毛薯多糖提取分离工艺优化及抗氧化活性研究

毛薯是海南的传统杂粮,富含植物多糖。本研究以毛薯块茎粉末为材料探究毛薯多糖的提取工艺和抗氧化活性。采用热水提取法分别进行单因素和三因素三水平L_(9)(3^(3))正交实验,优化毛薯多糖提取工艺。毛薯粗多糖溶液经Sveag法除蛋白、透析、DEAE-52纤维素柱和SephadexG-100凝胶柱层析分离纯化得到毛薯精多糖。采用DPPH法、羟自由基法、超氧阴离子法和还原法检测毛薯多糖的抗氧化活性。结果表明:热水提取法最佳工艺条件为温度70℃、料液比1∶15、提取时间3 h,毛薯多糖提取率为1.94%;毛薯多糖经过多次分离纯化后,得到纯度均一的中性多糖;毛薯精多糖DPPH自由基清除能力较弱,1~5 mg/mL的清除率保持在10%左右,且随着多糖浓度的升高,清除能力逐渐下降;毛薯精多糖羟自由基活性随着多糖浓度的升高,活性逐渐增加,在5 mg/mL时清除率最高达到34.74%;毛薯精多糖超阴氧离子自由基活性随着多糖浓度的升高,活性逐渐降低,在1 mg/mL时清除率最高达67.35%;毛薯精多糖还原能力较弱,1~5 mg/mL的还原力最高为0.17。该研究优化了毛薯多糖的提取工艺,毛薯多糖具有一定的抗氧化活性,为后续毛薯功能性产品的开发和药物功能机理的研究奠定基础。

川续断皂苷Ⅵ含药血清对神经干细胞增殖分化的影响

目的探讨川续断皂苷Ⅵ含药血清对神经干细胞增殖分化的影响。方法体外建立神经干细胞培养体系,川续断皂苷Ⅵ含药血清(高、中、低浓度)处理神经干细胞72 h。CCK-8和BrdU法检测NSCs增殖;细胞免疫荧光检测NSCs分化;DAPI染色检测NSCs的凋亡;RT-PCR和Western blot分别检测mRNA和蛋白表达。结果川续断皂苷Ⅵ含药血清(高、中、低浓度)对NSCs增殖无影响(P>0.05)。川续断皂苷Ⅵ含药血清(高、中浓度)促进神经干细胞分化(P<0.05),促进Notch1、Tublin、caspase-3 mRNA表达(P<0.05),抑制Jagged1、Hes1、Sox2,Pax6 mRNA表达(P<0.05,P<0.01);高浓度川续断皂苷Ⅵ含药血清促进神经干细胞凋亡(P<0.05),促进GFAP mRNA表达(P<0.05),抑制Ngn1 mRNA表达(P<0.01)。中浓度川续断皂苷Ⅵ含药血清促进Tublin蛋白及Ngn1 mRNA表达,抑制GFAP、Jagged1蛋白及GFAP mRNA表达(P<0.05,P<0.01),而对caspase-3蛋白表达无影响。结论中浓度川续断皂苷Ⅵ含药血清通过抑制Jagged1的表达,阻断Notch信号通路,诱导NSCs向神经元方向分化。

续断水提液对小鼠急性毒性和遗传毒性的影响

目的:探讨续断水提液对小鼠的急性毒性和遗传毒性。方法:采用最大耐受剂量法评价续断水提液对小鼠的急性毒性,观察小鼠体重及心脏、脾脏、肝脏、肾脏指数的变化;采用微核实验和单细胞凝胶电泳实验评价其遗传毒性,将40只小鼠随机分成空白组(ig 10 m L·kg^(-1)生理盐水),环磷酰胺组(第4天开始注射0.1 g·kg^(-1)环磷酰胺),续断水提液高、中、低剂量组(ig 32,16,8 g·kg^(-1)续断水提液)。各组小鼠给药5 d后处死并解剖,取骨髓细胞检测嗜多染红细胞的微核率;取胸腺、肝脏及脾脏细胞检测续断水提液对小鼠DNA的损伤。结果:续断水提液经口给药小鼠的最大给药量为80 g·kg^(-1),该剂量对小鼠体重及心脏、脾脏、肝脏、肾脏指数均无显著影响。中、低剂量组小鼠嗜多染红细胞的微核率与空白组比较无显著性差异;但续断高剂量组微核率明显高于空白组(P<0.05)。高、中、低剂量组胸腺、脾脏、肝脏细胞尾部DNA百分率,尾矩略高于空白组,但均无显著性差异。结论:续断水提液对小鼠最大给药剂量为80 g·kg^(-1),属无毒级;中和低剂量续断水煎液对小鼠无遗传毒性作用,高剂量续断水提液可诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率升高,存在潜在的遗传毒性。