薯蓣皂苷通过GSK3β/Nrf2/HO-1通路改善尿酸诱导的HK-2细胞氧化应激损伤的作用及机制研究

目的探讨薯蓣皂苷(dioscin)对尿酸(uric acid,UA)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)氧化应激损伤的影响及分子机制。方法将HK-2细胞分为正常组、模型组(尿酸刺激造模)、条件对照组(尿酸+DMSO)和薯蓣皂苷组(尿酸+薯蓣皂苷)。通过尿酸诱导HK-2细胞氧化应激损伤模型;采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞技术检测细胞活性氧(ROS)水平,Real-time PCR法检测糖原合成激酶3(GSK3β)、核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)在mRNA水平的表达,Western Blot法检测GSK3β、磷酸化糖原合成激酶3(p-GSK3β)、Nrf2及HO-1在蛋白水平的表达。结果经尿酸刺激后,HK-2细胞的活力明显下降,ROS水平明显升高(均P<0.001)。经薯蓣皂苷治疗后,HK-2细胞的活力增加,ROS水平明显降低(均P<0.001)。在蛋白及mRNA水平上,尿酸刺激后Nrf2和HO-1的表达均下降,薯蓣皂苷干预后Nrf2和HO-1表达均明显增加(均P<0.001)。在蛋白水平上,模型组细胞p-GSK3β/GSK3β比值较正常组明显下降,经薯蓣皂苷干预后p-GSK3β/GSK3β比值升高(均P<0.001)。结论薯蓣皂苷可能是通过促进GSK3β的磷酸化,激活Nrf2/HO-1通路,从而缓解尿酸诱导的HK-2细胞氧化应激损伤。

肠源性氧化三甲胺与胰岛素抵抗的研究进展

肠源性氧化三甲胺(Enterogenic trimethylamine oxide,TMAO)已经成为当今心血管学者研究的热门方向,研究发现,降低TMAO水平可以一定程度的逆转心脑血管疾病的发生[1]。TMAO经由调理肠道菌群紊乱,从而达到改善炎症,胰岛素抵抗等代谢性疾病的重要作用,但是关于TMAO与各种疾病产生的病理生理机制的综述仍旧缺少。而其与2型糖尿病、胰岛素抵抗的相关性研究进展少有报道,那么,TMAO是否参与介导了胰岛素抵抗的发生发展过程及其相关通路,以及TMAO及其代谢产物对肝脏及胰脏的影响,对2型糖尿病作用及其机制分析,笔者在此做一综述,为未来研究TMAO对胰岛素抵抗的作用提供理论依据和科学基础。

丹参酮ⅡA对尿酸诱导的肾小管上皮细胞纤维化模型线粒体损伤和相关炎症因子的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA对尿酸诱导肾小管上皮细胞(HK-2)纤维化模型的保护作用并分析其作用机制。方法:制备尿酸溶液诱导的HK-2细胞纤维化模型,实验分为正常对照组、模型组、DMSO对照组及丹参酮ⅡA组。CCK-8法检测HK-2细胞增殖,流式细胞术检测HK-2细胞凋亡,ELISA检测IL-1、IL-6、IL-8、TGF-β水平,Western Blot检测线粒体损伤相关蛋白DRP1、p-DRP1(S616)、p-DRP1(S637)、OPA1蛋白表达,线粒体荧光探针观察线粒体形态。结果:丹参酮Ⅱ_(A)可抑制HK-2细胞纤维化模型的线粒体损伤与炎症反应。与正常对照组比较,模型组细胞增殖率显著降低,IL-1、IL-6、IL-8、TGF-β水平及总凋亡率和DRP1、p-DRP1(S616)蛋白表达显著升高,p-DRP1(S637)、OPA1蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,丹参酮ⅡA组的增殖情况有显著改善,IL-1、IL-6、IL-8、TGF-β水平及总凋亡率和DRP1、p-DRP1(S616)蛋白表达显著降低,p-DRP1(S637)、OPA1蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01),线粒体得到保护。结论:丹参酮ⅡA可通过抑制线粒体损伤及炎症改善尿酸诱导的HK-2细胞纤维化。

丹参酮Ⅱ_(A)对尿酸诱导的HK-2细胞凋亡及肾小管上皮细胞-间充质转分化的影响

目的:探讨尿酸诱导HK-2细胞纤维化后丹参酮Ⅱ_(A)对细胞增殖、凋亡及肾小管上皮细胞-间充质转分化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)的影响。方法:体外培养HK-2细胞,分为4组:正常对照组、模型组、DMSO组、丹参酮Ⅱ_(A)组。观察各组细胞形态,并用CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,免疫荧光及Western Blot检测各组EMT标志性蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果:与正常对照组比较,模型组及DMSO组细胞形态发生明显改变,细胞活力显著降低,细胞凋亡比例显著升高,E-cadherin蛋白表达显著降低,α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组及DMSO组比较,丹参酮Ⅱ_(A)组细胞形态得到明显改善,细胞活力显著增强,细胞凋亡比例显著降低,E-cadherin蛋白表达显著升高,α-SMA蛋白表达显著降低(P<0.05);模型组与DMSO组比较各项检测指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丹参酮Ⅱ_(A)能抑制尿酸的诱导HK-2细胞凋亡,并通过上调E-cadherin的表达,下调α-SMA的表达,缓解尿酸的诱导HK-2细胞EMT,从而起到抗肾纤维化的作用。

中医药干预肠道菌群防治阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种发病原因和发病机制均未明确的中枢神经系统退行性疾病,目前全球范围内尚缺乏有效的防治手段。近年来肠道菌群在维护宿主健康中发挥的作用逐渐引起人们的重视,越来越多的证据表明肠道菌群失调与AD的认知障碍和发病机制相关,且通过调控肠道菌群防治AD已成为AD实验研究和临床治疗的热点。中医药在防治AD方面发挥的作用不容忽视,一些中药有效成分和中药复方被证实具有调节肠道菌群和改善AD症状的作用,有望为AD的科学防治提供新的方向。

加味苓桂术甘汤联合限食对脾虚痰湿型糖尿病脑病大鼠海马组织PI3K/Akt/mTOR通路的影响

目的:研究加味苓桂术甘汤联合限食对脾虚痰湿型糖尿病脑病(DE)大鼠海马组织PI3K/Akt/mTOR通路的影响。方法:建立脾虚痰湿型糖尿病脑病大鼠模型,将大鼠随机分为正常对照组、DE组、脾虚痰湿DE组、限食组、加味苓桂术甘汤组、加味苓桂术甘汤联合限食组和二甲双胍组,药物干预4 w。给药后测量体质量、空腹血糖、血脂;Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;Western blot检测各组海马组织PI3K、Akt、mTOR蛋白表达。结果:加味苓桂术甘汤联合限食可显著降低脾虚痰湿型糖尿病脑病大鼠体质量、空腹血糖、血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平(P<0.05或P<0.01);改善Morris水迷宫实验成绩(P<0.05);升高海马组织PI3K、Akt蛋白表达(P<0.01),降低mTOR蛋白表达(P<0.01)。结论:加味苓桂术甘汤联合限食能改善脾虚痰湿型糖尿病脑病大鼠糖脂代谢,增强学习记忆能力,其机制可能与调节PI3K/Akt/mTOR通路有关。

健脾化湿方对脾虚痰湿型肥胖2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠脂肪因子的影响

目的:研究健脾化湿方对脾虚痰湿型肥胖2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗大鼠脂肪因子的影响。方法:建立脾虚痰湿型肥胖T2DM胰岛素抵抗大鼠模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、S模型组、二甲双胍组及健脾化湿方低、中、高剂量组。药物干预4 w,治疗后测量体质量及内脏脂肪;检测大鼠空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);检测血脂水平,包括总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和游离脂肪酸(FFA);检测脂肪因子水平,包括瘦素(Leptin)、脂联素(Adiponectin)、抵抗素(Resistin)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)。结果:健脾化湿方可显著降低脾虚痰湿型肥胖T2DM胰岛素抵抗大鼠体质量、内脏脂肪、FBG、FINS、HOMA-IR及血清TC、TG、LDL-C、FFA,升高ISI;降低血浆Leptin、Resistin、TNF-α、IL-6,升高Adiponectin,且以高剂量效果最佳(P<0.05或P<0.01)。结论:健脾化湿方可通过良性调节脂肪因子改善脾虚痰湿型肥胖T2DM胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢。

以凹土为载体的新型益生菌制剂的制备

以提纯凹土作为益生菌载体，研究了不同吸附条件对嗜酸乳杆菌、粪链球菌和保加利亚乳杆菌吸附率的影响。结果表明，将10mL菌体（菌悬液浓度为10^9CFU／mL）与3mL凹土（34．08mg／mL）混合，在pH6．5，35℃吸附40min，三种菌体的最大吸附率分别为89．08％、84．24％和89．42％。吸附后经冷冻干燥制备新型益生菌制剂，嗜酸乳杆菌、粪链球菌和保加利亚乳杆菌活菌数可达2．98×10^9、4．33×10^9和6．21×10^9CFU／g，存活率分别为95．1％、92．2％和95．9％。新型益生菌制剂在人工模拟肠胃环境下释放嗜酸乳杆菌、粪链球菌和保加利亚乳杆菌的活菌数分别在肠环境下4、6和4h达到最大，并且在3-15h内均能维持在10^8-10^9CFU／g之间。

中药单体及提取物的神经保护作用：Nrf2信号通路研究进展

背景:大量数据表明中药单体具有神经保护作用,可以提高脑神经系统损伤患者生活质量。Nrf信号通路在出血性与缺血性卒中具有神经保护作用,它是通过无毒的天然或合成的中药发挥神经系统修复作用,但是目前很少对这方面中药进行系统报道。目的:从Nrf2信号通路的角度对脑卒中后神经损伤发挥作用的中医单体进行综述。方法:第一作者计算机检索中国知网,维普,MEDLINE和Pub Med数据库。检索词是:"Nrf2、ARE、脑卒中、中药、神经保护"和"Nrf2,ARE,Stroke,Traditional Chinese Medicine,Neuroprotection"。检索语言设置为中文和英文。探讨Nrf2和神经保护的研究进展及中药单体的脑卒中后神经保护作用。结果与结论:共检索到85文章,根据纳入和排除标准,对文献进行筛选,最终共纳入46篇。结果表明,多种中药单体可以通过Nrf2通路发挥神经保护作用。中药单体研究涉及有机酸、酚类、皂甙、黄酮类、萜类、生物碱类和其他单一或复合成分。中药对脑卒中后神经损伤有明确修复作用,但此类中药缺乏规律性,它仍然需要扩大数据和进一步的研究作为基础。

阿尔茨海默病动物模型的研究进展

目前阿尔茨海默病(AD)已成为威胁老年人身心健康的主要疾病,但该病的发病机制仍未完全明确,治疗手段也十分有限,其主要原因之一是目前缺乏理想的AD动物模型。目前AD动物模型主要分为β淀粉样蛋白沉积型、衰老型、脑缺血型、转基因型、链脲佐菌素型等。该文就AD动物模型的现状,双侧颈动脉结扎模型及环境因素模型的研究进展予以综述。

失眠患者中医从肝论治临床疗效观察

目的:观察从肝论治失眠患者的临床疗效及其对血脂的影响。方法:通过对中山大学附属第一医院东院中医科门诊38例患者运用疏肝中药后的疗效评价,以及运用中药后血脂的改变情况,评估从肝论治对失眠的临床疗效,以及从肝论治失眠对患者血脂如甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),低密度脂蛋白(LDL-C),高密度脂蛋白(HDL-C)的改善情况。结果:38例失眠症合并高脂血症患者中,使用龙胆泻肝汤组治疗有效率84.6%,使用柴胡疏肝散组治疗有效率91.6%,患者血脂较前明显降低(P<0.05)。结论:从肝论治失眠症理论具有科学性及可行性。

禁食疗法联合低热量代餐包改善代谢综合征患者心血管危险因素的临床随机对照研究

目的:观察禁食疗法联合低热量代餐包(肥胖症全营养配方食品)对代谢综合征患者心血管危险因素的影响。方法:2014年6月至2015年1月招募中山大学附属第一医院符合2009年美国国家胆固醇教育计划(NCEP-ATPIII)诊断标准的代谢综合征患者40例,随机分成对照组(CT组)和低热量代餐组(LMP组),两组均完成标准禁食疗法,而后3个月两组患者恢复饮食,LMP组患者晚餐进食毕思喜代餐,CT组健康饮食。禁食前后及恢复饮食3月后测定体质量、腰臀比、血压、心率、血糖、胰岛素、血脂、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及血尿酸(UA)等指标。结果:禁食疗法可有效降低两组患者体质量、腰臀比、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及三酯甘油(TG)水平,差异具有统计学意义(P<0.05),但两组患者的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、脂蛋白a[Lp(a)]、UA及hs-CRP水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。恢复饮食3月后,CT组患者体质量虽未见反弹,UA及hs-CRP可恢复至禁食前水平,但HOMA-IR较禁食后反弹明显,差异具有统计学意义(P<0.05),且LDL-C下降不明显。3月后LMP组患者体质量、收缩压较CT组显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05);总胆固醇(TC)、TG、LDL-C水平亦比CT组显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05),而且LMP组HOMA-IR未见反弹。另外,3月后LMP组UA及hs-CRP水平明显低于CT组水平,差异具有统计学意义(P<0.05),而且明显低于禁食前水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:禁食疗法后使用低热量代餐包3月能够促进体质量继续下降,进一步改善胰岛素抵抗,降低血脂、hs-CRP和UA,具有显著改善心血管危险因素的作用。

论王统照早期小说对艺术的直觉性

王统照是中国现代文学史上著名的小说家,他早期写的有关“爱”与“美”的小说价值在评论界早已认可,但从艺术的直觉性来分析其早期小说却寥寥无几。其实王统照在早期凭着自己一时的直觉,所写的这些珍贵的作品,从西方理论家“直觉”的角度来分析,有着独特的价值所在,这就是小说所具有的审美情愫和审美特质。

鲁迅与王统照比较研究

鲁迅与王统照同是中国现代文学史上的著名作家,比较两人的经历和著作,可以发现,当时内忧外患的国情影响了他们的家族命运和人生道路,地域文化的不同形成了他们人格气质的差异,两人在写作上也因此呈现出不同的创作内涵和创作姿态。

中医禁食疗法专家共识(征求意见稿)2019年第1版

2016年,我国发布了“健康中国2030”规划纲要,将健康中国上升为国家战略,从以疾病治疗干预为中心转变为以人民健康为中心,重点提出以“治未病”理念为主的多种慢性疾病的前期预防控制措施。近30年来,人民生活水平不断提高,物质生活极大丰富,与之相伴的因体重超标导致的肥胖、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、冠心病、高血压、高血脂、糖尿病等慢性疾病发病率逐年上升。《国民营养计划(2017-2030年)》提出广泛开展以“三减三健”为重点的专项行动,保持健康体重能够提前防控多种慢性疾病。目前国内外多项临床和实验研究结果显示,禁食疗法对超重/肥胖、脂肪性肝病、2型糖尿病、动脉粥样硬化性疾病、高脂血症、高血压病和高尿酸血症等代谢性疾病有显著的治疗作用。

“生本课堂”中教师角色的转变

＂生本课堂＂注重的是＂以生为本＂,通过教师角色的转变营造出和谐的人文课堂环境,让学生自由探究和交流,从而调动起学生学习的积极性,使＂讲堂＂变成了＂学堂＂,学生由＂学会＂变成了＂会学＂,课堂真正成为师生共同成长的舞台。

引领学生主动进行知识建构的途径

最近，在我校青年教师优课评比中，有一位青年教师执教《时、分的认识》，教学“分”时，提问学生：“一分钟有多长呢？”学生举手回答“1分钟有钟面那么长”“1分钟有人的脸那么长”……老师一下子懵了，不知如何处理才好。

多光纤点光源干涉法制作光子晶体的研究

利用多光纤点光源全息干涉法对四光纤(4+1)和五光纤(5+1)的干涉场进行理论模拟和实验测量,并比较了中心光束对整个干涉场的影响,研究表明中心光束只对干涉场对比度有影响,而不影响干涉晶格结构。同时给出了多光纤干涉的实验结果,从实验结果看出,实验和理论有比较好的一致性。并且设计了四根光纤干涉形成的渐变型光子晶体结构,对其光场的分束和聚焦作用进行了理论模拟。本文的研究为制作渐变型光子晶体分束器和聚焦透镜提供了很好的理论和实验依据。

补肾化痰祛瘀汤的神经保护作用及其机制探究

目的:观察补肾化痰祛瘀汤对外源性神经毒性物质丙烯醛所诱导的SD大鼠神经毒性模型及HT22海马神经元毒性模型的神经保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法:(1)体内实验。将SD大鼠随机分为空白对照组、中药对照组、丙烯醛模型组、中药治疗组、多奈哌齐治疗组,并给予相应药物灌胃。采用Morris水迷宫观察各组大鼠学习记忆功能,HE染色法观察大鼠海马CA1区神经元病理改变,Western blotting法检测各组大鼠海马组织中BDNF、TrkB、APP、ADAM10蛋白表达水平。(2)体外实验。体外培养HT22细胞,将HT22细胞随机分为空白对照组、模型组、2%中药组、3%中药组、5%中药组、10%中药组、多奈哌齐组,空白对照组和模型组加入空白血清,给药组加入含药血清1 h后,加入25μmol/L丙烯醛,24 h后采用MTT法检测各组细胞相对存活率。采用Western blotting法检测HT22细胞中BDNF、TrkB、APP、ADAM10蛋白表达水平。结果:(1)体内实验。与空白对照组比较,丙烯醛模型组大鼠穿越平台次数明显减少(P<0.01),航行时间明显延长(P<0.01);海马CA1区神经元损害更为严重;同时海马组织中BDNF、TrkB、ADAM10蛋白相对表达量均明显降低(P<0.01),APP蛋白相对表达量明显升高(P<0.01)。与丙烯醛模型组比较,中药治疗组大鼠的平台穿越次数均明显增加(P<0.05),航行时间明显缩短(P<0.01);海马CA1区神经元形态明显改善;同时海马组织中BDNF、TrkB、ADAM10蛋白相对表达量均明显升高(P<0.05),APP蛋白相对表达量明显降低(P<0.05)。(2)体外实验。与空白对照组比较,除10%中药组细胞存活率明显降低(P<0.01)外,2%、3%、5%中药及10μmol/L多奈哌齐均可促进细胞增殖;与模型组比较,5%中药组和多奈哌齐组均可明显改善HT22细胞活力(P<0.01),同时提高细胞中BDNF、TrkB、ADAM10蛋白相对表达量(P<0.01),降低APP蛋白相对表达量(P<0.05)。体外实验结果与和体内实验结果类似。结论:补肾化痰祛瘀汤可以改善丙烯醛诱导的SD大鼠学习记忆能力损害和海马CA1区神经元的病理改变,提高丙烯醛诱导的HT22神经元毒性模型的细胞存活率,提示其可对抗丙烯醛的神经毒性,具有神经保护作用,且其机制可能与激活BDNF/TrkB通路、增加ADAM10、减少APP水平有关。

阴离子表面活性剂作为添加剂种子生长法制备尺寸可调的单分散金纳米棒

以不同阴离子表面活性剂作为添加剂种子生长法制备金纳米棒,并考察阴离子表面活性剂种类对金纳米棒形貌及光学性质的影响。在十二烷基苯基磺酸钠(SDBS)存在下,金纳米棒的产率明显高于使用十二烷基磺酸钠的反应体系。对添加SDBS的种子生长法制备金纳米棒的反应条件进行优化,得到十六烷基三甲基溴化铵、SDBS、抗坏血酸和硝酸银的最佳浓度分别为0.04 mol.L-1、2.4 mmol.L-1、1.2 mmol.L-1和0.08 mmol.L-1。在此条件下,金纳米棒的生长在30 min内完成,所制备的金纳米棒表面等离子共振吸收峰位于823 nm,其横纵比为(5±0.03)。当改变生长液中硝酸银浓度时,金纳米棒的尺寸也随之发生改变。此外,我们还探讨了SDBS的作用机理。相对于经典种子生长法,新方法制备纳米金棒在尺寸可调性、单分散性和生物毒性方面明显改善,可广泛应用于各种光学及生物分析。