmela基因cDNA全长进行克隆并运用生物信息学方法分析该基因的序列特征,同时采用qRT-PCR比较pmela在野生型虹鳟(虹鳟)、黄色突变型虹鳟(金鳟)和杂交F_(1)代受精期至孵化后3个月不同发育时期及成鱼不同组织中的相对表达量。研究获得pmela基因cDNA全长序列3 476 bp,包含2 532 bp开放阅读框,编码843个氨基酸。序列分析发现,Pmela为疏水性蛋白且存在PKD功能结构域。同源性比对发现,虹鳟Pemla氨基酸序列与红鲑(Oncorhynchus nerka)的同源性高达97.75%;进化分析结果显示,虹鳟与红鲑的亲缘关系最近,与人类(Homo sapiens)和小鼠(Mus musculus)的亲缘关系最远。qRT-PCR结果显示,pmela基因在虹鳟与金鳟胚胎及出膜后各时期均有表达,在受精期至16细胞期中的表达为虹鳟高于金鳟,出膜后该基因在金鳟背部皮肤中的表达均高于虹鳟,且在4细胞期、16细胞期、原肠期、神经期、体节期、心跳期、1 day post-hatching (1 dph)、3 dph、5 dph、7 dph、10 dph、1 month post-hatching (1 M)和2 M时期中,虹鳟与金鳟的表达存在显著差异。在各组织中,pmela基因在虹鳟与金鳟背部皮肤和眼睛中的表达显著高于其他组织。在杂交F_(1)代中,pmela基因在不同发育时期和组织中的表达模式与双亲类似,且在大部分相同时期和组织中的表达与双亲存在显著差异。上述结果表明,pmela基因的表达量高低与虹鳟体色具有一定的相关性,且可能参与其体色的形成过程。本研究结果为进一步研究pmela基因在虹鳟体色变异中的作用提供基础资料。

桂蔬新二号黑皮冬瓜高产栽培技术

桂蔬新二号黑皮冬瓜是一种新品种冬瓜,具有生长快、产量高、品质好等特点。为了进一步提高桂蔬新二号黑皮冬瓜的产量和品质,需要采取科学合理的高产栽培技术。详细阐述了桂蔬新二号黑皮冬瓜高产栽培技术要点,包括土壤选择、施肥管理、水分控制、病虫害防治等,并结合实际案例介绍了应用效果和今后研究方向,对于推进桂蔬新二号黑皮冬瓜的生产和促进冬瓜产业可持续发展具有重要意义。

半滑舌鳎vasa调控区的克隆、表达载体构建及其驱动活性检测

为研究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)vasa(Csvasa)基因调控区的功能,在已克隆的Csvasa基因编码序列的基础上,采用基因组步移和PCR扩增的方法克隆得到Csvasa调控区,通过生物信息学方法分析vasa基因5′区,并构建了含Csvasa基因调控区的绿色荧光蛋白(GFP)表达载体(p Csvasa-GFP-T),进一步通过显微注射技术初步验证调控区的驱动活性。结果表明,通过基因组步移和PCR扩增获得Csvasa 5′区5 166 bp和3′区1 655 bp,利用在线生物信息学软件对5′区序列进行分析,发现在转录起始点上游26 bp处存在保守的TATA框,以及潜在的转录因子结合点如SRY、Oct-1、Sox-5、CREB、GATA、AP-1、C/EBP、Sp-1、c-Myc、HNF、NKX2-5、V-Myb等。通过显微注射技术,将所构建的p Csvasa-GFP-T表达载体注射于青鳉(Oryzias latipes)受精卵并进行培养观测,发现Csvasa调控区能够驱动GFP在青鳉胚胎内表达,荧光表达率为81%。将有荧光的胚胎培养为成鱼,检测外源基因的整合率为11.5%。这些结果为进一步研究半滑舌鳎原始生殖细胞(PGCs)的标记、追踪和操作研究以及半滑舌鳎的性别控制等奠定了基础。

海水附着细菌多样性和群落演替的研究

通过细菌16S rRNA 基因(16s rDNA)文库方法研究了1至7天近海浸海玻片附着细菌的多样性和群落演替特征。从1至7天3个基因文库中共筛选了269个克隆、144个有效分类操作单元(OTU)并对其全部测序。16S rDNA 序列系统进化分析发现,这些细菌主要归属于8个细菌门类:变形菌门(Proteobacteria)(α-、γ-和δ-亚群)、拟杆菌门(Bac-teroidetes)、芽单胞菌门(Gemmatimonadetes)、厚壁菌门(Firmicutes)、浮霉菌门(Plancto-mvcetes)、光合细菌门(Cyanobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和酸杆菌门(Acidobacteria)。由此可知1周内变形菌门的α-亚群、γ-亚群和拟杆菌门的细菌是常见的附着类群;α-变形菌亚群中的玫瑰杆菌族(Roseobacter clade)是海洋环境中比较常见的早期附着种类;由聚类分析显示3天和7天细菌的群落结构相似。这些实验结果为了解海水附着细菌生物膜形成的演替过程提供了理论基础,并为海水微生物腐蚀控制提供了生物学线索。

水产养殖学专业实验与实习教学结合的实践与思考

实验和实习教学是水产养殖专业人才培养的两个重要环节。该实验率先尝试将水产养殖6门专业课的实验与生产实习教学密切结合的教学方式,解决实验材料与实习基地缺乏、实验实习内容单一陈旧和学生对实验实习不感兴趣的问题,提高学生的理论知识与专业综合素质,实现理论教学向应用教学的转变。文章总结了提高实验教学和生产实习质量的创新改革措施。

黄河上游池塘浮游生物群落结构的研究

[目的]为黄河上游池塘浮游生物的调控和健康养殖提供理论依据。[方法]对黄河上游典型的老水池塘和新水池塘中浮游生物进行调查分析。[结果]老水池塘检出浮游植物5门19属,其中蓝藻门最多,占浮游生物总生物量82.66%;检出浮游动物4门类。新水池塘检出浮游植物6门16属,以蓝藻、绿藻和硅藻为主,分别占总生物量34.15%、36.40%和21.23%;检出浮游动物2门类。[结论]老水池塘含蓝藻较多,新水池塘浮游生物生物量较低,都需进行合理调控。

超声引导下腹横肌平面阻滞在剖宫产术后镇痛效果研究

目的探究超声引导下腹横肌平面阻滞在剖宫产术后镇痛效果。方法 80例美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ~Ⅱ级择期腰硬联合麻醉下进行剖宫产术的患者作为研究对象,随机分为A组和B组,各40例。A组患者注射罗哌卡因,而B组则注射等容量的氯化钠溶液。手术完成之后行静脉自控镇痛并在超声引导下腹横肌平面阻滞。记录并分析两组患者术后不同时间点镇痛相关数据以及不良反应发生情况。结果 A组患者各个时间点静态视觉模拟疼痛评分与B组比较差异无统计学意义(P>0.05),各时间点动态视觉模拟疼痛评分均明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组镇痛泵第一次镇痛按压时间(12.74±3.53)h明显晚于B组的(3.56±2.53)h,镇痛泵按压次数(2.05±0.64)次及药物24 h内剂量(51.23±1.56)μg少于B组的(5.67±2.34)次、(62.23±2.53)μg,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论超声引导下腹横肌平面阻滞在剖宫产术后镇痛效果较好,值得在临床上推广使用。

长春花提取物对Q235碳钢在酸性溶液中的缓蚀作用

目的 开发一种绿色缓蚀剂,并研究它对碳钢在酸性溶液中的缓蚀作用及机理。方法 用体积分数为70%的乙醇水溶液回流获得长春花提取物(CR-E),通过失重实验、电化学综合实验、火焰原子吸收分光光度法(FAAS)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和扫描电子显微镜(SEM)等分析CR-E对Q235碳钢在0.5 mol/L H_(2)SO_(4)溶液中的缓蚀性能和机理。结果 CR-E对Q235碳钢在H_(2)SO_(4)溶液中的腐蚀具有良好的缓蚀效果,缓蚀效率随着CR-E浓度的增加而增大,在CR-E的质量浓度为1000mg/L时,缓蚀效率达到89.84%。添加CR-E后可迅速抑制腐蚀,并持续发挥缓蚀作用,在浸泡48 h后Q235碳钢的缓蚀效率仍可达89.99%;电化学综合实验结果表明,CR-E是一种有效的混合抑制型缓蚀剂,腐蚀反应的电荷转移电阻随着CR-E浓度的增加而增大,腐蚀电流密度则随之减小;通过FAAS证实阳极铁的溶解被抑制,通过FTIR证实CR-E分子可以有效吸附在Q235碳钢表面,通过SEM证实Q235碳钢表面受到了CR-E的有效防护。缓蚀机理是CR-E缓蚀剂分子在Q235碳钢表面的吸附减缓了铁在腐蚀溶液中的溶解,腐蚀过程受到显著抑制,该吸附以物理吸附为主,且遵循Langmuir吸附等温模式。结论 在0.5 mol/L H_(2)SO_(4)溶液中,CR-E对Q235碳钢的缓蚀作用显著,可作为一种候选绿色缓蚀剂在工业领域推广应用。

动物养殖课程教学的改革与创新探索——以特种水产动物养殖学教学为例

动物养殖课程是水产、畜牧和兽医等学科的重要专业课程。《特种水产动物养殖学》是水产养殖学专业的一门必修专业课程,为培养出符合水产养殖行业特色的创新型和复合应用型人才,对该课程的教学内容、教学方法与手段以及考核方式进行了改革及探索。课程改革包括合理取舍理论课程内容,优化重组实验教学项目,有机结合传统教学、现代多媒体教学及项目式教学方法与手段,实行多样化和综合化的考核方式。实践表明课程改革极大地增强了学生自主学习的兴趣,加深了专业情感,提高了实践和创新能力,取得了良好的教学效果,可为其他动物养殖课程教学提供参考。

不同麻醉下对老年腹部手术患者凝血功能与血小板的影响

目的探讨不同麻醉方案对老年腹部手术患者凝血功能、血小板、血栓素的影响。方法选取医院择期行腹部手术的老年患者90例作为研究对象，ASAI-Ⅱ级，采用数字随机表将患者分为A、B组，A组行全麻，B组行全麻复合硬膜外麻醉，记录术前（T1）、术后24h（T2）、术后72h（T3）时凝血指标、血小板、血栓素的变化情况，记录两组自主呼吸恢复时间、清醒时间、拔管时间。结果B组自主呼吸恢复时间、清醒时间、拔管时间分别为（4．91±1．36）min、（8．26±3．97）min、（13．05±9．11）min较对照组短，差异具有统计学意义（P〈0．05）；两组T1时Fbg、TT、PT、aPTT、水平无明显差异（P〉0．05），T2、T3时Fbg、TT、PT、aPTT均上升，与T1时相比，差异显著（P〈0．05）；B组他、r13时上升幅度较A组低；两组T1时PLT、TXB2无明显差异（P〉0．05），他、髓时与T1时相比差异显著（P〈0．05）；B组他、r乃时PLT较A组高，TXB2较B组低，差异显著（P〈0．05）。结论全麻复合硬膜外麻醉能够降低机体应激反应，预防凝血系统活化，降低血小板聚集率和血栓素水平。

3种虹鳟养殖群体的遗传结构及遗传多样性分析

从40个随机引物中筛选出20个,采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术,对甘肃金鳟、道氏虹鳟和美国金鳟3个群体进行了遗传结构和遗传多样性分析。结果表明,甘肃金鳟、道氏虹鳟、美国金鳟群体多态位点百分比分别为82.79%、73.33%、77.87%;平均等位基因数分别为1.8239、1.7429、1.7887,有效等位基因数分别为1.4823、1.4281、1.4527;基因多样度分别为0.2820、0.2528、0.2675,Shannon遗传多样性指数分别为0.4219、0.3801、0.4022;以上参数表明,3个群体的遗传多样性均处于偏高的水平,且以甘肃金鳟的遗传多样性最为丰富。甘肃金鳟与美国金鳟之间的遗传距离最大,道氏虹鳟与美国金鳟之间的遗传距离最小。遗传分化指数表明,种内群体间的遗传分化程度很低,而群体内个体间的分化程度很高,变异主要来源于群体内个体间。综合分析认为,甘肃金鳟遗传多样性偏高,有进一步选育的遗传潜力;同时,群体内遗传分化程度较大,说明品种的纯度可能较低,经济性状不够稳定,需进一步选育。

白花银背藤不同提取部位止血作用研究

目的研究白花银背藤[Argyreia seguinii(Lévl.)Vaniot ex Lévl.]不同提取部位的止血药理作用。方法依次以石油醚、醋酸乙酯、正丁醇和水为溶剂进行提取,采用毛细玻管法、玻片法和剪尾法检测其止血作用。结果白花银背藤石油醚和水提物对小鼠凝血时间和出血时间无显著作用,与0.9%氯化钠溶液比较,差异无显著性(P>0.05);白花银背藤醋酸乙酯与正丁醇显著缩短小鼠凝血和出血时间,作用与云南白药和止血芳酸相仿,与0.9%氯化钠溶液比较,差异有极显著性或显著性(P<0.01或P<0.05)。结论白花银背藤的醋酸乙酯与正丁醇提取物均能在一定程度上影响小鼠的出血与凝血时间。

水产养殖学专业产学研结合实践教学体系建设

根据水产养殖学专业的学生特点和地区特点制定了本专业的实践教学计划,建立了产学研结合的实践教学体系,不但取得了良好的教学和人才培养效果,还受到了实践教学基地生产单位的欢迎,为内陆地区水产养殖专业产学研结合实践教学体系的建设提供了新的思路。

瑞芬太尼复合依托咪酯用于腹腔镜直肠癌根治术的麻醉效果观察

目的观察瑞芬太尼复合依托咪酯用于腹腔镜直肠癌根治术的麻醉效果.方法选择2012年12月～2013年5月于本院治疗的82例进行腹腔镜直肠癌根治术的患者,随机分为两组.对照组给予依托咪酯复合芬太尼麻醉,实验组给予依托咪酯复合瑞芬太尼麻醉,麻醉30min后观察患者的血压、心率和血氧饱和度及不良反应情况.结果实验组的血压、心率、血氧饱和度指标水平明显优于对照组（P＜0.05）;两组均未发生明显的不良反应.结论瑞芬太尼复合依托咪酯的方法更有利于腹腔镜直肠癌根治术的麻醉,值得临床进一步研究推广.

青鳉(Oryzias latipes)性腺分化与发育的组织学观察

青锵（Oryzias latipes）繁殖力强、繁殖周期短，为硬骨鱼类研究领域的模式生物。口前，尚无青鲻性腺分化与发育过程的系统资料。该文以青鲻孵化后不同时期的生殖腺为材料，经石蜡切片和HE染色后，于光学显微镜下观察其性腺的出现、分化及成熟过程。结果显示：孵化后5～10d，仔鱼腹腔右侧已可见生殖腺，生殖细胞体积明显大于周围的体细胞；孵化后10d，性腺开始分化，雌、雄性个体性腺出现结构上的差异，雌性个体内可明湿观察到生殖包囊结构；随后，雌、雄性个体内先后可见卵子和精子的发生过程和组织学分期；孵化后50d，首见卵巢腔结构和成熟精子。此外，还观察到性反转现象的特例，即两性特征共存的现象。该结果将为发育生物学、遗传生物学提供基础资料。

预充回流试验法在老年髋关节置换术硬膜外麻醉中的应用

目的探讨预充回流试验法对老年髋关节置换术硬膜外麻醉术后疼痛的影响。方法择期拟行髋关节置换术患者60例,将患者随机分为A、B两组,每组30例,A组为预充回流试验法组,B组为空白对照组。A组行硬膜外麻醉时向硬膜外腔预充注入生理盐水3 ml,观察1 min玻璃注射器内有无回流液及回流液性状。B组行常规硬膜外麻醉。结果 A组麻醉起效时间较B组短,差异有统计学意义(p<0.05);A组术后30 min、1 h、2 h、4 h的VAS评分明显低于B组,差异有统计学意义(p<0.05)。A组不良反应中,恶心呕吐和头痛的发生率较B组低,差异有统计学意义(p<0.05)。结论预充回流试验法应用于老年髋关节置换术硬膜外麻醉能有效缩短麻醉起效时间,减轻术后疼痛,降低不良反应的发生率。

氯胺酮、瑞芬太尼顺序联合丙泊酚在小儿短小手术麻醉中的应用

目的探讨氯胺酮、瑞芬太尼顺序联合丙泊酚在小儿短小手术麻醉中的应用效果。方法以择期行短小手术的90例患儿为研究对象,根据不同麻醉方式将其分为三组各30例,A组行氯胺酮+瑞芬太尼+丙泊酚麻醉,B组给予氯胺酮+丙泊酚麻醉,C组则行瑞芬太尼+丙泊酚麻醉,比较三组不同时段(麻醉前、诱导后、切皮后3min、10min)心率、平均动脉压、呼吸频率等指标,同时记录三组麻醉苏醒时间、麻醉恢复时间及不良反应等情况。结果 A组手术不同时段HR、RR、MAP、Sp O2无明显变化(P>0.05),B组诱导后、切皮后3min、10min时HR、MAP较麻醉前明显下降(P<0.05),C组RR存在明显变化(P<0.05)。A、C两组麻醉苏醒时间、麻醉恢复时间均明显短于B组(P<0.05)。结论氯胺酮、瑞芬太尼顺序联合丙泊酚具有镇痛良好、苏醒迅速、呼吸抑制少等特点,可作为小儿短小手术重要麻醉手段。

依托咪酯乳剂联合地佐辛在心脏病病人无痛人流中应用

目的探讨依托咪酯乳剂联合地佐辛在心脏病病人的无痛人流中应用的临床效果。方法选择接受无痛人工流产的心脏病病人60例,随机法分为A、B、C三组,每组各20例。A组采用依托咪酯乳剂+地佐辛麻醉;B组采用丙泊酚+地佐辛麻醉;C组采用依托咪酯乳剂+芬太尼麻醉,记录麻醉前(T1)、注射依托咪酯乳剂和丙泊酚后1 min(T2)、手术开始后1 min(T3)和3 min(T4)、手术结束(T5)时血压、心率、脉搏、氧饱和度;观察麻醉效果和麻醉恢复情况,记录各种不良反应。结果 T2时A、B两组患者比较,A组SBp、DBp、MAp、HR、Sp O2下降幅度小于B组,差异有统计学意义(P<0.01);T2时A、C两组患者比较,两组患者的SBp、DBp、MAp、HR下降幅度差异无统计学意义(P>0.05),A组Sp O2下降幅度小于B组,差异有统计学意义(P<0.01);三组患者麻醉效果、麻醉恢复情况无明显差别,不良反应统计中A组出现麻醉药物注射痛较B组少及A组出现肌震颤较B组多,差异有统计学意义(P<0.01)。结论依托咪酯乳剂联合地佐辛麻醉对呼吸、循环无明显抑制,起效快,代谢迅速、苏醒质量好和不良反应少,更适用于心脏病病人的无痛人流。

黄河炳灵水电站库区水生生物资源调研分析

为了更好的了解和保护黄河炳灵水电站库区的鱼类资源及其生态环境,在2008～2009年,对黄河炳灵水电站库区的浮游生物和鱼类资源进行了调查。浮游生物调查结果显示,该库区共调查到浮游植物2门9种属,生物量为0.7982mg·L^(-1),以硅藻门为优势种类;浮游动物4类10种,生物量为0.0164mg·L^(-1),以原生动物为优势种类。鱼类调查的结果显示,黄河炳灵水电站库区调查鱼类有12种,其中鲤形目10种,鲶形目1种。优势种类为黄河裸裂尻鱼、似鲶高原鳅、黄河鮈及兰州鲶。与1981年刘家峡水库的浮游生物和鱼类资源调查结果相比,浮游生物平均生物量下降,鱼类种类组成有所减少,部分鱼类已灭绝或濒临灭绝,且鱼类处于严重低龄化。

喉罩在腹腔镜阑尾切除术中的应用观察

目的观察腹腔镜阑尾切除术中应用喉罩通气对血流动力学、应激反应和通气功能的影响。方法选择50例需行腹腔镜阑尾切除术患者,随机分成喉罩通气组(A组)和气管插管组(B组),监测两组心率(HR)、血压(BP)、血氧饱和度(SpO2)、心电图(ECG)、呼气末二氧化碳(PetCO2)等,分别于麻醉诱导前、置入喉罩或气管导管时、置入后(1 min、3 min、5 min)、拔管时、拔管后5 min记录结果,用于对比。结果两组患者HR、SBP和DBP在诱导时无明显差异,在置入喉罩或气管导管时,HR和BP均出现上升,B组比A组明显,差异有统计学意义,在血氧饱和度和呼气末二氧化碳方面均无明显差异。结论在行腹腔镜阑尾切除术中应用喉罩操作简单,可明显减少病人的应激反应。