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丹参酮诱导HL-60细胞分化及凋亡的流式细胞术分析 被引量:61
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作者 黄韧敏 袁淑兰 +1 位作者 宋毅 黄光琦 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1997年第7期500-503,共4页
应用体外细胞培养及流式细胞仪技术,分析了丹参酮作用前后HL-60细胞的细胞周期分布、细胞增殖指数、p53、c-myc、c-fos及bc1-2基因产物的表达变化,并以全反式维甲酸为对照。结果表明:0.5μg.ml-1的丹参酮作用后,HL-60细胞... 应用体外细胞培养及流式细胞仪技术,分析了丹参酮作用前后HL-60细胞的细胞周期分布、细胞增殖指数、p53、c-myc、c-fos及bc1-2基因产物的表达变化,并以全反式维甲酸为对照。结果表明:0.5μg.ml-1的丹参酮作用后,HL-60细胞趋向粒细胞系统分化,有部分细胞发生凋亡(11.8%),丹参酮通过阻止HL-60细胞进入S期而抑制其DNA合成,其作用的分子机制与c-fos基因的表达增高、c-myc基因及bc1-2基因的表达降低有关,诱导分化与细胞凋亡的关系尚有待进一步探讨。 展开更多
关键词 白血病 丹参酮 诱导分化 细胞凋亡 流式细胞术
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丹参酮ⅡA诱导HL-60细胞凋亡 被引量:43
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作者 黄韧敏 袁淑兰 +1 位作者 宋毅 黄光琦 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第3期164-166,I000,共4页
目的:在以往对丹参酮IA诱导分化和抗癌作用研究的基础上,进一步研究丹参酮IA诱导HL-60细胞凋亡,以探讨其抗癌作用机理。方法:应用体外细胞培养技术,以1~10μg/ml丹参酮IA作用于培养的HL-60细胞5天后,进... 目的:在以往对丹参酮IA诱导分化和抗癌作用研究的基础上,进一步研究丹参酮IA诱导HL-60细胞凋亡,以探讨其抗癌作用机理。方法:应用体外细胞培养技术,以1~10μg/ml丹参酮IA作用于培养的HL-60细胞5天后,进行光镜、电镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪的观察和分析。结果:丹参酮ⅡA作用后,HL-60细胞的生长受到明显抑制,其半数抑制浓度IC50约为10μg/ml光镜、电镜观察到细胞呈现凋亡特征,琼脂糖凝胶电泳显示细胞DNA呈梯状降解,流式细胞仪分析表明,10μg/ml丹参酮ⅡA作用后,HL-60细胞凋亡率达28.8%,细胞被阻止于G0/G1期,S期细胞明显减少(P<0.01),其bcl-2基因的表达显著降低,而p53基因的表达增强(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA可诱导HL-60细胞凋亡,这可能为丹参酮ⅡA抗癌抑癌的重要机理之一,诱导分化与诱导凋亡之间的关系有待进一步探讨。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 细胞凋亡 白血病细胞 HL-60
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P^53基因及其产物的研究进展 被引量:2
3
作者 黄韧敏 《实用癌症杂志》 1995年第3期212-213,共2页
P ̄53基因及其产物的研究进展华西医科大学(成都市610044)黄韧敏综述黄光琦审阅肿瘤的发生是一个多基因、多步骤作用的过程,是正常细胞基因组发生多种损伤的过程,在此过程中,癌基因的激活与肿瘤抑制基因的缺失或失活共同... P ̄53基因及其产物的研究进展华西医科大学(成都市610044)黄韧敏综述黄光琦审阅肿瘤的发生是一个多基因、多步骤作用的过程,是正常细胞基因组发生多种损伤的过程,在此过程中,癌基因的激活与肿瘤抑制基因的缺失或失活共同参与癌变。近年来,肿瘤抑制基因已成... 展开更多
关键词 肿瘤 P53基因 研究进展
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丹参酮对人肝癌细胞某些表型的逆转作用 被引量:76
4
作者 袁淑兰 黄韧敏 +2 位作者 王修杰 宋毅 黄光琦 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期268-270,共3页
目的观察丹参酮促人肝癌细胞株在体外向正常方向分化的效果。方法体外培养的人肝癌细胞(SMMC┐7721)经0.5μg/ml丹参酮处理4天后,作光电镜观察,BrdU掺入试验,PCNA免疫组化及FCM检测。结果在镜下,细胞... 目的观察丹参酮促人肝癌细胞株在体外向正常方向分化的效果。方法体外培养的人肝癌细胞(SMMC┐7721)经0.5μg/ml丹参酮处理4天后,作光电镜观察,BrdU掺入试验,PCNA免疫组化及FCM检测。结果在镜下,细胞形态趋向良性分化,细胞生长明显被抑制;BrdU标记率和PCNA阳性率均明显低于对照组;流式细胞仪检测显示丹参酮处理组的细胞被阻止于G0/G1期,而S期细胞数量明显减少,c┐myc癌基因蛋白表达降低,c┐fos癌基因蛋白表达明显增加。结论丹参酮可诱导人肝癌细胞某些表型的逆转,可能是一种有前途的分化诱导剂。 展开更多
关键词 丹参酮 肝癌 逆转
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丹参酮体外诱导分化作用及其机制的研究 被引量:42
5
作者 袁淑兰 黄光琦 +1 位作者 黄韧敏 宋毅 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第6期408-409,414,共3页
本实验在体外细胞培养的基础上,通过细胞形态学、细胞增殖动力学、癌基因表达及裸鼠成瘤性的研究,观察丹参酮对人宫颈癌细胞株(ME180)的体外诱导分化作用(并以全反式维甲酸作对照)。结果表明:经无毒剂量的丹参酮和维甲酸处... 本实验在体外细胞培养的基础上,通过细胞形态学、细胞增殖动力学、癌基因表达及裸鼠成瘤性的研究,观察丹参酮对人宫颈癌细胞株(ME180)的体外诱导分化作用(并以全反式维甲酸作对照)。结果表明:经无毒剂量的丹参酮和维甲酸处理后,细胞形态趋向良性分化,生长减慢,集落形成率和3H-TdR掺入率明显降低;细胞RNA斑点杂交发现,其c-myc、Ha-ras癌基因表达明显降低;细胞在裸鼠身上的成瘤时间延缓;经统计学处理,丹参酮和维甲酸对ME180细胞均具有较好的诱导分化作用,其作用机制可能是对细胞基因表达的抑制。 展开更多
关键词 丹参酮 诱导分化 全反式维甲酸 宫颈癌细胞
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丹参酮ⅡA对HL-60细胞系体外诱导分化作用的研究 被引量:22
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作者 袁淑兰 黄韧敏 +3 位作者 宋毅 王修杰 黄光琦 羊裔明 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 1997年第6期253-256,共4页
从细胞形态和细胞增殖动力学进行研究发现,0.5μg/ml丹参酮ⅡA可诱导58%的HL-60细胞向中性粒细胞分化。其中,中晚幼粒46%,杆状及分叶核12%;细胞生长被明显抑制;Brdu标记李及PCNA阳性率分别为19.7%和30.3%均明显低于对照组... 从细胞形态和细胞增殖动力学进行研究发现,0.5μg/ml丹参酮ⅡA可诱导58%的HL-60细胞向中性粒细胞分化。其中,中晚幼粒46%,杆状及分叶核12%;细胞生长被明显抑制;Brdu标记李及PCNA阳性率分别为19.7%和30.3%均明显低于对照组,而与维甲酸组无差异;流式细胞仪检测发现,药物处理组细胞被阻止于G0/G1期,而S用细胞数明显减少,增殖指数降低,c-myc癌基因蛋白表达降低,c-fos癌基因蛋白表达明显增加。结果显示.丹参酮ⅡA可能通过影响它基因表达及DNA多策酶活性、抑制细胞DNA合成,从而抑制细胞增殖,诱导细胞分化。 展开更多
关键词 丹参酮ⅠA HL-60细胞系 诱导分化 白血病
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细胞RNA原位杂交在细胞诱导分化中的应用
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作者 袁淑兰 黄韧敏 +1 位作者 宋毅 黄光琦 《四川肿瘤防治》 1996年第2期5-6,共2页
应用细胞RNA原位杂交方法,结合生物素标记及检测系统,研究维甲酸诱导人宫颈癌细胞分化前后基因表达的改变,结果显示:人宫颈癌细胞经全反式维甲酸诱导后,C─myc、Ha—rasmRNA表达明显降低。本文认为,RNA细胞原... 应用细胞RNA原位杂交方法,结合生物素标记及检测系统,研究维甲酸诱导人宫颈癌细胞分化前后基因表达的改变,结果显示:人宫颈癌细胞经全反式维甲酸诱导后,C─myc、Ha—rasmRNA表达明显降低。本文认为,RNA细胞原位杂交方法简便易行(不需提取mRNA),且快速、灵敏,结果可靠,为研究细胞诱导分化前后基因表达变化的良好方法。 展开更多
关键词 细胞RND 原位杂交 宫颈癌细胞 诱导分化 维甲酸
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Brdu和PCNA标记观察丹参酮对癌细胞增殖的影响 被引量:27
8
作者 王修杰 袁淑兰 +1 位作者 黄韧敏 宋毅 《华西医科大学学报》 CSCD 1996年第4期388-391,共4页
为了解丹参酮的抗癌作用并探索其机理,用丹参酮处理人肝癌细胞株和白血病细胞株,Brdu掺入标记和PCNA免疫组化染色检测癌细胞增殖动力学指标。结果:丹参酮处理人肝癌细胞和白血病细胞株后,Brdu标记率分别为8.95%,... 为了解丹参酮的抗癌作用并探索其机理,用丹参酮处理人肝癌细胞株和白血病细胞株,Brdu掺入标记和PCNA免疫组化染色检测癌细胞增殖动力学指标。结果:丹参酮处理人肝癌细胞和白血病细胞株后,Brdu标记率分别为8.95%,19.01%,均显著低于对照组(28.0%,25.57%,P<0.01);PCNA阳性率分别为57.0%,30.32%,均显著低于对照组(74.3%,47.05%,P<0.01)。结果表明,Brdu标记和PCNA检测在研究肿瘤细胞增殖及影响因素等方面有重要应用价值,丹参酮抑制癌细胞增殖与抑制癌细胞DNA合成、PCNA表达及DNA多聚酶δ活性等有关。 展开更多
关键词 丹参酮 抗癌作用 BRDU标记 增殖细胞核抗原
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肿瘤抑制基因p53及Rb在鼻咽癌中的表达 被引量:5
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作者 宋毅 王炼 +3 位作者 黄光琦 黄韧敏 袁淑兰 刘永惠 《华西医科大学学报》 CSCD 1997年第3期268-271,共4页
为观察p53基因和Rb基因与鼻咽癌发生的关系,应用聚合酶链反应-单链构型多态分析技术(PCR-SSCP技术),检测33例鼻咽癌组织、4例鼻咽部炎性组织及3例正常鼻咽部组织中p53基因第7,8外显子的突变。结果显示,在... 为观察p53基因和Rb基因与鼻咽癌发生的关系,应用聚合酶链反应-单链构型多态分析技术(PCR-SSCP技术),检测33例鼻咽癌组织、4例鼻咽部炎性组织及3例正常鼻咽部组织中p53基因第7,8外显子的突变。结果显示,在33例鼻咽癌中有7例存在p53基因第8外显子的突变,突变率为21.2%。在第7外显子中未检测出突变发生。应用Southern印迹杂交,对Rb基因在鼻咽癌中存在状态进行研究。结果表明,在13例鼻咽癌组织中有11例鼻咽癌组织有Rb基因的缺失或明显减弱,提示p53基因突变及Rb基因的缺失而导致的基因失活与鼻咽癌的发生有密切关系。 展开更多
关键词 P53基因 RB基因 鼻咽肿瘤 抑制基因
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A PRELIMINARY STUDY OF THE ANTI-CANCER EFFECT OF TANSHINONE ON HEPATIC CANCER AND ITS MECHANISM OF ACTION IN MICE 被引量:3
10
作者 王修杰 袁淑兰 +2 位作者 王朝俊 黄韧敏 李玉琼 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1998年第2期24-27,共4页
Objective: There were some experimental researches in vitro, which showed that tanshinonoe (Tan) had cytotoxic activities against some cancer cell lines. But there was no report of anticancer activity of Tan in vivo. ... Objective: There were some experimental researches in vitro, which showed that tanshinonoe (Tan) had cytotoxic activities against some cancer cell lines. But there was no report of anticancer activity of Tan in vivo. This experimental study was performed to confirm the anticancer activity of Tan in vivo. Methods: Hepatic carcinoma H22 bearing mice were treated with DMSO, 5Fu, and Tan, at the end of experiment, the mice were sacrificed, tumor tissues were separated and weighed, and the tumor inhibitory rate was calculated, 3 times of the same experiments were performed. The proliferating kinetics of hepatic carcinoma H22 cells in mice was measured by bromodeoxyuridine labeling in vivo and immunohistochemical staining of the proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in tumor tissues. Results: The tumor inhibitory rates of Tan were 50.0%, 38.5%, and 40.6% in 3 experiments, respectively, compared with those of the DMSOtreated control groups, the differences were significant statistically (P<0.01). The Brdu labeling and PCNA positive cells were 51.8±7.9 and 451.1±26.1, respectively, which were significantly lower than those of controls (84.4±24.3, 694.8±117.1) (P<0.01). Conclusion: Tan had anticancer effect on hepatic carcinoma in vivo; The mechanisms of action might be associated with inhibition of DNA synthesis, PCNA expression and DNA polymerase δ activity of tumor cells. 展开更多
关键词 TANSHINONE Anticancer effect HEPATIC
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人宫颈癌多基因致癌机理的研究 被引量:2
11
作者 黄光琦 肖兴斌 +1 位作者 黄一峰 黄韧敏 《华西医科大学学报》 CSCD 1996年第1期5-9,共5页
应用核酸分子杂交、PCR、PCR-ASO杂交等技术,对人宫颈癌中Ha-ras等三种癌基因、HPV16病毒基因及P53、Rb抑癌基因等多基因变化及其致癌机理进行了研究。结果表明:①宫颈癌中存在Ha-ras第12位密码子... 应用核酸分子杂交、PCR、PCR-ASO杂交等技术,对人宫颈癌中Ha-ras等三种癌基因、HPV16病毒基因及P53、Rb抑癌基因等多基因变化及其致癌机理进行了研究。结果表明:①宫颈癌中存在Ha-ras第12位密码子G→T点突变,突变率为18.2%(8/44),并有Ha-ras基因扩增,扩增率为45%(9/20);②c-erbB2基因在宫颈癌中的扩增率为73.3%(11/15),5例伴有重排;③c-myc基因在宫颈癌中的扩增率为91.7%(11/12);④HPV16E6/E7为引物的PCR检测结果,宫颈癌中的阳性率为80.5%(33/41);⑤12例宫颈癌中未发现P58、Rb基因缺失。上述多基因致癌机理的研究表明,人宫颈癌中Ha-ras、c-myc、c-erbB2经点突变、扩增、重排而被激活,在癌变中起着协同致癌作用。HPV16基因的整合可能启动c-myc,为癌变的起始因素,而Ha-ras、c-erbB2的基因改变可能为中、晚期事件,抑癌基因P53、Rb的作用尚需进一步研究。 展开更多
关键词 宫颈癌 癌基因 病毒癌基因 抑癌基因 致癌机理
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THE DIFFERENTIATION INDUCING EFFECT OF TANSHINONE AND RETINOIC ACID ON HUMAN CERVICAL CARCINOMA CELL LINE(ME180) IN VITRO 被引量:1
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作者 袁淑兰 黄光琦 +3 位作者 王修杰 周宏远 黄韧敏 宋毅 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1996年第4期244-248,共5页
The cervical carcinoma cell line, ME180 cells were treated with tanshinone (Tan) or retinoic acid (RA) in DMSO (final concentration 0.02%, V/V) on 4 successive days. The cells treated with the same concentration of DM... The cervical carcinoma cell line, ME180 cells were treated with tanshinone (Tan) or retinoic acid (RA) in DMSO (final concentration 0.02%, V/V) on 4 successive days. The cells treated with the same concentration of DMSO alone served as control. Morphological studies with light and transmission electron microscopy showed that the cells treated with both Tan and RA became welldifferentiated. The cellular growth and proliferation were suppressed (as revealed by cell counting. [3H]-thymidine uptake and colony-forming assay). The number of nuclear organizer regions(AgNORs) in cells reduced and the distribution type returned nearly to normal type. The tumorigenicity in nude mice was reduced. The cell RNA dot hybridization showed that the expression of c-myc and c-Ha-ras mRNA was inhibited markedly. All above results showed that Tan and RA could reverse some malignant Phenotype and possessed differentiation inducing activity on ME180 cell line. No significant difference was observed between the cells treated with Tan and RA. 展开更多
关键词 Tanshinone All trans retinoic acid Cervical carcinoma cell line Inducing-differentiation
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Rb基因在鼻咽癌中存在状态的研究 被引量:2
13
作者 黄光琦 宋毅 黄韧敏 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期75-77,共3页
首次应用生物素-14-dUTP标记Rb3.8kb探针,结合亲合素-碱性磷酸酶发光及自显影法,对Rb基因在鼻咽癌中存在状态进行了研究。杂交结果表明,3例正常胎儿鼻咽组织出现分子量为12.8、10.2、8.0、6.2、5... 首次应用生物素-14-dUTP标记Rb3.8kb探针,结合亲合素-碱性磷酸酶发光及自显影法,对Rb基因在鼻咽癌中存在状态进行了研究。杂交结果表明,3例正常胎儿鼻咽组织出现分子量为12.8、10.2、8.0、6.2、5.6、5.2及4.8kb的7条杂文区带,11例鼻咽癌组织均发现有Rb基因缺失或失活,其中4例为5.6kb片段缺失,4例为4.8kb缺失并有2例伴5.6kb减弱,2例为10.2kb缺失,1例为5.6及5.2kb片段显著减弱,说明在上述11例鼻咽癌中均有Rb基因的改变。这种高频率的异常变化,提示Rb基因的缺失或失活,与鼻咽癌的发生有密切关系。 展开更多
关键词 RB基因 鼻咽肿瘤 基因缺失 检测
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