弓背青鳉3种雌激素受体基因的克隆及其表达分析

【目的】克隆弓背青鳉(Oryzias curvinotus)雌激素受体基因(Estrogen receptor, er),分析在组织、胚胎发育时期中表达特征和雌二醇暴露后表达响应,为探究er介导雌激素调控机制提供理论依据。【方法】通过弓背青鳉肝脏转录组数据筛选进行er序列扩增,实时定量PCR(RT-q PCR)检测不同组织、不同胚胎发育时期和雌二醇暴露后的er表达量。【结果】3种ocuerα/erβ1/erβ2的编码区序列分别为1 860 bp、1 689 bp和2 007 bp,编码氨基酸个数相应为619、562和688。定量结果显示,3种er主要在肝脏和性腺高表达。胚胎发育过程中,ocuerα在卵裂期至囊胚期表达量低,在囊胚期后表达量逐渐上升持续到孵化;2种ocuerβ亚型均在胚胎发育初期有较高表达,随后ocuerβ1在原肠胚后开始降低,ocuerβ2在囊胚期后开始降低,在器官发育后期表达量均逐渐上升直至孵化。弓背青鳉仔鱼雌二醇暴露结果显示,各浓度雌二醇暴露均能使ocuerα和弓背青鳉卵黄蛋白基因(Vitellogenin,vtg)表达量上升,ocuerβ1仅在20μg/L上调,ocuerβ2表达量下调。【结论】ocuer不同亚型在介导雌激素调控中起着重要作用。

弓背青鳉的胚胎发育及自发荧光观察

【目的】研究弓背青鳉(Oryziascurvinotus)胚胎各阶段的发育特点,观察其自发荧光。【方法】使用正置荧光显微镜对弓背青鳉受精到孵化出膜过程进行连续观察。【结果】弓背青鳉胚胎发育历时10～12d,发育过程分为受精卵激活期、受精卵胚盘形成期、卵裂期、囊胚期、原肠胚期、神经胚期、器官形成期及孵化出膜期共8个时期;根据各时期胚盘形成、体节数量、器官发生、胚体大小和运动等特征的变化,进一步细分为35个阶段。其自发荧光主要开始出现于12肌节期,由虹彩细胞团内的物质在激发光下产生,主要分布于脑与脊索背面的皮肤表层。

一种快速鉴定弓背青鳉遗传性别的方法

【目的】研究快速鉴定弓背青鳉遗传性别的方法。【方法】以中国南海沿岸弓背青鳉群体为对象提取基因组DNA,根据基因组数据设计性别特异引物Ocsex-F/Ocsex-R,通过PCR方法对弓背青鳉遗传性别进行鉴定。【结果】引物Ocsex-F/Ocsex-R在雄性DNA中扩增获得959 bp和656 bp的两个DNA条带,在雌鱼中仅可扩增出959 bp的单一条带,PCR产物经电泳可清晰分辨;对汕头、湛江、钦州、文昌等南海沿岸的地理群体扩增结果一致。【结论】Ocsex-F/Ocsex-R引物可对弓背青鳉进行遗传性别鉴定,在南海沿岸不同群体中具有稳定性和通用性,可广泛用于弓背青鳉遗传性别鉴定。

一种实用型虾虎鱼类捕获装置的设计

根据虾虎鱼类的特殊生物习性,利用防腐蚀的亚克力塑料材质制作一种漏斗式圆台虾虎鱼捕获装置。该装置可与传统的捕捉方式比较具有明显的高效性、普适性,对滩涂原生态环境的破坏力度较低,而由于亚克力材质成本相对较高,从而导致无法广泛应用于我国东南沿海的渔业生产中来,仅适应于无经验的科研工作者科研样本采集,很好地限制了虾虎鱼类的捕捉数量,保护了野生虾虎鱼类种质资源不被过渡捕捉,维护了海陆交界处的滩涂、河口和红树林等生态系统平衡。

石家庄新型冠状病毒肺炎疫情新型冠状病毒分子流行病学特征

目的从分子层面分析石家庄新型冠状病毒的流行病学特征,揭示此次传播链的源头,为新型冠状病毒肺炎疫情防控提供科学依据。方法收集2021年1月2—8日来自石家庄市第五医院170例新型冠状病毒感染者共计404份新型冠状病毒核酸阳性样本,采用多重聚合酶链反应靶向测序技术对样本进行深度测序获得病毒一致性序列。采用PANGOLIN分类系统对170个毒株序列进行分析,采用T-test对数据进行统计学分析。结果在404份新型冠状病毒核酸阳性样本中,356份获得病毒的全长基因组序列(>95%,100×测序深度),剔除重复取样,得到170株全基因组序列,所有样本均属于B.1.1分支。病毒突变数18~22个,大部分突变不改变氨基酸信息。根据基因组突变个数和种类,所有毒株分为48个亚型,其中2个毒株占主导(分别为66株和31株)。结论本研究中所有新型冠状病毒肺炎患者来自单一源头的境外输入性病例,病毒在社区隐匿传播了一段时间,并且在传播的过程中发生了变异。