三陰乳腺癌PD-L1(SP142)與CTLA-4、PTEN表達的關係研究

目的探討三陰乳腺癌PD-L1(SP142)與CTLA-4、PTEN表達的關係和意義。方法收集鏡湖醫院2008年1月~2018年6月間病理科136例乳腺癌標本,按乳腺癌分子分型分為三陰乳腺癌(TNBC)、管腔A型、管腔B型及HER2型乳腺癌,採用免疫組化檢測各型乳腺癌PD-L1(SP142)、CTLA-4和PTEN表達情況,並分析它們之間的關係。結果136例乳腺癌中,32.4%的病例PD-L1(SP142)陽性,其中48%(24/50)TNBC、11.9%(5/42)管腔A型、20%(3/15)管腔B型和41.4%(12/29)HER2型PD-L1(SP142)陽性;43.4%的病例CTLA-4陽性,其中52.0%(26/50)TNBC、31.0%(13/42)管腔A型、33.3%(5/15)管腔B型和50.9%(15/29)HER2型CTLA-4陽性;28.0%的病例PTEN陽性,其中52.0%(26/50)TNBC、31.0%(13/42)管腔A型、33.3%(5/15)管腔B型和50.9%(15/29)HER2型PTEN陽性。TNBC的PD-L1(SP142)表達與CTLA-4表達呈正相關(Spearman=0.409,P<0.05),與PTEN表達呈負相關(Spearman=-0.318,P<0.05)。結論TNBCPD-L1(SP142)與CTLA-4表達的正相關關係,提示聯合免疫治療可能使TNBC患者獲益,而TNBCPD-L1(SP142)與PTEN表達的負相關關係,提示TNBC同時遭受免疫逃逸和基因突變的雙重打擊,因此適合免疫治療和靶向PTEN聯合治療。

人類乳頭狀瘤病毒52型是澳門地区婦女宮頸感染最常見的類型

目的調查澳門地区婦女宮頸人類乳頭狀瘤病毒(HPV)感染的基因型,爲制訂預防宮頸癌策略提供依據。方法對澳門地区411例女性進行宮頸細胞學檢查和HPV分型檢測。宮頸細胞學採用SurePathTM塗片檢查和顯微鏡下觀察,而HPV分型採用HPV基因陣列檢測。將獲得的HPV基因分型和細胞學改變結果進行相關分析。結果年齡-HPV感染頻率呈雙峰形,第1高峰在25歲~30歲(21.3%),第2高峰期在35歲~40歲(14.4%)。25.6%HPV陽性病例為多種HPV類型的混合感染。在陽性病例中,大多數(82.3%)感染高/可能高風險的HPV病毒類型。HPV52是感染最常見的類型,佔陽性檢出率的18.5%,其次感染高/可能高風險的HPV病毒類型為HPV16(12.0%)、HPV58(10.2%)、HPV53(9.3%)、HPV31(8.8%)、HPV66(4.6%)、HPV18(3.7%)、HPV39、HPV42和HPV51(均為2.8%)、HPV56和HPV59(均為2.3%)、HPV35、HPV45和HPV68(均為1.4%)、HPV33(0.9%)。感染HPV52患者的細胞學改變與感染HPV16和HPV18的患者比較在統計學上無顯著性差異。結論由於HPV感染累及青年婦女,在澳門地区應儘早開展預防感染教育和疫苗接種。HPV52是最常檢出的類型,建議在HPV疫苗增加HPV52型,以提高HPV疫苗對澳門地区人群接種的成本效益。

應用顯色原位雜交(CISH)法檢測乳腺癌病人HER2基因擴增水準

乳腺癌是近年來發病率上升速度锻快的惡性腫瘤之一,發病年齡亦趨年輕化,過往乳腺癌治療主要有手術、放療、化療、内分泌治療,近年發現約20%~30%乳腺癌病人中存Her2/neu基因的異常擴增和蛋白的過度表逹。研究發現這些崽者預後比沒有HER2/neu擴增的患者差,而針對這些乳腺癌病人在治療上增多了分子靶向治療。

澳門地区婦女宮頸人類乳頭瘤病毒感染的分布與基因分型

目的特定人口人類乳頭狀瘤病毒(HPV)感染的流行病學資料對制訂預防宮頸癌的策略是十分必要的。方法檢測澳門登記做宮頸檢查的婦女1600人HPV感染的年齡分布和基因分型。結果本研究觀察到一個U形特定年齡流行曲綫,其第1高峰期在20~25歲(流行率10.0%),第2高峰期在51~55歲(患病率13.0%)。32.5%HPV陽性的婦女有多個HPV類型的混合感染,但不同年齡組別之間無顯著性差異(P=0.318)。大多數(84%)陽性標本感染高/可能高風險的HPV病毒類型,也呈U形特定年齡流行曲綫。相反,20~50歲婦女低/未知風險的HPV感染流行率較低(1.5%~2.5%),僅在51~55歲出現小高峰(4.5%)。HPV52是感染最常見的類型,佔陽性樣本的26.8%,其次爲HPV16(15%)、HPV68(10%)、HPV18和58(均爲8.9%)、HPV54(8.1%)、HPV53(7.3%)、HPV39(6.5%)、HPV33和HPV66(均爲5.7%)。結論由於有早期感染高峰,在中國澳門應儘早對青少年開展預防感染教育和疫苗接種,而對處於第2感染高風險HPV類型高峰期的老年婦女需重新評估篩查的範圍,並進一步探討中國澳門HPV52與高級別宮頸上皮内瘤變和浸潤性癌的病因關係。

乳腺癌PD-L1(SP142)表達與臨床病理特徵關係分析

目的探討程序性死亡配體-1(PD-L1)在乳腺癌免疫細胞(IC)中的表達及與臨床病理特徵的關係。方法收集鏡湖醫院乳腺癌標本,按乳腺癌分子分型分為三陰乳腺癌(TNBC)、管腔A型、管腔B型及HER2型,採用免疫組化檢測各型乳腺癌PD-L1(SP142)表達情況,並分析其與臨床病理特徵的關係。結果136例乳腺癌中,TNBC50例、管腔A型42例、管腔B型15型、HER2型29例。全部病例中,PD-L1(SP142)陽性(≥1%IC)44例(32.4%)。TNBC的PD-L1(SP142)陽性率(48%)明顯高於管腔A型(11.9%),管腔B型(20%),和HER2型(41.4%)。PD-L1(SP142)的表達與組織學分級和增殖指數相關(P<0.001),而與年齡、病理TNM分期、淋巴結轉移、臨床分期無關。結論PD-L1(SP142)表達的TNBC病人適用於PD-L1免疫治療。

宮頸細胞學ASCUS病例行高危型HPV檢測的意義

目的研究高危型HPV(HR-HPV)檢測,在意義不明確的不典型鱗狀上皮細胞(ASCUS)中的意義。方法選取ASCUS共370例,行HR-HPV檢測和宮頸組織活檢,並分析它們之間的關係。結果ASCUS的HR-HPV陽性率80.54%(298/370)。組織學陽性率39.46%(146/370)。HR-HPV陽性組中的組織學低級別鱗狀上皮内病變(LSIL)及高級別鱗狀上皮内病變(HSIL)檢出率明顯高於陰性組(P<0.01)。結論ASCUS患者需行HR-HPV檢測,HR-HPV感染者需行宮頸活檢,從而提高LSIL及HSIL的診斷率,以達到宮頸鱗狀上皮内病變的早期發現和預防宮頸癌的目的。

GPC3免疫組化在肝細胞癌診斷的意義

目的探討磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(glypican-3,GPC3)免疫組化在肝細胞癌病理診斷的應用價值。方法製作14個含731例肝腫瘤和腫瘤旁肝組織芯片,其中肝細胞癌357例、膽管癌26例、肝細胞癌癌旁肝組織包括肝硬化171例、血管瘤旁肝組織93例、肝轉移癌84例。全部病例採用免疫組化檢測GPC3(1G12克隆)蛋白表達,實驗設陽性對照。結果72.0%的肝細胞癌(257/357例)GPC3呈陽性反應,其餘374例非肝細胞癌病例均為陰性,包括膽管癌、肝轉移癌、肝細胞癌癌旁肝組織包括肝硬化和血管瘤旁肝組織。GPC3陽性率在不同的肝細胞癌組織學分級的差異在統計學上有非常顯著性意義(p<0.01),陽性率高低排列為III級(77.1%)、II級(73.3%)、I級(50%)和IV級(0%)為陰性。結論GPC3免疫組化檢測是肝細胞癌診斷的良好指標,敏感性達72.0%;也是區別瘤旁肝組織和肝轉移癌的鑒別診斷指標,其特異性達100%。

Glypican-3免疫組化在肝穿刺活檢肝細胞癌診斷的價值

目的磷脂醯肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)是一種硫酸乙醯肝素蛋白聚糖,僅在肝細胞癌(hepatocel-lular carcinoma,HCC)患者的血清中升高,而在正常人和良性肝臟疾病患者無升高。本文探討GPC3免疫組化在肝穿刺活檢中診斷HCC的價值。方法採用免疫組化檢測41例HCC、7例肝局灶結節增生或局灶肝細胞異型增生、4例肝硬化、4例病毒性肝炎或未見病變肝組織、4例膽管癌、21例轉移癌GPC3(1G12克隆)表達,並設陽性和陰性對照。結果80.5%的HCC(33/41例)GPC3呈陽性反應。相反,40例非HCC肝穿刺病例,包括肝局灶結節增生或局灶肝細胞異型增生、肝硬化、病毒性肝炎或未見病變肝組織、膽管癌和轉移癌GPC3均為陰性。GPC3免疫組化檢測在肝穿刺活檢HCC診斷的敏感性和特異性分別為80.5%和100%。結論GPC3免疫組化是肝穿刺活檢診斷HCC的良好指針,也是區別其他肝臟良性疾病和轉移癌的鑒別診斷指針。

顯色原位雜交評價乳腺癌HER-2狀態的意義及其免疫組化評價建議

目的檢測乳腺癌人類表皮生長因子受體2(HER-2)基因擴增和蛋白表達,為臨床使用分子靶向藥物Trastuzumab(Herceptin)治療乳腺癌提供依據。方法採用顯色原位雜交法檢測71例福爾馬林固定石蠟包埋的乳腺癌組織HER-2擴增狀態,檢測結果與免疫組化(IHC)比較。結果CISH檢測結果顯示,乳腺癌中HER-2高度擴增為28.2%(20/71)、低度擴增5.6%(4/71)、無擴增66.2%(47/71)。免疫組化染色3+的佔38.0%(27/71)、2+佔31.0%(22/71)、0~1+佔31.0%(22/71)。CISH結果與IHC結果高度相符。結論CISH是一種客觀和準確的評價乳腺癌HER-2狀態的方法。採用改良免疫組化評價標準,IHC檢測也是HER-2蛋白表達的有用指標。

澳門非小細胞肺癌EGFR基因突變研究

目的檢測澳門非小細胞肺癌(NSCLC)表皮生長因子受體(EGFR)基因變異狀態,探討EGFR突變與臨床病理特征的關係。方法收集NSCLC 127例。肺癌組織DNA採用石蠟組織試劑盒抽提,EGFR突變採用蠍形探針擴增阻滯系統PCR檢測。分析EGFR突變與患者年齡、性別、吸煙史、淋巴結轉移、腫瘤分級、臨床分期的關係。結果127例NSCLC中,EGFR突變53例(41.7%),其中1例18外顯子、27例19外顯子、4例20外顯子、20例21外顯子,1例同時出現18和20外顯子突變。女性患者EGFR突變率明顯高於男性,非吸煙者突變率明顯高於吸煙者,腺癌EGFR突變率為44.5%,其他類型均無突變。TTF-1陽性病例突變率明顯高於陰性病例。EGFR突變率在不同年齡組、組織學分級、臨床分期、有否淋巴結轉移的差異無統計學意義。結論澳門非小細胞肺癌EGFR突變主要發生在女性、非吸煙、腺癌患者及TTF-1陽性病例。胸水癌細胞EGFR突變檢測有利於晚期肺癌患者獲得靶向治療機會。

澳門非小細胞肺癌ALK免疫組化檢測

目的檢測非小細胞肺癌(NSCLC)間變性淋巴瘤激酶(ALK)表達及與臨床病理特徵的關係,為臨床靶向治療方案的確定提供參考。方法收集119例NSCLC,採用Ventana免疫組織化學方法檢測ALK。免疫組織化學結果與螢光原位雜交檢測進行比較。分析NSCLC ALK表逹與患者臨床病理特徵的關係。結果NSCLC組織中的ALK陽性率為9.24%(11/119)。免疫組織化學法與螢光原位雜交法檢測ALK的結果符合率為100%。ALK表逹與患者臨床特徵無關(P>0.05)。結論免疫組織化學方法能有效檢測出NSCLC ALK蛋白表逹,有幫助於臨床遴選出適合靶向藥物crizotinib治療的患者,而無需依賴NSCLC其它的臨床病理特征。

術中冰凍切片與術後病理診斷分析

目的總結和分析術中冰凍切片與術後病理診斷的誤差及其原因,從而提高術中冰凍診斷的水平。方法應用解剖和外科病理主任協會和中華醫學會的評核標準,對本院病理科2012~2013年間502例術中冰凍切片與術後病理診斷進行回顧性分析和統計,分析冰凍切片診斷誤差的原因,尋求提高術中冰凍切片診斷水平的方法。結果術中冰凍切片與術後病理診斷結果對照,診斷一致的有443例,佔88.2%。診斷不同的共有3例,佔0.6%。其中診斷較大不同2例,佔0.4%,延遲報告14例,佔2.8%,均屬合理延遲報告。不宜應用冰凍佔42例,約8.4%。在30min內報告發出的佔87.3%。結論結果符合外科病理主任協會和中華醫學會的評核標準。術中冰凍切片診斷質量的控制需要臨床、病理醫生及病理技術人員三方面的配合,科內亦要建立一個術中冰凍切片規範系統,設定一套持續質量改善的管理制度,並進行質控監測,才能不斷提高術中冰凍切片診斷水平。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3的表达在肝细胞癌诊断中的意义

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（ GPC3）免疫组织化学染色在肝细胞癌病理诊断的应用价值。方法 制作14个含731例肝肿瘤和肿瘤旁肝组织芯片，其中肝细胞癌357例、胆管癌26例、肝细胞癌癌旁肝组织包括肝硬化171例、血管瘤旁肝组织93例、肝转移癌84例。全部病例采用免疫组织化学检测GPC3（1G12克隆）蛋白表达，实验设阳性对照。结果 72.0％的肝细胞癌（257/357）GPC3呈阳性反应，其余374例非肝细胞癌病例均为阴性，包括胆管癌、肝转移癌、肝细胞癌癌旁肝组织（包括肝硬化和血管瘤旁肝组织）。GPC3阳性率在不同的肝细胞癌组织学分级的差异有统计学意义（P＜0.01），阳性率高低排列为Ⅲ级（77.1％，64/83）、Ⅱ级（73.3％，187/255）、Ⅰ级6/12和Ⅳ级（0）为阴性。结论 GPC3免疫组织化学检测是肝细胞癌诊断的良好指标，敏感性达72.0％；也是区别瘤旁肝组织和肝转移癌的鉴别诊断指标，其特异性达100％。

脂酰肌醇蛋白3在肝母细胞瘤中的表达特征及诊断意义

目的 探讨脂酰肌醇蛋白3（GPC3）在肝母细胞瘤中的表达方式和诊断意义.方法 制作5个含54例肝母细胞瘤（病例收集于2000至201 1年）的组织芯片,其中包括3例肿瘤组织活检标本、33例穿刺活检标本、5例一期手术切除标本、13例介入治疗后二期手术标本.54例肝母细胞瘤的组织学分型,单纯胎儿型22例,混合性胎儿和胚胎型24例,混合性上皮和间叶型8例.另选10例同龄瘤旁肝组织作为对照.全部病例采用免疫组织化学检测GPC3（1G12克隆）蛋白表达,并设阳性对照.结果 22例胎儿型的上皮细胞GPC3均呈阳性反应（100％）;24例混合性胎儿和胚胎型中的胎儿型上皮细胞GPC3阳性,胚胎型上皮细胞为微弱阳性或阴性,而小细胞未分化成分为阴性;8例混合性上皮和间叶型的上皮成分GPC3反应同胎儿型或胚胎型,而间叶成分不表达GPC3.同龄瘤旁肝细胞GPC3为阴性（0/10）.结论 GPC3在肝母细胞瘤的小细胞未分化成分不表达,在胚胎肝成分不表达或微弱表达,在胎儿肝成分明显表达,在出生后肝组织表达消失.GPC3免疫组织化学是婴幼儿肝母细胞瘤良好的诊断标志物.

应用双重原位杂交检测胃癌HER2基因扩增

目的探讨胃癌HER2基因扩增状态及其基因产物蛋白表达，以协助临床筛选抗HER2靶向治疗患者。方法收集胃癌活检标本共85例，进行HER2基因扩增和蛋白表达检测。HER2基因扩增状态采用双重原位杂交检测（HER2dual—ISHdetection），而HER2基因蛋白采用免疫组织化学[全程在全自动染色机（Ventana）]进行检测。结果85例胃癌病例中，有HER2基因扩增10例，扩增率为11．8％，无扩增75例，占88．2％。在有HER2基因扩增的10例病例中，7例HER2蛋白免疫组织化学为3＋，2例为2＋，1例为-／1＋；75例无基因扩增的病例，HER2蛋白免疫组织化学3＋为0例、2＋为18例（24．0％），-／1＋为57例（76．0％）。HER2基因扩增与HER2蛋白表达的相符率为77．6％。组织学上，有HER2阳性扩增的胃癌绝大多数为中等分化管状腺癌。结论双重原位杂交技术是检测胃癌活检组织HER2基因扩增的可靠和客观方法。临床上，仅少数有HER2基因扩增的胃癌适合抗HER2靶向治疗。