文心兰乙烯不敏感基因EIN2的克隆及表达分析

该研究采用PCR、RACE方法,对文心兰‘南茜'的乙烯不敏感蛋白基因(ethylene insensitive 2,EIN2)进行克隆及生物信息学分析,并采用qRT-PCR技术,对该基因在文心兰不同组织器官和不同花期中的表达模式进行分析。结果表明:(1)成功克隆得到文心兰EIN2基因序列,命名为OnEIN2(MH497388);该基因cDNA序列全长为4 177bp,其中开放阅读框3 879bp,编码1 292个氨基酸,3′非编码区长208bp,5′非编码区长90bp。(2)生物信息学分析显示OnEIN2是一个不稳定的疏水蛋白,含有跨膜结构,分子式为C6406H9988N1670O1897S47;蛋白质分子量142.22kD,理论等电点5.80。多序列比对和系统进化分析表明,文心兰EIN2与铁皮石斛EIN2的相似度最高(81.98%),二者亲缘关系也最为接近。(3)实时荧光定量PCR分析发现,OnEIN2基因在根、茎、叶花中均有表达,在花中表达量最高,茎中表达量最低;而在不同花期中,盛开期表达量最高,其次是衰老期。研究表明,文心兰OnEIN2基因在开花和衰老过程中可能有重要的作用。

羔羊育肥注意事项

读者吴娟问：羔羊育肥应注意什么？答：选择杂交羔羊进行育肥。所谓杂交羔羊就是不同羊品种间杂交生产的羔羊，由于所生羔羊有杂种优势，在相同的饲养管理下，杂种羔羊初生重大，羔羊成活率高，生长发育快，如果选择的杂交父本适宜，那么杂交羊育肥一般都比本地羊的经济效益高20%~30%。

低碳环保，防治蔬菜虫害有妙招

尿素具有破坏昆虫几丁质的作用，用尿素、洗衣粉、水按4:1:400的比例混合配制而成的“洗尿合剂”，对为害蔬菜、花卉的蚜虫、菜青虫、红蜘蛛等多种害虫具有良好防治效果；在菜青虫产卵期，用1%～3%石灰水或1%～3%过磷酸钙浸出液喷雾，一周内可避卵52%以上，第五天效果可达84%。

枣园秋施基肥有良法

1．肥料选购。一般以有机肥为主，如厩肥、土杂肥、饼肥、草木灰等，适最配以速效氮磷钾肥，以利增强树势。有机肥必须经过充分腐熟后施用，不要把生粪直接施入。若有机肥未经腐熟施入枣树根际，在土壤微生物分解过程中产生的热睦会使根系烧伤，导致树体衰弱、死亡或诱发腐烂病。有机肥施用请应占施肥最的90％以上。

CRISPR/Cas9介导的植物基因编辑技术研究进展

植物在生长与发育过程中,常遭遇物理、化学或生物性逆境,运用基因编辑技术（Genome editing）有机会了解并克服这些威胁.串联间隔短回文重复序列CRISPR/Cas（Clustered regulatory interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein）是近几年来新发现的一种基因定点编辑技术,不仅在基因组解析上是阐明基因功能的重要工具,在植物育种上更为划时代的重大突破.CRISPR系统与细菌抵御外源遗传物质入侵的免疫系统有关,目前,应用最多的是Ⅱ型的CRISPR/Cas9,只需核酸酶Cas9和成熟的crRNA：tracrRNA（CRISPR-derived RNA：trans-activating RNA）复合体就可对特定外源DNA序列进行剪切,该技术已经在拟南芥、烟草、大豆、番茄、马铃薯、水稻、小麦、玉米、高粱、矮牵牛、香蕉、甜橙、苹果、毛白杨及地钱等植物中实现了成功编辑,证明了此基因编辑技术的可行性,并达到植物抗逆境、延缓果实成熟、增加杀草剂耐受性、抗病等效果.Cas9和gRNA的启动子与gRNA的靶标数目对基因编辑效率有所影响,值得进一步深入研究.

高通量测序技术在园艺植物遗传育种中的应用

高通量测序技术以其高输出量和高分辨率的特征,可一次对几十万条到几百万条DNA分子进行测序,并对一个物种的转录组和基因组进行细致全面的分析.此外,高通量测序产生的海量数据促进了相应的算法和软件的不断更新.文章对第二代、第三代主流高通量测序平台的种类、技术原理及其在园艺植物遗传育种中的应用现况进行了综述,并对高通量测序技术应用需注意的问题及其未来的研究动向进行了简要讨论.