天津城建大学生售楼实训中心创建与运营

大学生创新创业训练项目(以下简称"大创项目")旨在提高大学生在新形势下的创新能力和实践本领,进而提高大学生在社会中的创新力和竞争力。文章介绍了作者自身正在辅导运营的大创项目的背景、工作基础、研究内容、运营目标及成果管理。并对项目的创新点、运营特点和注意事项进行了阐述。就项目对大学生能力培养所发挥的作用和遇到的问题做出了总结。

原核表达抗伏马菌素单链抗体的条件优化

单链抗体可溶性大量表达是其生产应用的前提条件,本研究通过基因工程操作构建含有抗伏马菌素单链抗体基因H3的重组载体p HENHi-H3,转化大肠杆菌XL1-Blue,酶联免疫吸附实验检测不同的诱导温度、IPTG浓度和诱导时间对H3抗体的表达影响。优化后的单链抗体H3的原核表达条件为:菌液培养至OD600达到0.5时加入终浓度为0.1 mmol/L IPTG,30℃诱导表达8 h。本研究通过对蛋白原核表达的主要影响因素进行优化,能够显著提高H3抗体的原核可溶性表达效率。

连接肽长度对单链抗体与小分子半抗原结合力的影响

为了分析单链抗体的连接肽长度对其与小分子半抗原结合力的影响,本研究以含(G_4S)_3连接肽的伏马菌素特异单链抗体基因H2为模板,PCR扩增获得含G_4S和(G_4S)_2连接肽的单链抗体编码基因,分别命名为H2-5和H2-10,通过基因工程操作构建到p HENHi载体中,转化大肠杆菌XL1-Blue进行原核表达,纯化后利用ELISA检测单链抗体的亲和力。结果显示含不同长度连接肽的单链抗体均能在大肠杆菌中可溶性表达,单链抗体结合力与连接肽长度的关系为(G_4S)_3>G_4S>(G_4S)_2,即单链抗体H2与其抗原伏马菌素的亲和力最高,其次为H2-5和H2-10抗体。因此,含有较长连接肽的单链抗体能够自身折叠形成有活性的蛋白,并表现出与小分子半抗原更强的结合能力。