阿尔茨海默病病理鼠模型研究进展

阿尔茨海默病(AD)是一种以智能减退为主要特征的中枢神经系统疾病。AD危害极大,但病因复杂,病理不明,治疗方法不足。合适的AD鼠模型不仅能为富有科学价值的研究提供良好的实验研究材料,对于明确AD的病因、发病机制及在此基础上探索AD的预防、诊断及治疗等各方面也均发挥关键的作用。根据AD发病机制的假说:脑衰老、β淀粉样蛋白神经毒性学说、Tau蛋白异常磷酸化学说、铝中毒学说、胆碱能障碍学说及遗传基因突变学说等,AD鼠模型经历了从单一假说基础上的单一因素到多假说多因素造模的发展。AD模型鼠的发展为AD病理和诊治研究提供了研究的手段和途径。

慢性肾小球肾炎唾液蛋白质组无创伤分子诊断模型的研究

目的探讨液态芯片结合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术筛选慢性肾小球肾炎(CGN)患者的唾液蛋白质标记物并建立诊断模型,为CGN临床诊断提供依据。方法采集43例CGN患者和45例健康体检者的唾液标本,采用液态芯片(WCX磁珠)制备唾液样品,并结合MALDI-TOF-MS质谱仪对唾液标本进行蛋白质检测,筛选出2组间特异性表达差异蛋白,并结合生物信息学方法建立诊断模型。结果比较2组唾液蛋白质指纹图谱数据,共获得116个差异有统计学意义的蛋白峰(P<0.05),选择质荷比(m/z)为2 499.11、2 159.09、3 622.30Da的3个蛋白质峰用于构建最佳决策树模型,该诊断模型测试组总准确率为85.23%(75/88),灵敏度为83.72%(36/43),特异度为86.67%(39/45)。结论初步建立了CGN唾液蛋白质组诊断模型,为CGN的早期诊断提供了新的方法和途径。

含有D型氨基酸的新型毒肽——芋螺马芬在pH5的溶液结构(英文)

从大理石芋螺毒液中分离得到一种新型的含有D型氨基酸,并属于M超家族的芋螺毒素——芋螺马芬.应用2DNMR方法测定了芋螺马芬在pH5条件下的三维结构,由205个距离约束,8个二面角约束以及两个氢键约束得到了20个最优结构.它们骨架原子的均方根偏差为(0.074±0.029)nm.芋螺马芬在pH5条件下的二级结构是位于C端的一个短的310螺旋,同时在Ala6附近呈一个较为松散的环状区域.将芋螺马芬在pH5以及pH3条件下的溶液结构以及表面电荷进行了比较.尽管芋螺马芬在pH5条件下的溶液结构与在pH3条件下的相比,在C端有一个相似的二级结构单元,但是整体的骨架结构截然不同,在pH5条件下,芋螺马芬的表面结构从正面看起来像一个"曲臂".结构的差异揭示了芋螺马芬对pH相当敏感,预示着它在体内的活性可能与酸度密切相关.

乌鸡肽的营养成分及其功能特性研究

探讨乌鸡肽的营养成分及功能,为其深度开发打下基础。利用木瓜蛋白酶和风味蛋白酶水解乌骨鸡肌肉、活性炭脱色法制备乌鸡肽,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法检测乌鸡肽的总氨基酸及游离氨基酸含量及相对分子质量分布区间、纳升级液相色谱串联质谱(Nano liquid chromatography tandem mass spectrometry,Nano LC-MS/MS)技术鉴定其组成成分。结果表明,游离氨基酸占总氨基酸的比例为1.74%,总氨基酸含量较高者为Leu、Ala、His、Pro、Met和Phe,游离氨基酸含量较高者为Glu、Pro、Asp、Arg、Gly和Ala;相对分子质量分布范围为0至6 918 Da,其中1 084 Da以下的比例达到88.91%;Nano LC-MS/MS鉴定出源于107种蛋白质的2 287种肽段序列,其中种类最为丰富的蛋白为参与骨骼肌修复的蛋白及酶类。该研究较为全面的分析乌鸡肽的营养成分,并表征了其功能,为乌鸡肽的潜在应用价值研究打下基础。

HPLC-PAD法优化乌骨鸡活性肽分离纯化

乌骨鸡是一种具有药用价值的鸡种,乌骨鸡的鸡肉蛋白通过酶促水解后可获得多肽产物乌骨鸡活性肽,营养价值高,分离纯化活性肽是研究乌骨鸡应用价值的基础。利用装置C18反相色谱柱或TSKgel凝胶色谱柱的高效液相色谱仪进行乌骨鸡活性肽的分离优化,针对流动相、流速进行优化的同时,参考波长、进样量,以出峰数为主,结合分离度等考察分离效果。结果表明:C18柱的出峰数随甲醇含量及流速的降低而增加;三氟乙酸或磷酸盐作缓冲液时出峰数基本一致,但分离度不同;综合因素得pH 6.0磷酸盐/6%甲醇/水体系的流动相、0.2 mL/min的流速为该实验下的最佳分离条件。TSKgel柱的乙腈分离效果优于甲醇,梯度洗脱效果较好;综合因素得出0.1%三氟乙酸/(10%~25%)乙腈/水体系的流动相、0.5 mL/min的流速为该实验下的最佳分离条件。

胃癌与慢性胃炎的唾液蛋白指纹图谱鉴别诊断模型

目的:筛选胃癌患者与慢性胃炎患者及健康志愿者的唾液蛋白质组差异表达谱,并建立胃癌患者与慢性胃炎唾液无创伤分子诊断(判别)模型.方法:采集57例胃癌患者(术前且无放化疗)和28例慢性胃炎患者的唾液标本,用WCX(弱阳离子交换型)纳米磁珠联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-offlight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术进行检测,获得各标本的蛋白指纹图谱.用Biomarker Wizard软件分析所获得的蛋白指纹图谱找出差异蛋白,再用Biomarker Patterns 5.0.2建立鉴别诊断模型.结果:优化筛选建立了由m/z为4267.09、6564.85、2138.14等3个差异蛋白峰组成的胃癌与慢性胃炎的鉴别诊断模型,经临床回代检验该分子诊断模型对鉴别胃癌与慢性胃炎的灵敏度和特异度分别为96%(55/57)和86%(24/28),通过交叉验证法进一步验证诊断模型的可靠性,结果该模型的灵敏度和特异度分别为89%(51/57)和75%(21/28).结论:基于WCX结合MALDI-TOF-MS技术建立的唾液蛋白组分子诊断模型为胃癌与慢性胃炎的鉴别诊断提供了一种敏感无创的新方法.

柴胡疏肝散含药血清对衣霉素诱导NG108-15神经元内质网应激模型泛素基因表达的影响

目的:运用中药血清药理学方法研究柴胡疏肝散含药血清对内质网应激的保护作用并探讨其机制。方法:实验用衣霉素(TM)对NG108-15神经细胞进行诱导,建立内质网应激(ERS)细胞模型,柴胡疏肝散含药血清为干预组,采用逆转录聚合酶链式反应方法观察泛素(Ub)的m RNA表达水平。结果:各浓度柴胡疏肝散含药血清干预组Ub m RNA表达与模型组相比,表达水平明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:柴胡疏肝散方药对内质网应激引起的神经元损伤有显著的保护作用,其机制可能与泛素-蛋白酶体通路(UPP)相关联。

基于唾液蛋白指纹图谱的2型糖尿病分子诊断模型研究

目的:研究2型糖尿病患者的唾液蛋白质组,筛选差异蛋白质指纹图谱,建立2型糖尿病的蛋白质指纹图谱诊断模型。方法:采集2型糖尿病患者70例和健康体检者45例的唾液标本,采用WCX纳米磁珠联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术检测,筛选两组间特异性表达差异蛋白,并结合生物信息学方法建立诊断模型。结果:共获得158个差异有统计学意义的蛋白质峰(P<0.05)。选择质荷比(m/z)为3447.57 Da、4735.24 Da两个差异蛋白质峰构建最佳决策树模型,该模型的准确率为89.57%(103/115),敏感性91.4%(64/70),特异性为86.7%(39/45)。结论 :初步建立了2型糖尿病唾液蛋白质组诊断模型,为其早期诊断提供了新的方法和途径,具有重要的临床诊断意义。

大肠癌唾液蛋白指纹图谱分子诊断模型研究

目的研究建立大肠癌(colorectal cancer,CRC))唾液蛋白质指纹图谱新型分子诊断模型。方法采集34例肠癌患者、45例健康志愿者(正常组)的唾液标本,用弱阳离子交换型(WCX)纳米磁珠联合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术进行检测,获得各标本的蛋白指纹图谱。用Biomarker Wizard软件分析所获得的蛋白指纹图谱找出差异蛋白,再用Biomarker Patterns 5.0.2建立鉴别诊断模型。结果共检测到312个肠癌差异蛋白质峰,两组比值大于3(肠癌/正常对照>3,或者正常对照/肠癌>3),其中有37个差异蛋白质峰有统计学意义(P<0.05);其中有7个差异蛋白质峰肠癌组表达上调,28个差异蛋白质峰肠癌组表达下调,有35个差异蛋白质峰有显著差异(P<0.01)。筛选建立了由m/z为2 501.26、4 779.95、3 140.39的3个差异蛋白峰组成的肠癌与正常组的诊断模型,该模型的灵敏度和特异度分别为88%(30/34)和98%(44/45);通过交叉验证法进一步验证诊断模型的可靠性,结果该模型的灵敏度和特异度分别为85%(29/34)和88%(37/45)。结论用WCX结合MALDI-TOF-MS技术建立的唾液蛋白诊断模型为肠癌的诊断提供了新途径。

柴胡疏肝散对衣霉素诱导内质网应激模型细胞活性的影响

目的:探讨柴胡疏肝散含药血清对衣霉素诱导的内质网应激(ERS)细胞模型NG108-15细胞活性的影响。方法:采用衣霉素(TM)孵育NG108-15细胞,诱导ERS细胞模型,并将诱导后的细胞分成五组,模型组、安理申西药组、柴胡疏肝散高、中、低剂量组,分别采用正常空白血清、安理申含药血清、高、中、低剂量柴胡疏肝散含药血清进行干预,同时设置正常空白血清孵育的未经TM诱导的正常组。观察各组细胞的活性。结果:柴胡疏肝散高、中、低剂量组,细胞的活性明显高于模型组细胞的活性(P<0.05);西药安理申组和柴胡疏肝散高剂量组细胞的活性均明显高于其他各组(P<0.05),且两者之间无明显差异(P>0.05)。结论:柴胡疏肝散含药血清对正常NG108-15神经细胞没有明显毒副作用,但其可明显提高衣霉素诱导的内质网应激NG108-15细胞的生存率,其机制可能与柴胡疏肝散缓解衣霉素诱导的细胞内质网应激有关。

厚朴提取物对帕金森病小鼠模型黑质多巴胺能神经元的影响

目的:探讨厚朴提取物对帕金森病(PD)小鼠模型黑质区多巴胺能神经元的影响及其分子机理。方法:1–甲基–4–苯基–1,2,3,6–四氢吡啶盐酸盐(MPTP)诱导建立PD慢性病程和Lewy小体形成小鼠PD模型,实验分为PD模型组、正常对照组和厚朴提取物组,免疫组化染色检测及镜下观察各组中脑黑质区酪氨酸羟化酶细胞(TH)阳性细胞、α–突触核蛋白(α–synuelein)、E3连接酶(Parkin)和泛素(ubiquitin)的表达水平。结果:PD模型组小鼠黑质区TH表达与正常对照组相比显著降低,差异具有统计学意义(P <0.01),厚朴提取物组与正常对照组比较无明显减少,差异无统计学意义(P> 0.05),与PD模型组比较,差异具有统计学意义(P <0.01);与PD模型组相比,中药厚朴提取物组a–synuclein、Parkin、Ubiquitiu阳性细胞数均减少,差异具有统计学意义(P <0.01)。结论:中药厚朴提取物可改善和保护黑质区多巴胺能神经元神经细胞,其机理可能与减少细胞的凋亡。

厚朴提取物对帕金森病模型神经元内质网应激的影响

目的:观察中药厚朴提取物对帕金森病(PD)小鼠模型神经元内质网应激的影响。方法:1–甲基–4–苯基–1,2,3,6–四氢吡啶盐酸盐(MPTP)诱导建立PD慢性病程和Lewy小体形成小鼠PD模型,实验分为PD模型组、正常对照组和厚朴提取物组,采用反转录聚合酶链式反应方法(RT–PCR)检测黑质区组织Caspase–12 mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测黑质区组织Caspase–12、CHOP及Big/Grp78蛋白质的表达。结果:PD模型组Caspase–12 mRNA,Big/Grp78、Caspase–12及CHOP表达水平均较正常对照组显著增强,差异具有统计学意义(P <0.05);厚朴提取物组Caspase–12mRNA、Caspase–12及CHOP表达水平较PD模型组显著下调,差异具有统计学意义(P <0.05),而Big/Grp78蛋白较PD模型组显著上调,差异具有统计学意义(P <0.05),而且显著高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.01)。结论:腹腔注射MPTP可诱导小鼠脑黑质区神经元内质网应激损伤,厚朴提取物对内质网应激神经元损伤具有明显拮抗作用。

浅谈新目标英语课堂中的主体性

学生是学习的承担者,是保障其主体地位的决定者。教育中的主体性是指学生在主体意识指导下,主动参与教育活动的能动性。而新课程又以“为了每个学生的发展”为基本理念,教师应引导学生积极参与到教学活动中去,并充当教学活动的主角,而不是把教学看成“教师灌、学生装”,把学生看成是被动的接受知识的对象。二十一世纪要求青年一代具有广阔的胸怀,丰富的知识,聪敏的智慧,开拓的精神,高尚的道德,完善的人格。所以在这个基础上更要发展学生的能力,适应时代的要求。

电气仪表安装与调试方法

电器仪表的装置和调节试用在电器工作过程中始终都扮演着重要的角色，由于它的工作较为复杂，而且在工作的时候，不管哪一个阶段出现一点点问题，都会对总体设备的运转和应用带来严重的影响。基于此，本文主要对电气仪表的安装与调试方法进行了探讨．

胃癌脾虚证唾液蛋白指纹图谱分子诊断模型研究

目的研究建立胃癌脾虚证唾液蛋白质指纹图谱新型分子诊断模型。方法采集未经手术和放化疗治疗的57例胃癌患者(脾虚证组40例,非脾虚证组17例)、45例健康志愿者(正常对照组)的唾液标本,用弱阳离子交换型(WCX)纳米磁珠联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术进行检测,获得各组标本的蛋白指纹图谱。比较各组唾液蛋白质质谱数据,找出胃癌脾虚证组与正常对照组、胃癌脾虚证组与胃癌非脾虚证组之间具有统计学意义的差异表达蛋白质峰;采用决策树算法计算出多个变量即质荷比(m/z)变化对两组样本的判别价值,确定最优化的诊断模型。结果胃癌脾虚证组与正常对照组唾液蛋白质质谱比较共有106个差异蛋白质峰有统计学意义,胃癌脾虚证组与胃癌非脾虚证组唾液蛋白质质谱比较共有6个差异蛋白质峰有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。筛选建立了由m/z为5439.67、2411.67、3619.18共3个主要差异蛋白峰组成的胃癌脾虚证诊断模型;临床回代检验该模型的灵敏度和特异度分别达100%和93%;交叉验证法进一步验证诊断模型的灵敏度和特异度分别为87%和89%。结论基于WCX纳米磁珠结合MALDI-TOF-MS技术建立的胃癌脾虚证唾液蛋白质组无创性分子诊断模型敏感性高、特异性强,对胃癌脾虚证的诊断具有良好效率。

计算机网络安全漏洞及防范措施研究

计算机网络安全漏洞一直以来是长久困扰人们正常有序开展信息建设、营造有序网络环境的难题。因此笔者从网络安全漏洞的防范角度出发,科学探讨了基于防火墙技术、分析监控技术、动态调试技术实施高效网络安全管理的科学策略,对提升计算机网络安全防控性、良好运行服务秩序性有重要的推进作用。